Производные антрациклинона и их использование при амилоидозе - RU2167661C2

Чертежи

Описание

Настоящее изобретение относится к лечению амилоидоза, к новым соединениям, пригодным для такого лечения, к способам их получения, а также к содержащим их фармацевтическим композициям.

Связь между амилоидозом, смертью клеток и потерей функции тканей, по-видимому, имеет место при заболеваниях самого различного типа, включая нейродегенеративные заболевания. В этой связи предупреждение образования амилоида и/или индукция амилоидного разрушения может рассматриваться как важный терапевтический инструмент для всех патологических нарушений, связанных с амилоидозом, включая амилоидоз с L-цепями амилоида (AL амилоидоз) и нейродегенеративные заболевания типа болезни Альцгеймера.

Более конкретно, настоящее изобретение относится к применению антрациклинона формулы А при получении лекарственного препарата для лечения амилоидоза

где R₁ обозначает:
водород или гидрокси;
группу формулы OR₆, в которой R₆ представляет собой C₁-C₆ алкил, C₅-C₆ циклоалкил или CH₂Ph, с фенильным (Ph) кольцом, необязательно замещенным 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из F, Cl, Br, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆-алкокси и CF₃ ; или
- группу формулы OSO₂R₇, в которой R₇ представляет собой C₁-C₆ алкил или Ph, необязательно замещенный 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, такого, как
F, Cl или Br, или C₁-C₆ алкила;
R₂ обозначает водород, гидрокси, OR₆, COOH или COOR₆, где R₆ указан выше;
R₃ обозначает водород, гидрокси или OR₆, определенный выше;
R₄ обозначает водород, метил или группу формулы XCH₂ R₈, где X обозначает CO, CH₂, CHOH, или группу формулы

в которой m обозначает 2 или 3, а R₈ представляет собой:
- водород или гидрокси;
- группу формулы NR₉R₁₀, в которой:
- R₉ и R₁₀, каждый, независимо выбран из:
(а) водорода,
(б) C₁-C₆ алкильный или C₂-C₆ алкенильной группы, необязательно замещенных гидрокси, CN, COR₁₁, COOR₁₁, CONR₁₁R₁₂, O(CH₂)_nNR₁₁R₁₂ (n равно от 2 до 4) или NR₁₁R₁₂, где R₁₁ и R₁₂ каждый, независимо, выбран из водорода, C₁-C₁₂ алкильной или C₁-C₁₂ алкенильной группы или фенила, необязательно замещенного одним или более, например 1, 2 или 3, заместителями, выбранными из C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкокси, F, Br, Cl, CF₃, OH, NH₂ или CN,
(в) C₃-C₆ циклоалкила, необязательно замещенного COR₁₁, COOR₁₁ или OH, где R₁₁ указан выше,
(г) фенил (C₁-C₄ алкила или C₂-C₄ алкенила), необязательно замещенного в фенильном кольце одним или более, например 1, 2 или 3, заместителями, выбранными из C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкокси, F, Br, Cl, CF₃, OH, NH₂ или CN или
(д) COR₁₁, COOR₁₁, CONR₁₁R₁₂, COCH₂NR₁₁R₁₂, CONR₁₁COOR₁₂ или SO₂R₁₂, где R₁₁ и R₁₂ указаны выше, или
-R₉ и R₁₀ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют:
(е) морфолиновое кольцо, необязательно замещенное C₁-C₄ алкилом или C₁-C₄ алкокси,
(ж) пиперазиновое кольцо, необязательно замещенное C₁-C₆ алкилом, C₂-C₆ алкенилом или фенилом, необязательно замещенным одним или более, например 1, 2 или 3, заместителями, выбранными из C₁-C₆ алкокси, F, Br, Cl, CF₃, OH, NH₂ или CN, или
(з) пирролидиновое или пиперидиновое, или тетрагидропиридиновое кольцо, необязательно замещенное OH, NH₂, COOH, COOR₁₁ или CONR₁₁R₁₂, где R₁₁ и R₁₂ указаны выше, C₁-C₆ алкилом, C₂-C₆ алкенилом или фенилом, необязательно замещенным одним или более, например 1, 2 или 3, заместителями, выбранными из C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкокси, F, Br, Cl, CF₃, OH, NH₂ или CN;
- группу формулы OR₆ или SR₆, в которой R₆ указан выше;
- группу формулы O-Ph, где фенильное кольцо (Ph) необязательно замещено нитро, амино или NR₉R₁₀, как указано выше;
- группу формулы В

где R₁₃ обозначает водород, COR₁₁, где R₁₁ указан выше, или пептидильный остаток, и R₁₄ обозначает галоген или группу формулы OSO₂R₇, где R₇ указан выше; или
- группу формулы C или D:

где Е обозначает группу формулы COOR₁₁ или CONR₉R₁₀, в которых R₉, R₁₀ и R₁₁ указаны выше; и
R₅ обозначает водород, гидрокси, группу формулы OR₆ или NR₉R₁₀, где R₆, R₉ и R₁₀ указаны выше, или группу формулы F

где R₆, R₉ и R₁₀ указаны выше, и p равно от 1 до 6; и его фармацевтически приемлемых солей.

