Способ непосредственного определения кожного холестерина в образцах, снимаемых с кожи с помощью клейкой ленты - RU2006137332A

Реферат

1. Способ измерения содержания холестерина в коже, который включает следующие стадии:

a) взятие клейкой ленты, содержащей подложку, покрытую, по меньшей мере, с одной стороны медицинским клейким веществом;

b) наложение клейкой ленты на выбранный участок кожи так, чтобы приклеить ленту к выбранному участку кожи;

c) снятие клейкой ленты с выбранного участка кожи с получением образца, характерного для внешнего слоя stratum corneum кожи, причем указанный образец приклеен к ленте таким образом, чтобы составные части кожи были доступными;

d) взятие источника аффинно-ферментативного соединения формулы А-С-В, где А - детектирующий агент, имеющий аффинность к холестерину, В - ферментативный визуализирующий агент, а С - связывающий агент, соединяющий друг с другом детектирующий агент и визуализирующий агент;

e) нанесение предварительно определенного количества аффинно-ферментативного соединения на предварительно определенный участок образца и обеспечение контакта с ним указанного соединения в течение периода времени, достаточного для связывания детектирующего агента с холестерином, содержащимся в доступных составных частях кожи; и

f) нанесение предварительно определенного количества агента, вызывающего проявление окрашивания, на предварительно определенный участок образца, при этом агент, вызывающий проявление окрашивания, реагирует с ферментативным визуализирующим агентом с образованием окрашенного продукта, имеющего цвет, указывающий на уровень содержания холестерина.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что детектирующий агент выбран из группы, состоящей из стероидных гликозидов, тритерпеновых гликозидов, гидрофобных белков, полиеновых антибиотиков и антител к холестерину.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что детектирующий агент является стероидным гликозидом.

4. Способ по п.3, отличающийся тем, что стероидным гликозидом является дигитонин.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что ферментативным визуализирующим агентом является фермент, выбранный из группы, состоящей из пероксидазы, щелочной фосфатазы, уреазы, галактозидазы, глюкозооксидазы и ацетилхолинэстеразы.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что ферментом является пероксидаза.

7. Способ по п.6, отличающийся тем, что пероксидаза представляет собой пероксидазу хрена.

8. Способ по п.6, отличающийся тем, что после стадии (е) пероксидазу активируют перекисью водорода с образованием активированной пероксидазы, и при этом используемый на стадии (f) агент, вызывающий проявление окрашивания, реагирует с активированной пероксидазой с образованием окрашенного продукта.

9. Способ по п.8, отличающийся тем, что на стадии (f) предварительно определенное количество водного раствора, содержащего перекись водорода и агент, вызывающий проявление окрашивания, наносят на предварительно определенный участок поверхности образца.

10. Способ по п.8, отличающийся тем, что агент, вызывающий проявление окрашивания, выбран из группы, состоящей из 2,2'-азино-ди-(3-этилбензтиазолин-6-сульфоновой кислоты) и 3,3',5,5'-тетраметил-бензидина.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что агент, вызывающий проявление окрашивания, представляет собой 3,3',5,5'-тетраметил-бензидин.

12. Способ по любому из пп.1-11, отличающийся тем, что связывающим агентом является сополимер малеинового ангидрида и N-винилпирролидона.

13. Способ по любому из пп.1-11, отличающийся тем, что подложка выполнена из полиэфира.

14. Способ по любому из пп.1-11, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой чувствительное к давлению клейкое вещество.

15. Способ по любому из пп.1-11, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе акрилата.

16. Способ по любому из пп.1-11, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе эластомера синтетического каучука.

17. Способ по любому из пп.1-11, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе силикона.

18. Способ по любому из пп.1-11, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество содержит эластомер, образованный блочными сополимерами состава стирол-изопрен-стирол или стирол-бутадиен-стирол.

19. Набор для применения в осуществлении способа, как он определен в п.1, содержащий

указанную клейкую ленту;

указанный источник аффинно-ферментативного соединения формулы А-С-В, где А, В и С таковы, как они определены в пункте 1; и

источник указанного агента, вызывающего проявление окрашивания.

20. Набор по п.19, отличающийся тем, что детектирующий агент выбран из группы, состоящей из стероидных гликозидов, тритерпеновых гликозидов, гидрофобных белков, полиеновых антибиотиков и антител к холестерину.

21. Набор по п.20, отличающийся тем, что детектирующий агент представляет собой стероидный гликозид.

22. Набор по п.21, отличающийся тем, что стероидный гликозид представляет собой дигитонин.

23. Набор по п.19, отличающийся тем, что ферментативным визуализирующим агентом является фермент, выбранный из группы, состоящей из пероксидазы, щелочной фосфатазы, уреазы, галактозидазы, глюкозооксидазы и ацетилхолинэстеразы.

