Новый fab-фрагмент антитела против muc1 человека - RU2019118653A
Код документа: RU2019118653A
Формула
1. Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, выбранный из группы, состоящей из следующих (а) и (b):
(a) Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 8 или SEQ ID NO: 10, и легкую цепь, содержащую вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 12; и
(b) Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, полученную из вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 8 или SEQ ID NO: 10, посредством модификации глутамина в положении аминокислоты 1 SEQ ID NO: 8 или SEQ ID NO: 10 в пироглутаминовую кислоту, и легкую цепь, содержащую вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 12.
2. Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.1, который выбран из группы, состоящей из следующих (а) и (b):
(a) Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 4, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 6; и
(b) Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, полученный из фрагмента тяжелой цепи, состоящего из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 4, путем модификации глутамина в положении аминокислоты 1 SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 4 в пироглутаминовую кислоту, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 6.
3. Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.1, который выбран из группы, состоящей из следующих (а) и (b):
(a) Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 10, и легкую цепь, содержащую вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 12; и
(b) Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, полученную из вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 10, путем модификации глутамина в положении аминокислоты 1 SEQ ID NO: 10 в пироглутаминовую кислоту, и легкую цепь, содержащую вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 12.
4. Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.3, который выбран из группы, состоящей из следующих (а) и (b):
(a) Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 4, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 6; и
(b) Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, полученный из фрагмента тяжелой цепи, состоящего из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 4, путем модификации глутамина в положении аминокислоты 1 SEQ ID NO: 4 в пироглутаминовую кислоту, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 6.
5. Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.4, который представляет собой Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 4, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 6.
6. Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.4, который представляет собой Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, полученный из фрагмента тяжелой цепи, состоящего из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 4, путем модификации глутамина в положении аминокислоты 1 SEQ ID NO: 4 в пироглутаминовую кислоту, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 6.
7. Конъюгат, содержащий одну или более метящих частей и Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по любому из пп.1-6.
8. Конъюгат по п.7, отличающийся тем, что метящая часть представляет собой (i) лиганд и линкер, (ii) лиганд, (iii) флуоресцентный краситель и линкер или (iv) флуоресцентный краситель.
9. Конъюгат по п.8, отличающийся тем, что метящая часть представляет собой (i) лиганд и линкер или (ii) лиганд.
10. Конъюгат по п.9, отличающийся тем, что лиганд представляет собой лиганд, представленный следующей формулой (А):
[Химическая Формула 1]
где волнистая линия представляет собой связывание с Fab-фрагментом антитела против MUC1 человека или линкером.
11. Конъюгат по п.10, отличающийся тем, что метящая часть представляет собой лиганд и линкер, представленные следующей формулой (A'):
[Химическая Формула 2]
где волнистая линия представляет собой связывание с Fab-фрагментом антитела против MUC1 человека.
12. Конъюгат по п.11, отличающийся тем, что Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека связан через его аминогруппу с атомом углерода концевой группы C(=S) метящей части.
13. Конъюгат, выбранный из группы, состоящей из следующих (а)-(с):
(а) конъюгат по п.12, отличающийся тем, что Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека представляет собой Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.5;
(b) конъюгат по п.12, отличающийся тем, что Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека представляет собой Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.6; и
(с) конъюгат, который представляет собой смесь (a) и (b).
14. Конъюгат по любому из пп.9-13, дополнительно содержащий металл.
15. Конъюгат по п.14, отличающийся тем, что металл представляет собой радиоизотоп металла.
16. Конъюгат по п.15, отличающийся тем, что металл представляет собой89Zr.
17. Конъюгат по п.13, дополнительно содержащий89Zr.
18. Конъюгат по п.8, отличающийся тем, что метящая часть представляет собой (i) флуоресцентный краситель и линкер или (ii) флуоресцентный краситель.
19. Конъюгат по п.18, отличающийся тем, что флуоресцентный краситель представляет собой флуоресцентный краситель, выбранный из группы, состоящей из следующей формулы (B) и следующей формулы (C):
[Химическая Формула 3]
[Химическая Формула 4]
где волнистая линия представляет собой связывание с Fab-фрагментом антитела против MUC1 человека или линкером.
20. Конъюгат по п.19, отличающийся тем, что волнистая линия представляет собой связывание с Fab-фрагментом антитела против MUC1 человека, и Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека связывается через его аминогруппу с атомом углерода концевой группы C(=О) метящей части.
21. Конъюгат по п.20, отличающийся тем, что метящая часть представляет собой флуоресцентный краситель, представленный формулой (B).
22. Конъюгат, выбранный из группы, состоящей из следующих (а)-(с):
(а) конъюгат по п.21, отличающийся тем, что Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека представляет собой Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.5;
(b) конъюгат по п.21, отличающийся тем, что Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека представляет собой Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.6; и
(с) конъюгат, который представляет собой смесь (a) и (b).
23. Конъюгат по п.20, отличающийся тем, что метящая часть представляет собой флуоресцентный краситель, представленный формулой (С).