Другим аспектом настоящего изобретения являются новые антрациклиноны формулы А, указанной выше, при следующих условиях:
- R₅ не обозначает NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ указаны в пунктах от а) до в) или от д) до з), когда R₁ является H, OH или OCH₃, R₂ представляет H, R₃ представляет собой OH, а R₄ является группой формулы XCH₂OH или XCH₃, где X указан выше;
- R₅ не является H или OH, когда R₁ представляет H, OH или OCH₃, R₂ представляет H, OH, COOCH₃, а R₄ обозначает группу формулы XCH₃ или XCH₂OH, где X указан выше;
- R₄ не является COCH₂OR'₆, где R'₆ обозначает фенил, бензил, C₁-C₆ алкил или C₅-C₆ циклоалкил, когда R₁ представляет H или OH, R₅ и R₄ представляют OH, и R₂ обозначает H;
- соединение формулы А не является ни одним из приведенных ниже производных:
14-(N-морфолино)-дауномицинон;
14-(N-пиперидино)-дауномицинон;
14-ацетамидодауномицинон;
14-ацетамидо-4-деметоксидауномицинон;
14-(N-морфолино)-карминомицинон;
14-(N-метил-N-пиперазино)-дауномицинон;
14-(N-морфолино)карминомицинон;
14-(N-метил-N-пиперазин) карминомицинон.

Каждая алкильная, алкокси или алкенильная группа могут быть как прямоцепочечной, так и разветвленной группой.

C₁-C₁₂ алкильная группа представляет собой предпочтительно C₁-C₆ алкильную, более предпочтительно C₁-C₄ алкильную группу. C₁-C₆ алкильная группа представляет собой предпочтительно C₁ -C₄ алкильную группу. C₁-C₆ алкильная группа представляет собой предпочтительно метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, втор-бутил или н-пентил. C₁-C₄ алкильная группа представляет собой предпочтительно метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил или втор-бутил.

C₃-C₆ алкильная группа представляет собой предпочтительно C_5-6 циклоалкильную группу. C_5-6 циклоалкильная группа представляет собой предпочтительно циклопентил или циклогексил.

C₂-C₁₂ алкенильная группа представляет собой предпочтительно C₂-C₆ алкенильную группу и более предпочтительно C₂-C₄ алкенильную группу. C₂-C₆ алкенильная группа представляет собой предпочтительно C₂-C₄ алкенильную группу. Предпочтительными алкенильными группами являются этенил и пропенил.

Пептидный остаток может включать до 6, например от 1 до 4, аминокислотных остатков. Подходящие пептидные остатки выбраны из Gly, Ala, Phe, Leu, Gly-Phe, Leu-Gly, Val- Ala, Phe-Ala, Leu-Phe, Phe-Leu-Gly, Phe-Phe-Leu, Leu-Leu-Gly, Phe- Tyr-Ala, Phe-Gly-Phe, Phe-Leu-Gly-Phe, Gly-Phe-Leu-Gly, Gly-Phe-Leu-Gly.

В настоящем изобретении R₁ обозначает предпочтительно водород или метокси. R₂ обозначает предпочтительно водород. R₃ относится предпочтительно к гидроксигруппе. R₄ является предпочтительно группой формулы XCH₂R₈, в которой X обозначает CO, CH₂ или группу формулы:

и R₈ обозначает водород, группу формулы NR₉R₁₀, группу формулы O-Ph, где Ph кольцо необязательно замещено NR₉R₁₀, группу формулы В или группу формулы C, где R₉ и R₁₀, каждый, независимо, выбран из:
(а') водорода;
(б') C₁-C₄ алкила, необязательно замещенного O(CH₂)_n, NR₁₁R₁₂ или NR₁₁R₁₂, где n, R₁₁ и R₁₂ указаны выше,
(г') бензила, необязательно замещенного по фенильному кольцу одним или более, например 1, 2 или 3? заместителями, выбранными из C₁-C₄ алкила, C₁-C₄ алкокси, F, Br, Cl, CF₃, OH, NH₂ или CN, или
(д') COCF₃ или COCH₂NR₁₁R₁₂, где R₁₁ и R₁₂ указаны выше,
или R₉ и R₁₀ вместе с атомом азота, к которому они прикреплены, образуют:
(е') морфолиновое кольцо,
(ж') пиперазиновое кольцо, необязательно замещенное C₁-C₄ алкилом, или
(з') пирролидиновое, или пиперидиновое кольцо, или тетрагидропиридиновое кольцо,
R₁₃ в группе формулы В обозначает водород, R₁₄ в группе формулы В представляет собой I или OSO₂(C₁-C₄ алкил) и Е в группе формулы C обозначает группу формулы CONR'₉R'₁₀, где R'₉ и R'₁₀ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперазиновое кольцо, необязательно замещенное C₁-C₄ алкилом. Более предпочтительно R₄ обозначает группу формулы:

