Т-клеточные рецепторы с повышенным сродством и способы их получения - RU2014148286A
Код документа: RU2014148286A
Реферат
1. Способ получения T-клеточного рецептора (TCR) с повышенным сродством, включающийa. приведение гемопоэтических клеток-предшественников в контакт со стромальными клетками и пептидным антигеном при условиях и в течение времени, достаточных для индукции дифференцировки гемопоэтических клеток-предшественников в DN TCRαβтимоциты,b. выделение последовательностей нуклеиновой кислоты, кодирующих разные TCRβ-цепи из DN TCRαβтимоцитов, и введение последовательностей нуклеиновой кислоты, кодирующих TCRβ-цепи, в клетки, способные экспрессировать TCR на клеточной поверхности и содержащие последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую TCRα-цепь из этапа (a); иc. идентификацию TCR с повышенным сродством,где гемопоэтические клетки-предшественники содержат неэндогенную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую TCRα-цепь из исходного TCR, специфичного в отношении пептидного антигена, ипри этом стромальные клетки содержат неэндогенную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую Delta-like-1 или Delta-like-4, и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую молекулу MHC.2. Способ по п. 1, где TCRβ-цепь выделена из исходного TCR.3. Способ по п. 1, где гемопоэтические клетки-предшественники включают клетки-предшественники тимоциты или эмбриональные стволовые клетки.4. Способ по п. 1, где гемопоэтические клетки-предшественники включают гемопоэтические стволовые клетки, полученные из костного мозга или пуповинной крови.5. Способ по п. 1, где вирусный вектор применяют для введения неэндогенной последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей TCRα-цепь, специфичную в отношении пептидного антигена, в гемопоэтические клетки-предшественники.6. Способ по п. 5, где вирусный вектор является р