24. Набор по п.23, отличающийся тем, что ферментом является пероксидаза.

25. Набор по п.24, отличающийся тем, что пероксидаза представляет собой пероксидазу хрена.

26. Набор по п.24, отличающийся тем, что он дополнительно включает водный раствор, содержащий перекись водорода, причем в этом растворе присутствует агент, вызывающий проявление окрашивания.

27. Набор по п.26, отличающийся тем, что агент, вызывающий проявление окрашивания, выбран из группы, состоящей из 2,2'-азино-ди-(3-этилбензтиазолин-6-сульфоновой кислоты) и 3,3',5,5'-тетраметил-бензидина.

28. Набор по п.27, отличающийся тем, что агент, вызывающий проявление окрашивания, представляет собой 3,3',5,5'-тетраметил-бензидин.

29. Набор по любому из пп.19-28, отличающийся тем, что связывающим агентом является сополимер малеинового ангидрида и N-винилпирролидона.

30. Набор по любому из пп.19-28, отличающийся тем, что подложка выполнена из полиэфира.

31. Набор по любому из пп.19-28, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой чувствительное к давлению клейкое вещество.

32. Набор по любому из пп.19-28, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе акрилата.

33. Набор, по любому из пп.19-28, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе эластомера синтетического каучука.

34. Набор по любому из пп.19-28, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе силикона.

35. Набор по любому из пп.19-28, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество содержит эластомер, образованный блочными сополимерами состава стирол-изопрен-стирол или стирол-бутадиен-стирол.

36. Способ измерения содержания холестерина в коже, включающий следующие стадии:

а) взятие клейкой ленты, содержащей подложку, покрытую, по меньшей мере, с одной стороны медицинским клейким веществом;

b) наложение клейкой ленты на выбранный участок кожи так, чтобы приклеить ленту к выбранному участку кожи;

c) снятие клейкой ленты с выбранного участка кожи с получением образца, показательного для внешнего слоя stratum corneum кожи, причем этот образец приклеен к ленте таким образом, чтобы составные части кожи были доступными;

d) взятие источника аффинного генерирующего сигнал соединения формулы А-С-В', где А - детектирующий агент, имеющий сродство к холестерину, В' - генерирующий сигнал индикаторный агент, а С - связывающий агент, соединяющий друг с другом детектирующий агент и индикаторный агент;

e) нанесение предварительно определенного количества аффинного генерирующего сигнал соединения на предварительно определенный участок образца и обеспечение контакта с ним указанного соединения в течение периода времени, достаточного для связывания детектирующего агента с холестерином, содержащимся в доступных составных частях кожи; и

f) измерение сигнала, генерированного индикаторным агентом, с получением значения, указывающего на уровень содержания холестерина.

37. Способ по п.36, отличающийся тем, что детектирующий агент выбран из группы, состоящей из стероидных гликозидов, тритерпеновых гликозидов, гидрофобных белков, полиеновых антибиотиков и антител к холестерину.

38. Способ по п.37, отличающийся тем, что детектирующий агент представляет собой стероидный гликозид.

39. Способ по п.38, отличающийся тем, что стероидный гликозид представляет собой дигитонин.

40. Способ по п.36, отличающийся тем, что индикаторный агент выбран из группы, состоящей из красителей, флуорофоров, радиоактивных изотопов, соединений золей металлов и хемилюминесцирующих соединений.

41. Способ по п.40, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой краситель.

42. Способ по п.41, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют с помощью спектрофотометрии.

43. Способ по п.41, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют с помощью колориметрии.

44. Способ по п.40, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой флурофор.

45. Способ по п.44, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют с помощью флуориметрии.

46. Способ по п.40, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой радиоактивный изотоп.

47. Способ по п.46, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют с помощью чувствительного к радиоактивности устройства.

48. Способ по п.40, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой соединение золя металла.

49. Способ по п.48, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют с помощью колориметрии.

50. Способ по п.40, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой хемилюминесцирующее соединение.

51. Способ по п.50, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют с помощью люминометрии.

52. Способ по любому из пп.36-51, отличающийся тем, что связывающий агент представляет собой сополимер малеинового ангидрида и N-винилпирролидона.

53. Способ по любому из пп.36-51, отличающийся тем, что подложка выполнена из полиэфира.

54. Способ по любому из пп.36-51, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой чувствительное к давлению клейкое вещество.

55. Способ по любому из пп.36-51, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе акрилата.

56. Способ по любому из пп.36-51, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе эластомера синтетического каучука.

57. Способ по любому из пп.36-51, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе силикона.

58. Способ по любому из пп.36-51, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество содержит эластомер, образованный блочными сополимерами состава стирол-изопрен-стирол или стирол-бутадиен-стирол.