или группу формулы XCH₂R₈, где X обозначает CO или CH₂, и R₈ обозначает водород, группу формулы NR₉R₁₀, группу формулы O-Ph, где Ph кольцо необязательно замещено NH₂ или NHCOCH₂(C₁-C₄ алкилом)₂, группа формулы В или группа формулы C, где R₉ и R₁₀, каждый, независимо выбран из:
(а'') водорода,
(б'') метильной или этильной групп, необязательно замещенных O(CH₂)_nNH₂ или NH₂, где n указано выше,
(г'') бензила, необязательно замещенного в фенильном кольце 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из C₁-C₄ алкила и C₁-C₄ алкокси, или
(д'') COCF₃ или COCH₂N(C₁-C₄ алкила)₂,
или R₉ и R₁₀ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют:
(е'') морфолиновое кольцо,
(ж'') пиперазиновое кольцо, необязательно замещенное C₁-C₄ алкилом, или
(з'') пирролидиновое, пиперидиновое или 1, 2, 3, 6-тетрагидропиридиновое кольцо,
R₁₃ в группе формулы В обозначает водород, R₁₄ в группе формулы В обозначает Т или OSO₂(C₁-C₄ алкил), и Е в группе формулы C обозначает группу формулы CONR'₉R'₁₀, где R'₉ и R'₁₀ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперазиновое кольцо, необязательно замещенное C₁-C₄ алкилом.

R₅ представляет собой предпочтительно водород, гидрокси или группу формулы NR₉R₁₀, как указано выше.

Нaстоящее изобретение относится к солям тех соединений формулы А, которые имеют солеобразующие группы, особенно к солям соединений, имеющих карбоновую группу, основную группу (например, аминогруппу); соли являются особенно физиологически переносимыми солями, например соли щелочных и щелочноземельных металлов, например соли натрия, калия, лития, кальция и магния, соли аммония, соли с соответствующим органическим амином или аминокислотой, (например, соли аргенина, прокаина), и солями прибавления, образованными с соответствующими органическими или неорганическими кислотами, например соляной кислоты, серной кислоты, карбоновой кислоты и органических сульфоновых кислот (например, уксусной, трифторуксусной, п-толуолсульфоновой кислотой).

Нaстоящее изобретение охватывает все возможные стереоизомеры, а также рацемические или оптические активные смеси.

Предпочтительно R₃ находится в альфа-конфигурации, т.е. расположен ниже плоскости кольца.

Конкретные примеры предпочтительных соединений для использования по настоящему изобретению перечислены ниже:
А1: 14-(N-морфолино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH,

