Фрагмент днк, плазмидный вектор, способ полученияполипептида и полипептид, обладающий il-1β протеазной активностью - RU2206611C2
Код документа: RU2206611C2
Чертежи
Показать все 73 чертежа(ей)
Описание
Текст описания в факсимильном виде. Тм
Реферат
Изобретение относится к получению биологически активной IL-1β протеазы с помощью технологии рекомбинантных ДНК и может быть использовано в медицине. Изолирована последовательность ДНК, кодирующая полную аминокислотную последовательность (предшественник) IL-1β протеазы, в которой идентифицирована область, кодирующая "зрелую" форму фермента. В результате экспрессии названных последовательностей ДНК в культуре клеток млекопитающего синтезируется биологически активная IL-1β протеаза, обладающая способностью расщеплять неактивный предшественник IL-1β в положении между 116 и 117 аминокислотными остатками с образованием активного цитокина. 4 с.п.ф-лы, 2 табл., 7 ил.
Формула
1. Фрагмент ДНК, кодирующий полипептид, обладающий IL-1β протеазной
активностью и имеющий полинуклеотидную последовательность от нуклеотида 1 до нуклеотида 1232, или от нуклеотида 374 до нуклеотида 1232 в SEQ ID NO:1, или подобную последовательность, определяемую
вырожденностью генетического кода.
2. Плазмидный вектор для экспрессии IL-1β протеазной активности в клетках млекопитающего, содержащий в сайте клонирования фрагмент
ДНК по п.1.
3. Способ получения полипептида, обладающего IL-1β протеазной активностью, включающий стадии: a) культивирования клеток млекопитающего, продуцирующих
указанный полипептид, в условиях, подходящих для его биосинтеза; и б) выделения и очистки продукта, в котором клетки, продуцирующие указанный полипептид, трансформированы рекомбинантным
экспрессирующим вектором, включающим фрагмент ДНК от нуклеотида 374 до нуклеотида 1232 в SEQ ID NO:1, или подобную последовательность, определяемую вырожденностью генетического кода.
4. Полипептид, обладающий IL-1β протеазной активностью, получаемый способом по п.3.