59. Набор для применения в осуществлении способа, как он определен в п.36, содержащий

указанную клейкую ленту; и

указанный источник аффинного генерирующего сигнал соединения формулы А-С-В', где А, В' и С таковы, как они определены в пункте 36.

60. Набор по п.59, отличающийся тем, что детектирующий агент выбран из группы, состоящей из стероидных гликозидов, тритерпеновых гликозидов, гидрофобных белков, полиеновых антибиотиков и антител к холестерину.

61. Набор по п.60, отличающийся тем, что детектирующий агент представляет собой стероидный гликозид.

62. Набор по п.61, отличающийся тем, что стероидный гликозид представляет собой дигитонин.

63. Набор по п.59, отличающийся тем, что индикаторный агент выбран из группы, состоящей из красителей, флуорофоров, радиоактивных изотопов, соединений золей металлов и хемилюминесцирующих соединений.

64. Набор по п.63, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой краситель.

65. Набор по п.63, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой флурофор.

66. Набор по п.63, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой радиоактивный изотоп.

67. Набор по п.63, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой соединение золя металла.

68. Набор по п.63, отличающийся тем, что индикаторный агент представляет собой хемилюминесцирующее соединение.

69. Набор по любому из пп.59-68, отличающийся тем, что связывающий агент представляет собой сополимер малеинового ангидрида и N-винилпирролидона.

70. Набор по любому из пп.59-68, отличающийся тем, что подложка выполнена из полиэфира.

71. Набор по любому из пп.59-68, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой чувствительное к давлению клейкое вещество.

72. Набор по любому из пп.59-68, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе акрилата.

73. Набор по любому из пп.59-68, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе эластомера синтетического каучука.

74. Набор по любому из пп.59-68, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе силикона.

75. Набор по любому из пп.59-68, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество содержит эластомер, образованный блочными сополимерами состава стирол-изопрен-стирол или стирол-бутадиен-стирол.

76. Способ измерения содержания холестерина в коже, включающий следующие стадии:

a) взятие клейкой ленты, содержащей подложку, покрытую, по меньшей мере, с одной стороны медицинским клейким веществом;

b) наложение клейкой ленты на выбранный участок кожи так, чтобы приклеить ленту к выбранному участку кожи;

c) снятие клейкой ленты с выбранного участка кожи с получением образца, показательного для внешнего слоя stratum corneum кожи, причем образец приклеен к ленте таким образом, чтобы составные части кожи были доступными;

d) взятие источника холестерин-оксидазы как детектирующего агента, обладающего сродством к холестерину;

е) нанесение предварительно определенного количества холестерин-оксидазы на предварительно определенный участок образца и обеспечение контакта с ним холестерин-оксидазы в течение периода времени, достаточного для окисления холестерина и образования перекиси водорода; и

f) измерение количества перекиси водорода, образовавшейся на стадии (е), причем измеренное количество перекиси водорода указывает на уровень содержания холестерина.

77. Способ по п.76, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют с помощью электрохимического сенсора.

78. Способ по п.77, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют амперометрически с помощью электрода.

79. Способ по п.76, отличающийся тем, что стадию (f) осуществляют спектрофотометрически после добавления пероксидазы и колориметрического индикатора.

80. Способ по п.79, отличающийся тем, что пероксидаза представляет собой пероксидазу хрена.

81. Способ по п.79, отличающийся тем, что колориметрически индикатор представляет собой 2,2'-азино-ди-(3-этилбензтиазолин-6-сульфоновую кислоту).

82. Способ по п.79, отличающийся тем, что колориметрический индикатор представляет собой 3,3',5,5'-тетраметил-бензидин.

83. Способ по п.79, отличающийся тем, что колориметрический индикатор представляет собой многокомпонентный реагент окислительной дегидрогенизации Trinder или Ngo-Lenhoff.

84. Способ по любому из пп.76-83, отличающийся тем, что подложка выполнена из попиэфира.

85. Способ по любому из пп.76-83, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой чувствительное к давлению клейкое вещество.

86. Способ по любому из пп.76-83, отличающийся тем. что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе акрилата.

87. Способ по любому из пп.76-83, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе эластомера синтетического каучука.

88. Способ по любому из пп.76-83, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе силикона.

89. Способ по любому из пп.76-83, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество содержит эластомер, образованный блочными сополимерами состава стирол-изопрен-стирол или стирол-бутадиен-стирол.

90. Набор для применения в осуществлении способа, как он определен в п.76, содержащий

указанную клейкую ленту; и

указанный источник холестерин-оксидазы.