A2: 14-(N-пиперидино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH,
А3: 14-(N-пирролидино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH,
А4: 14-[N-(N'-метил)пиперазино]дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH,
A5: 14-(3',4'-диметоксибензиламино)]дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄= COCH₂NHCH₂[C₆H₃(OCH₃)₂]
A6: 14-аминоэтилоксиэтиламинодауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₂NH(CH₂)₂O(CH₂)₂NH₂
A7: 14-аминоэтиламинодауномицинон
R₁ =OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₂NH(CH₂)₂NH₂
A8: 14-(N-аминоэтил-N-трифторацетиламино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₂N(COCF₃)(CH₂)₂NH₂
A9: 14-(N-аминоэтилоксиэтил-N-трифторацетиламино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₄=COCH₂ N(COCF₃)(CH₂)₂O(CH₂)₂NH₂, R₃=R₅=OH
А10: 4-деметокси-14-(N-морфолино)дауномицинон
R₁ =R₂=H, R₃=R₅=OH,
A11: 4-деметокси-14-(N-пиперидино)дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅=OH,
А12: 4-деметокси-14-(N-пирролидино)дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅=OH,
А13: 4-деметокси-14-N-[(N'-метил)пиперазино]-дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅=OH,
А14: 4-деметокси-14-(3',4'-диметоксибензиламино)дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅-OH, R₄=COCH₂NHCH₂[C₆H₃(OCH₃)₂]
А15: 4-деметокси-14-аминоэтилоксиэтиламинодауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅-OH, R₄=COCH₂NH(CH₂)₂O(CH₂)₂NH₂
A16: 4-деметокси-14-(N-аминоэтилоксиэтил-N-трифторацетиламино) дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅-OH, R₄=COCH₂N(COCF₃)(CH₂)₂O(CH₂)₂NH₂
А17: 7-дезокси-14-(N-морфолино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃ =OH,
А18: 7-дезокси-14-(N-пиперидино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=OH,
А19: 7-дезокси-14-(N-пирролидино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=OH,
А20: 7-дезокси-14-[N-(N'-метил)-пиперазино]-дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=OH,
А21: 7-дезокси-14-(3',4'-диметоксибензиламино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=OH, R₄ =COCH₂NHCH₂[C₆H₃(OCH₃)₂]
А22: 7-дезокси-14-аминоэтилоксиэтиламино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=OH, R₄=COCH₂NH(CH₂)₂O(CH₂)₂NH₂
А23: 7-дезокси-14-(N-аминоэтилоксиэтил-N-трифторацетиламино) дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=OH, R₄=COCH₂N(COCF₃)(CH₂)₂ O(CH₂)₂NH₂
А24: 4-деметокси-7-дезокси-14-(N-морфолино)-дауномицинон
R₁=R₂=R₅=H, R₃=OH,
А25: 4-деметокси-7-дезокси-14-(N-пиперидино)-дауномицинон
R₁ =R₂=R₅=H, R₃=OH,
А26: 4-деметокси-7-дезокси-14-(N-пирролидино)-дауномицинон
R₁=R₂=R₅=H, R₃=OH,
А27: 4-деметокси-7-дезокси-14-[N-(N'-метил)-пиперазино]дауномицинон

