Способ получения белков в pichia pastoris, у которых отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность по отношению к антителам против антигенов клетки-хозяина - RU2012120102A
Код документа: RU2012120102A
Реферат
1. Способ получения рекомбинантного гликопротеина в, у которого отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, который включает:(a) предоставление рекомбинантной клетки-хозяина, которая не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 2 в отношениигликана илигликана и не проявляет по меньшей мере одну активность, выбранную из активности β-маннозилтрансферазы 1 и активности β-маннозилтрансферазы 3 в отношениигликана илигликана, и которая содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую рекомбинантный гликопротеин;(b) выращивание клетки-хозяина в среде в условиях, эффективных для экспрессии рекомбинантного гликопротеина; и(c) извлечение рекомбинантного гликопротеина из среды с получением рекомбинантного гликопротеина, у которого отсутствует поддающаяся обнаружению перекрестная связующая активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина.2. Способ по п.1, где клетка-хозяин не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 2, активность β-маннозилтрансферазы 1 и активность β-маннозилтрансферазы 3 в отношениигликана илигликана.3. Способ по п.1, где клетка-хозяин дополнительно не проявляет активность β-маннозилтрансферазы 4 в отношениигликана илигликана.4. Способ по п.1, где поддающуюся обнаружению перекрестную связующую активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, определяют в сэндвич-ELISA.5. Способ по п.1, где поддающуюся обнаружению перекрестную связующую активность с антителами, полученными против антигенов клетки-хозяина, определяют в вестерн-блоттинге.6. Способ по п.1, где рекомбинантн