91. Набор для применения в осуществлении способа, как он определен в п.79, содержащий

указанную клейкую ленту;

указанный источник холестерин-оксидазы,

источник пероксидазы; и

источник колориметрического индикатора.

92. Набор по п.91, отличающийся тем, что пероксидаза представляет собой пероксидазу хрена.

93. Набор по п.91, отличающийся тем, что колориметрический индикатор представляет собой 2,2'-азино-ди-(3-этилбензтиазолин-6-сульфоновую кислоту).

94. Набор по п.91, отличающийся тем, что колориметрический индикатор представляет собой 3,3',5,5'-тетраметил-бензидин.

95. Набор по любому из пп.90-94, отличающийся тем, что подложка выполнена из полиэфира.

96. Набор по любому из пп.90-94, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой чувствительное к давлению клейкое вещество.

97. Набор по любому из пп.90-94, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе акрилата.

98. Набор по любому из пп.90-94, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе эластомера синтетического каучука.

99. Набор по любому из пп.90-94, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество представляет собой клейкое вещество на основе силикона.

100. Набор по любому из пп.90-94, отличающийся тем, что медицинское клейкое вещество содержит эластомер, образованный блочными сополимерами состава стирол-изопрен-стирол или стирол-бутадиен-стирол.

101. Набор по любому из пп.19-28, 59-68 и 90-94, отличающийся тем, что клейкая лента помещена в закрывающееся устройство, причем закрывающееся устройство имеет блок для отбора образцов, содержащий клейкую ленту, и крышку, приспособленную для наложения на блок для отбора образцов и заключения клейкой ленты внутри устройства.

102. Набор по п.101, отличающийся тем, что клейкая лента плотно закрыта внутри устройства, когда крышка наложена на блок для отбора образцов.

103. Набор по п.102, отличающийся тем, что, по меньшей мере, один элемент из крышки или блока для отбора образцов снабжен по краю ободком, а другой элемент из крышки или блока для отбора образцов снабжен по краю выемкой, приспособленной для вхождения в нее ободка, чтобы таким образом лента была плотно закрыта внутри устройства.

104. Набор по п.101, отличающийся тем, что крышка соединена с блоком для отбора образцов шарниром.

105. Набор по п.101, отличающийся тем, что, по меньшей мере, часть блока для отбора образцов выполнена так, что может быть вырезана из закрывающегося устройства с получением погружной полоски, причем погружная полоска на одном ее конце свободна от клейкой ленты, а второй ее конец имеет клейкую ленту.

106. Набор по п.101, отличающийся тем, что, по меньшей мере, часть блока для отбора образцов выполнена так, что может быть вырезана из закрывающегося устройства с получением диска, причем диск имеет клейкую ленту, находящуюся на одной его стороне.

107. Набор по п.106, отличающийся тем, что он дополнительно содержит режущее приспособление, предназначенное для вырезания диска из устройства.

108. Набор по п.107, отличающийся тем, что закрывающееся устройство снабжено маркером на его внешней поверхности, указывающим, где должно быть приложено режущее приспособление.

109. Набор по п.107, отличающийся тем, что режущее приспособление снабжено поршнем для выталкивания диска из конца резака после того, как диск вырезан.

110. Устройство для отбора образцов при помощи клейкой ленты для применения в получении образцов кожи, характеризующееся тем, что это устройство содержит

(a) блок для отбора образцов, имеющий поверхность;

(b) клейкую ленту, расположенную, по меньшей мере, на части поверхности блока для отбора образцов, причем клейкая лента имеет медицинское клейкое вещество, нанесенное с противоположной от поверхности стороны; и

(c) крышку, приспособленную для наложения на блок для отбора образцов и плотного закрывания, по меньшей мере, части клейкой ленты внутри устройства, когда крышка наложена на блок для отбора образцов.

111. Устройство по п.110, отличающееся тем, что, по меньшей мере, или крышка, или блок для отбора образцов снабжен по краю ободком, а другой элемент из крышки или блока для отбора образцов снабжен по краю выемкой, приспособленной для вхождения в нее ободка, чтобы таким образом лента была плотно закрыта внутри устройства.

112. Устройство по любому из пп.110 или 111, отличающееся тем, что крышка соединена с блоком для отбора образцов шарниром.

113. Устройство по любому из пп.110 или 111, отличающееся тем, что, по меньшей мере, часть блока для отбора образцов выполнена так, что может быть вырезана из закрывающегося устройства с получением погружной полоски, причем погружная полоска на одном ее конце свободна от клейкой ленты, а второй ее конец имеет клейкую ленту.

114. Устройство по любому из пп.110 или 111, отличающееся тем, что, по меньшей мере, часть блока для отбора образцов выполнена так, что может быть вырезана из закрывающегося устройства с получением диска, причем диск имеет клейкую ленту, находящуюся на одной его стороне.