А28: 4-деметокси-7-дезокси-14-(3',4'-диметоксибензиламино) дауномицинон
R₁=R₂=R₅=H, R₃=OH, R₄=COCH₂NHCH₂[C₆H₃(OCH₃)₂]
А29: 4-деметокси-7-дезокси-14-аминоэтилоксиэтиламино)дауномицинон
R₁=R₂=R₅=H, R₃=OH, R₄=COCH₂NH(CH₂)₂O(CH₂)₂NH₂
А30: 7-дезокси-7-(N-морфолино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃,
А31: 7-дезокси-7-[бис(2'-гидроксиэтил)]аминодауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃, R₅=N(CH₂CH₂OH)₂
A32: 7-дезокси-7-(3',4'-диметоксибензиламино)]-13-дезоксо-13-этилендиоксидауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=C(OCH₂CH₂O)CH₃, R₅=NHCH₂C₆H₃(OCH₃)₂
А33: 7-дезокси-7-бензиламино-13-дезоксо-13-этилендиокси-дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=C(OCH₂CH₂O)CH₃, R₅=NHCH₂C₆H₅
А34: 7-дезокси-7-(2'-гидроксиэтиламино)-13-дезоксо-13- этилендиоксидауномицинон
R₁=OCH₃, R₂ =H, R₃=OH, R₄=C(OCH₂CH₂O)CH₃, R₅=NHCH₂CH₂OH
А35: 4-деметокси-7-дезокси-7-(3', 4'-диметоксибензиламино)-13-дезоксо-13-этилендиоксидауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=OH, R₄=C(OCH₂CH₂O)CH₃, R₅ =NHCH₂C₆H₃(OCH₃)₂
А36: 7-дезокси-7-(3',4'-диметоксибензиламино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃, R₅=NHCH₂C₆H₃ (OCH₃)₂
А37: 7-дезокси-7-бензиламинодауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃, R₅=NHCH₂C₆H₅
А38: 7-дезокси-7-(2'-гидроксиэтиламино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃, R₅=NHCH₂CH₂ OH
А39: 4-деметокси-7-дезокси-7-(3',4'-диметоксибензиламино)дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃, R₅=NHCH₂C₆H₃(OCH₃)₂
A40: 7-дезокси-7-амино-13-дезоксо-13-этилендиоксидауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=C(OCH₂CH₂O)CH₃, R₅=NH₂
А41: 4-деметокси-7-дезокси-7-амино-13-дезоксо-13-этилен-диоксидауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=OH, R₄=C(OCH₂CH₂O)CH₃, R₅=NH₂
A42: 7-дезокси-7-аминодауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃, R₅=NH₂
А43: 4-деметокси-7-дезокси-7-аминодауномицинон
R₁ =R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃, R₅=NH₂
А44: 13-дезоксо-14-(N-морфолино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₃, R₅=NH₂
А45: 4-деметокси-13-дезоксо-14-(N-морфолино)-дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅=OH,
А46: 13-дезоксо-14-аминоэтилоксиэтиламинодауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄ =CH₂CH₂NH(CH₂)₂O(CH₂)₂ NH₂
А47: 7-дезокси-14-O-(3'-амино-4'-метансульфонил)-2', 3', 4', 6'-тетрадезокси-L-ликсогексопиранозил)дауномицинон
R₁= OCH₃, R₂= R₅=H, R₃=OH, R₄=COCH₂R₈, где R₈ представляет собой группу формулы В, в которой R₁₃=H, а R₁₄=OSO₂CH₃
А48: 7-дезокси-14-O-(3'-амино-4'йод-2', 3', 4', 6'-тетра-дезокси-L- ликсогексопиранозил)дауномицинон
R₁= OCH₃, R₂= R₅=H, R₃=OH, R₄=COCH₂R₈, где R₈ представляет собой группу формулы В, в которой R₁₃=H, а R₁₄=I
А49: 7-дезокси-14-O-[2'-(1''-пиперазинил)-карбонилтетрагидропиран- 6'-ил]дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=OH,
А50: 14-(п-аминофенилокси)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₂O-C₆H₄(pNH₂ )
А51: 14-[п-(диметиламинометилкарбониламино)фенилокси] дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H₃, R₃=R₅=OH, R₄ =COCH₂O-C₆H₄[pNHCOCH₂N (CH₃)₂]
A52: 4-деметокси-14-(п-аминофенилокси)дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₂O-C₆H₄(p-NH₂)
А53: 4-деметокси-14-[п-(диметиламинометилкарбониламино)фенилокси] дауномицинон
R₁=R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄= COCH₂O-C₆H₄[p-NHCOCH₂N(CH₃)₂]
А54: 7-дезокси-14-(п-аминофенилокси)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₂O-C₆H₄(p-NH₂)
А55: 7-дезокси-14-[п-(диметиламинометилкарбониламино)фенилокси] дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=R₅=H, R₃=OH, R₄= COCH₂O-C₆H₄[p-NHCOCH₂N(CH₃)₂]
А56: 7-дезокси-4-деметокси-14-(п-аминофенилокси)дауномицинон
R₁=R₂=R₅=H, R₃=OH, R₄=COCH₂O-C₆H₄(p-NH₂)
А57: 7-дезокси-4-деметокси-14[п-(диметиламинометилкарбониламинометил) фенилокси]дауномицинон
R₁=R₂=R₅=H, R₃=OH, R₄= COCH₂O-C₆H₄[p-NHCOCH₂N(CH₃)₂]
А58: 14-[N-диэтиламино]дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅ =OH, R₄=COCH₂N(C₂H₅)₂
А59: 13-дигидро-14-(N-морфолино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂=H, R₃ =R₅=OH, R₄=CHOHCH₂N(CH₂)₂O
А60: 7-дезокси-13-дигидро-14-(N-морфолино)дауномицинон
R₁=OCH₃, R₂ =R₅=H, R₃=OH, R₄=CHOHCH₂N(CH₂)₂O
А61: 4-деметокси-7-дезокси-10-гидрокси-14-(N-морфолино)- дауномицинон
R₁ =R₅=H, R₂=OH, R₄=COCH₂N(CH₂)₂O
А62: 4-деметокси-4-гидрокси-7-дезокси-7-N-морфолино) дауномицинон
R₁=OH, R₂=H, R₃=OH, R₄=COCH₃, R₅=N(CH₂)₂O
А63: 4-деметокси-7,9-дидезокси-14-(N-морфолино)дауномицинон
R₁=R₂=R₃=R₅=H, R₄=COCH₂N(CH₂)₂O
А64: 4-деметокси, 4-гидрокси, 14-(N-морфолино)дауномицинон
R₁=R₃=R₅=OH, R₂=H, R₄=COCH₂N(CH₂)₂O
Дополнительные примеры приведены в конце текста описания.

Соединения формулы А могут быть получены, в зависимости от природы заместителей, исходя из известных антрациклинонов, путем соответствующих химических модификаций.