24. Конъюгат, выбранный из группы, состоящей из следующих (а)-(с):
(а) конъюгат по п.23, отличающийся тем, что Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека представляет собой Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.5;
(b) конъюгат по п.23, отличающийся тем, что Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека представляет собой Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.6; и
(с) конъюгат, который представляет собой смесь (a) и (b).
25. Полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из следующих (a) и (b):
(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1; и
(b) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1.
26. Полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из следующих (a) и (b):
(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5; и
(b) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5.
27. Экспрессирующий вектор, содержащий следующие (а) и/или (b):
(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1; и
(b) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1.
28. Экспрессирующий вектор, содержащий следующие (а) и/или (b):
(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5; и
(b) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5.
29. Клетка-хозяин, выбранная из группы, состоящей из следующих (a)-(d):
(а) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1;
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1; и
(d) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1, и экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1.
30. Клетка-хозяин, выбранная из группы, состоящей из следующих (a)-(d):
(а) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5;
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь антитела Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5; и
(d) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5, и экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5.
31. Способ получения Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека, включающий стадию культивирования клетки-хозяина, выбранной из группы, состоящей из следующих (a)-(c), для экспрессии Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека:
(а) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь антитела Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека по п.1;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1, и экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1; и
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1, и клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.1.
32. Способ получения Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека, включающий стадию культивирования клетки-хозяина, выбранной из группы, состоящей из следующих (a)-(c), для экспрессии Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека:
(а) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5, и экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против человека MUC1 по п.5; и
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека, по п.5, и клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека по п.5.
33. Способ получения конъюгата, включающего метящую часть и Fab-фрагмент антитела против MUC1 человека, включающий стадии: получения Fab-фрагмента антитела против MUC1 человека способом по п.31 или 32; и ковалентное связывание Fab-фрагмента с метящей частью.
34. Способ получения конъюгата по п.33, отличающийся тем, что стадия ковалентного связывания Fab-фрагмента с метящей частью представляет собой стадию i) связывания Fab-фрагмента через линкер с лигандом или ii) ковалентного связывания Fab-фрагмента непосредственно с лигандом.
35. Способ получения конъюгата по п.34, дополнительно включающий стадию мечения лиганда конъюгата радиоизотопом металла.
36. Способ получения конъюгата по п.33, отличающийся тем, что стадия ковалентного связывания Fab-фрагмента с метящей частью представляет собой стадию i) связывания Fab-фрагмента через линкер с флуоресцентным красителем или ii) ковалентного связывания Fab-фрагмента непосредственно с флуоресцентным красителем.
37. Композиция для диагностики, содержащая один или более конъюгатов по любому из пп.7-24 и фармацевтически приемлемый носитель.
38. Композиция для диагностики по п.37, отличающаяся тем, что конъюгат представляет собой конъюгат по любому из пп.17, 22 и 24.
39. Композиция для диагностики по п.38, отличающаяся тем, что конъюгат представляет собой конъюгат по п.17.
40. Композиция для диагностики по п.38, отличающаяся тем, что конъюгат представляет собой конъюгат по п.22.
41. Композиция для диагностики по п.38, отличающаяся тем, что конъюгат представляет собой конъюгат по п.24.
42. Композиция для диагностики по любому из пп.37-41, которая используется для диагностики злокачественного новообразования, клетки которого экспрессируют MUC1 человека.
43. Композиция для диагностики по п.42, отличающаяся тем, что злокачественное новообразование представляет собой рак молочной железы или рак мочевого пузыря.
44. Фармацевтическая композиция, содержащая один или более конъюгатов по любому из пп.7-24 и фармацевтически приемлемый носитель.
45. Фармацевтическая композиция по п.44, отличающаяся тем, что конъюгат представляет собой конъюгат по любому из пп.17, 22 и 24.
46. Фармацевтическая композиция по п.45, отличающаяся тем, что конъюгат представляет собой конъюгат по п.24.
47. Фармацевтическая композиция по любому из пп.44-46, которая представляет собой фармацевтическую композицию для лечения злокачественного новообразования, клетки которого экспрессируют MUC1 человека.
48. Фармацевтическая композиция по п.47, отличающаяся тем, что злокачественное новообразование представляет собой рак молочной железы или рак мочевого пузыря.
49. Применение конъюгата по любому из пп.7-24 для получения композиции для диагностики рака молочной железы или рака мочевого пузыря и/или для получения фармацевтической композиции для лечения рака молочной железы или рака мочевого пузыря.
50. Конъюгат по любому из пп.7-24 для применения при диагностике и/или лечении рака молочной железы или рака мочевого пузыря.
51. Способ диагностики рака молочной железы или рака мочевого пузыря, включающий введение пациенту до или после операции конъюгата по любому из пп.7-24.
52. Способ лечения рака молочной железы или рака мочевого пузыря, включающий стадию введения терапевтически эффективного количества конъюгата по любому из пп.7-24.
