Новый fab-фрагмент антитела против ceacam5 человека - RU2020105654A
Код документа: RU2020105654A
Формула
1. Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, выбранный из группы, состоящей из следующих (а) и (b):
(a) Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, соответствующей положениям аминокислот 1-121 последовательности SEQ ID NO: 2, и легкую цепь, содержащую вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, соответствующей положениям аминокислот 1-112 SEQ ID NO: 4; и
(b) Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, полученную из вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, соответствующей положениям аминокислот 1-121 последовательности SEQ ID NO: 2, посредством модификации глутаминовой кислоты в положении аминокислоты 1 SEQ ID NO: 2 в пироглутаминовую кислоту, и легкую цепь, содержащую вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, соответствующей положениям аминокислот 1-112 SEQ ID NO: 4.
2. Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека по п.1, выбранный из группы, состоящей из следующих (а) и (b):
(a) Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 2, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 4; и
(b) Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, содержащий фрагмент тяжелой цепи, полученный из фрагмента тяжелой цепи, состоящего из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 2, путем модификации глутаминовой кислоты в положении аминокислоты 1 SEQ ID NO: 2 в пироглутаминовую кислоту, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 4.
3. Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека по п.2, содержащий фрагмент тяжелой цепи, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 2, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 4.
4. Конъюгат, содержащий меченый фрагмент и Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека по любому из пп.1-3.
5. Конъюгат по п.4, отличающийся тем, что меченый фрагмент представляет собой (i) лиганд и линкер, (ii) лиганд, (iii) флуоресцентный краситель и линкер или (iv) флуоресцентный краситель.
6. Конъюгат по п.5, отличающийся тем, что меченый фрагмент представляет собой (i) лиганд и линкер или (ii) лиганд.
7. Конъюгат по п. 6, отличающийся тем, что лиганд представляет собой лиганд, представленный следующей формулой (А):
[Химическая Формула 1]
где волнистая линия представляет собой связывание с Fab-фрагментом антитела против CEACAM5 человека или с линкером.
8. Конъюгат по п.6, отличающийся тем, что меченый фрагмент представляет собой (i) лиганд и линкер, где лиганд и линкер представляют собой группу, представленную следующей формулой (A'):
[Химическая Формула 2]
где волнистая линия представляет собой связывание с Fab-фрагментом антитела против CEACAM5 человека.
9. Конъюгат по п.8, отличающийся тем, что Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека связан с атомом углерода концевой C(=S)-группы меченого фрагмента через аминогруппу в Fab-фрагменте.
10. Конъюгат по п.6, представленный следующей формулой (I):
(L-X)p-Ab (I)
где Ab представляет собой Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека;
L представляет собой лиганд;
Х представляет собой линкер или связь; и
р представляет собой натуральное число от 1 до 25.
11. Конъюгат по п.10, отличающийся тем, что L представляет собой лиганд, представленный следующей формулой (А):
[Химическая Формула 3]
где волнистая линия представляет собой связывание с Х (или Ab, когда Х является связью).
12. Конъюгат по п.8 или 11, представленный следующей формулой (II):
[Химическая Формула 4]
где Ab представляет собой Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека; и
р представляет собой натуральное число от 1 до 25, где
Ab связано с атомом углерода концевой C(=S)-группы меченого фрагмента через аминогруппу в Ab.
13. Конъюгат по любому из пп.10-12, отличающийся тем, что р представляет собой натуральное число от 1 до 16.
14. Конъюгат по любому из пп.10-12, отличающийся тем, что р представляет собой натуральное число от 4 до 16.
15. Конъюгат по любому из пп.5-14, дополнительно содержащий металл.
16. Конъюгат по п.15, отличающийся тем, что металл представляет собой радиоизотоп металла.
17. Конъюгат по п.15, отличающийся тем, что металл представляет собой89Zr.
18. Конъюгат по п.16 или 17 для применения в качестве ПЭТ-индикатора.
19. Полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из следующих (а) и (b):
(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1; и
(b) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1.
20. Полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из следующих (а) и (b):
(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3; и
(b) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3.
21. Экспрессирующий вектор, включающий следующие (а) и/или (b):
(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1; и
(b) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1.
22. Экспрессирующий вектор, включающий следующие (а) и/или (b):
(а) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3; и
(b) полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3.
23. Клетка-хозяин, выбранная из группы, состоящей из следующих (a) - (d):
(а) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1;
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1; и
(d) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1, и экспрессирующий вектор, содержащий полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1.
24. Клетка-хозяин, выбранная из группы, состоящей из следующих (a) - (d):
(а) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3;
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3; и
(d) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3, и экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3.
25. Способ получения Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека, включающий стадию культивирования клетки-хозяина, выбранной из группы, состоящей из следующих (a) - (c), для экспрессии Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека:
(а) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1, и экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1; и
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1, и клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека (а) по п.1.
26. Способ получения Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека, включающий стадию культивирования клетки-хозяина, выбранной из группы, состоящей из следующих (a) - (c), для экспрессии Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека:
(а) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3, и полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3, и экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3; и
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент тяжелой цепи Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3, и клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека по п.3.
27. Способ получения конъюгата, включающего меченый фрагмент и Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, включающий стадии: получения Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека способом по п.25 или 26; и ковалентное связывание Fab-фрагмента с меченым фрагментом.
28. Способ получения конъюгата, содержащего лиганд и Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, включающий стадии: получения Fab-фрагмента антитела против CEACAM5 человека способом по п.25 или 26; и ковалентное связывание Fab-фрагмента с лигандом через линкер или напрямую.
29. Способ получения конъюгата, включающего меченый фрагмент, меченный радиоактивным изотопом металла, и Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, включающий стадии: получения конъюгата, содержащего лиганд и Fab-фрагмент антитела против CEACAM5 человека, способом по п. 28; и связывание радиоизотопа металла с лигандом конъюгата через координационную связь.
30. Композиция для диагностики, содержащая конъюгат по любому из пп.15-18 и фармацевтически приемлемый носитель.
31. Композиция для диагностики по п.30, которая представляет собой лекарственное средство для определения клинической стадии заболевания.
32. Композиция для диагностики по п.30 или 31 для применения при диагностике колоректального рака, рака молочной железы, рака легкого, рака щитовидной железы или рака, возникающего в результате метастазирования этих злокачественных новообразований.
33. Композиция для диагностики по п.32 для применения при диагностике колоректального рака или рака, возникающего в результате метастазирования колоректального рака.
34. Композиция для диагностики по п.33, отличающаяся тем, что рак, возникающий в результате метастазирования колоректального рака, представляет собой метастатический рак печени.
35. Применение конъюгата по любому из пп.15-18 для получения композиции для диагностики колоректального рака, рака молочной железы, рака легкого, рака щитовидной железы или рака, возникающего в результате метастазирования этих злокачественных новообразований.
36. Конъюгат по любому из пп.15-18 для применения для диагностики колоректального рака, рака молочной железы, рака легкого, рака щитовидной железы или рака, возникающего в результате метастазирования этих злокачественных новообразований.
37. Способ диагностики колоректального рака, рака молочной железы, рака легкого, рака щитовидной железы или рака, возникающего в результате метастазирования этих злокачественных новообразований, включающий введение пациенту конъюгата по любому из пп.15-18.