Способы получения соединений формулы А и их фармацевтически приемлемых солей следующие:
(i) Предпочтительный способ получения соединения формулы А, где R₁ обозначает OR₆, где R₆ указан выше, R₂ обозначает водород или COOCH₃, R₃ обозначает OH, R₄ обозначает C₁ или C₂ алкил или COCH₃, и R₅ обозначает водород, OH или OCOOC₂H₅, или его фармацевтически приемлемой соли включает:
(1) защиту 6-, 11- и, если имеется, 7-гидрокси групп соединения формулы G

где R_b обозначает водород или COOCH₃, R_c обозначает C₁ или C₂ алкил или COCH₃ и R_e обозначает водород или гидрокси, с получением производного формулы G1

где R_b и R_c определены выше и R'_е обозначает водород или группу OCOOC₂H₅;
(2) деметилирование такого производного формулы G1 и взаимодействие полученного 4-гидрокси соединения формулы G2

где R_b, R_c и R'_е указаны выше, с соответствующим галогенпроизводным формулы R₆Hal, в котором R₆ указан выше, и Hal обозначает галоген, предпочтительно йод;
(3) снятие защиты 6- и 11-фенольных гидроксигрупп полученного 4-O-алкильного производного, что дает соединение формулы G3

где R₆, R_b, R_c и R'_е указаны выше, и, если желательно, когда R'_е обозначает OCOOC₂H₅, снятие защиты у 7-гидрокси группы соединения G3; и
(4) при желании, преобразование полученного указанного соединения формулы А в его фармацевтически приемлемую соль.

(ii) В другом примере предпочтительный способ получения соединения формулы А, где R₁ обозначает группу OSO₂R₇, указанную выше, R₂ представляет собой гидрокси или COOCH₃, R₃, обозначает OH, R₄ является C₁ или C₂ алкилом или COCH₃, и R₅ обозначает водород или гидроксигруппу, или его фармацевтически приемлемой соли включает обработку антрациклинона формулы H

где R_b обозначает гидроксигруппу или COOCH₃, R_c является C₁ или C₂ алкилом или COCH₃ и R_е обозначает водород или гидрокси, соответствующие галогенпроизводным формулы HalSO₂R₇ (Hal обозначает галоген, предпочтительно атом хлора); и, при желании, преобразование полученного указанного соединения формулы А в его фармацевтически приемлемую соль.

(iii) В другом примере предпочтительный способ получения соединений формулы А, где R₃ является OH, R₄ обозначает COCH₃ и R₅ представляет собой группу формулы NR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ указаны выше, при условии, что R₉ и R₁₀ не могут представлять собой водород или группу формулы COR₁₁ или COOR₁₁, как указано выше, или его фармацевтически приемлемой соли включает взаимодействие агликона формулы К

где R₁ и R₂ указаны выше, с соответствующим производным амина формулы NHR₉R₁₀, R₉ и R₁₀ указаны выше; и, при желании, преобразование полученного указанного соединения формулы А в его фармацевтически приемлемую соль.

(iv) В другом примере предпочтительный способ получения соединений формулы А, где R₃ обозначает OH, R₄ является COCH₃ и R₅ представляет собой группу формулы NR₉R₁₀, где один из R₉ и R₁₀ представляет собой атом водорода, а другой не представляет водород или группу формулы COR₁₁ или COOR₁₁, как указано выше, или его фармацевтически приемлемой соли, включает:
(1) защиту агликона формулы К, указанной выше, с получением 13-этилендиокси-производного формулы К1

где R₁ и R₂ указаны выше;
(2) взаимодействие указанного производного формулы К1 с соответствующим соединением формулы NHR₉R₁₀, R₉ и R₁₀ указаны выше;
(3) снятие защиты у 13-карбонильной группы полученного 7-амино-замещенного производного формулы К2

где R₁, R₂, R₉ и R₁₀ указаны выше; и, при желании, преобразования указанного соединения формулы А в его фармацевтически приемлемую соль, например, подкислением соединения А с получением соли добавления кислоты.

(v) В другом примере предпочтительный способ получения соединений формулы А, где R₃ является OH, R₄ обозначает COCH₃ и R₅ представляет собой NH₂, или его фармацевтически приемлемой соли, включает:
(1) обработку производного формулы К2, указанного выше, в которой NR₉R₁₀ обозначает 3',4'-диметоксибензиламино, окислительным агентом;
(2) снятие защиты у 13-карбонильной группы полученного 7-аминозамещенного соединения формулы К3

где R₁ и R₂ указаны выше; и
(3) при желании, преобразование полученного указанного соединения формулы А в его фармацевтически приемлемую соль, например, подкислением соединения А с получением соли добавления кислоты.

(vi) В другом примере предпочтительный способ получения соединений формулы А, где R₃ обозначает OH или H, R₄ обозначает COCH₂NR₉NR₁₀, где R₉ и R₁₀ указаны выше, при условии, что они не обозначают группу формулы COR₁₁ или COOR₁₁, и R₅ обозначает водород или OH, или его фармацевтически приемлемую соль, включает:
(1) преобразование соединение формулы L

где R₁, R₂, R₃ и R_е указаны выше, в соответствующее 14-бром-производное формулы L1

где R₁, R₂, R₃ и R_е указаны выше;
(2) взаимодействие 14-бромпроизводного формулы L1 с соответствующим амином формулы NHR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ были определены ранее, при условии, что они не представляют собой группу формулы COR₁₁ или COOR₁₁; и
(3) при желании, превращение полученного указанного соединения формулы А в его фармацевтически приемлемую соль, например, подкислением соединения А с получением соли добавления кислоты.

(vii) В другом примере предпочтительный способ получения соединений формулы А, где R₄ обозначает группу формулы COCH₂O-Ph, где фенильное кольцо (Ph) необязательно замещено нитро, амино или NR₉R₁₀, указанным выше, и R₅ обозначает водород или гидрокси, или его фармацевтически приемлемой соли включает:
(1) взаимодействие соединения формулы L1, указанного выше, с фенолом, необязательно замещенным, как указано выше, предпочтительно нитрофенолом, в виде соли; и
(2) при желании, преобразование полученного указанного соединения формулы А в его фармацевтически приемлемую соль.

(viii) В другом примере предпочтительный способ получения соединений формулы А, где R₄ обозначает группу формулы XCH₂R₈, где R₈ обозначает группу формулы C и D, указанные выше, или их фармацевтически приемлемых солей, включает взаимодействие антрациклинона, несущего гидроксилированную боковую цепь по 9-му положению, такую как COCH₂OH или CH₂CH₂OH, с производным формулы C' или D'

(2) при желании, гидролиз полученного эфирного производного с получением антрациклинонов формулы А, несущих карбоксигруппу в ацетальной части молекулы; и
(3) при желании, преобразование полученного указанного соединения формулы А в его фармацевтически приемлемую соль.

(ix) В другом примере предпочтительный способ получения соединений формулы А, где R₄ обозначает группу CH₂CH₂R₈, включает:
(1) преобразование соединения формулы А, указанного выше, где R₄ обозначает группу формулы COCH₂ R₈, в соответствующее 13-гидразоновое производное, предпочтительно в 13-[(4-фтор)бензолсульфонил]гидразон;
(2) восстановление вышеуказанного производного гидразона с помощью восстановителя в условиях, способствующих сохранению природы хиноновой системы соединения формулы А; и
(3) при желании, преобразование полученного указанного соединения формулы А, где R₄ обозначает указанную группу CH₂CH₂R₈, в ее фармацевтически приемлемую соль.

Следует отметить, что, при желании, производные формулы А, полученные в соответствии со способами (i), (ii), (iii), (iv), (v), (vi), (vil), (viii) и (ix), могут быть далее модифицированы в различных частях молекулы путем сочетания вышеописанных способов или синтетическими методами, описанными для антрациклинов или антрациклинонов (см.: F.Arcamone in "Doxorubicin", Medicinal Chemistry, Vol. 17, Academic Press, 1981) или обычными синтетическими методами (см.: J.March, "Advanced Organic Reaction", Fourth., J. Wiley & Sons, 1992). Например, соединения формулы А, где X является CO группой, могут быть преобразованы в соединение формулы А, где X обозначает CHOH восстановлением, например боргидридом натрия. Соединение формулы А, где R₅ обозначает OH, может быть преобразовано в соответствующее соединение, имеющее R₅= H, путем обработки дитионитом натрия.

Соединение формулы А, указанное в (i), может быть получено по способу, описанному в DE-A-2 750 812, например, путем взаимодействия соединения формулы G, указанного выше, с избытком этоксикарбонилхлорида в пиридине при комнатной температуре в течение периода времени от 1 до 2 часов; затем обработкой защищенного производного G1 бромидом алюминия в сухом апротонном растворителе, предпочтительно в метиленхлориде, при комнатной температуре в течение периода времени от 3 до 6 часов; алкилированием полученного 4-гидроксипроизводного формулы G2, предпочтительно йод-производным формулы R₆I в апротонном растворителе, таком как метиленхлорид или хлороформ, в присутствии конденсирующего агента, предпочтительно оксида серебра, при температуре от 40 до 60^oC в течение периода времени от 6 до 24 часов; с последующим снятием защиты у гидроксигрупп соединения формулы G3 вначале за счет удаления групп, защищающих фенол обработкой морфолином в полярном протонном растворителе, таком как метанол, при комнатной температуре в течение периода времени от 1 до 3 часов и затем гидролизом 7-O-этокси-карбонильной группы, если она имеется, очень разбавленным водным раствором гидроксида натрия.

Соединения формулы А, указанные в (ii), могут быть получены, как описано в US-A-4 965 351, например, путем растворения соединения формулы H, указанного выше, в сухом аполярном растворителе, таком как метиленхлорид, и последующей обработкой соединением формулы HalSO₂R₇, указанного выше, (Hal обозначает галоген), предпочтительно хлор, в присутствии органического основания, такого как N,N-диизопропилэтиламин, и каталитического количества 4-диметиламинопиридина при температуре от 0 до 30^oC предпочтительно при комнатной температуре в течение периода времени от нескольких минут до нескольких часов.

Соединения формулы A, указанные в (iii), могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы К, указанного выше, с производным амина формулы NHR₉R₁₀, указанным выше, в сухом апротонном растворителе, таком как безводный метиленхлорид, при температуре от 10 до 30^oC в течение периода времени от нескольких часов до нескольких дней; и, при желании, подкислением полученного продукта предпочтительно безводным хлористым водородом в метаноле с получением соли присоединения кислоты.

Соединения формулы А, указанные в (iv), могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы К, указанного выше, с этиленгликолем в толуоле, в присутствии кислотного катализатора, предпочтительно п-толуолсульфоновой кислоты, при температуре кипения с обратным холодильником в течение периода времени от 3 до 6 часов; с последующим взаимодействием защищенного производного К1 с соединением формулы NHR₉R₁₀, как указано выше, в полярном растворителе, таком как пиридин или тетрагирофуран, предпочтительно при комнатной температуре в течение периода времени от одного до нескольких дней; и далее снятием защиты у защищенной карбонильной группы путем обработки производного формулы К2 трифторуксусной кислотой с добавлением нескольких капель анизола, предпочтительно при комнатной температуре в течение периода времени от 30 минут до двух часов; и, при желании, преобразование полученного соединения в соль добавления кислоты предпочтительно с использованием безводного хлористого водорода в метаноле.

Соединения формулы A, указанные в (v), могут быть получены, например, взаимодействием соединения формулы К2, указанного выше, где NR₉R₁₀ обозначает 3,4-диметоксибензиламино, с 2,3-дихлор-5,6-дициан-1,4-бензохиноном [ДДХ (DDG)] в смеси воды и метиленхлорида в течение одного дня; с последующим снятием зашиты у полученного производного формулы К3, указанного выше, с помощью трифторуксусной кислоты и анизола при комнатной температуре в течение одного часа; и, при желании, с последующим превращением полученного соединения А в соль добавления кислоты предпочтительно с помощью безводного хлористого водорода в метаноле.

Соединения формулы А, указанные в (vi), могут быть получены, как описано в DE-A-2 557 537, например, путем взаимодействия соединения формулы L1, полученного из соединения, описанного в DE-A-1 917 874, с соответствующим амином формулы NНR₉R₁₀, где R₉ и R₁₀ соответствуют данным ранее определениям, при условии, что R₉ и R₁₀ не могут представлять собой группы формулы COR₁₁ или COOR₁₁, указанные выше, в сухом полярном растворителе, таком как ацетон или диметилформамид, при температуре от 20 до 60^oC в течение периода времени от 4 до 24 часов и, при необходимости, преобразуя полученное соединение в соль присоединения кислоты предпочтительно с безводным хлористым водородом в метаноле.

Соединения формулы А, указанные в (vii), могут быть получены, как описано в DE-A-1 917 874, например, взаимодействием соединения формулы L1, указанного выше, с фенольным производным, описанным ранее, в апротонном органическом растворителе, таком как ацетон, в присутствии основания, предпочтительно карбонате калия или натрия при температуре от 20 до 60^oC.

Соединения формулы А, указанные в (viii), могут быть получены, как описано в WO 92/10212 и WO 92/02255, например, путем взаимодействия антрациклинона, указанного выше, с производными формулы C' или D' в присутствии кислотного катализатора, например п-толуолсульфоната пиридиния в апротонном растворителе, таком как метиленхлорид, при температуре от 10 до 30^oC, предпочтительно при комнатной температуре, в течение периода времени от 3 до 24 часов; и, при желании, гидролизом эфирного производного разбавленным водным раствором гидроксида натрия.

Соединения формулы А, указанные в (ix), могут быть получены, как описано, в GB-A-2238540, например, восстановлением 13-[(4-фтор)бензолсульфонил] гидразонового производного антрациклинона формулы А, указанной выше, с помощью цианборгидрида натрия в органическом растворителе, таком как толуол или диметилформамид, при температуре от 25 до 80^oC в течение периода от 6 до 24 часов.

Некоторые из исходных веществ для получения соединений формулы А известны. Другие могут быть получены аналогично, исходя из известных соединений с помощью известных методов.

Например, приведенные ниже соединения известны и могут быть представлены той же формулой А:
дауномицинон (R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₃),
адриамицинон (R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=R₄=OH, R₅=COCH₂OH),
4-деметоксидауномицинон (R₁=R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₃),
карминомицинон (R_a=OH, R₂=H, R₃=R₅=OH, R₄=COCH₃),

-родомицинон (R₁=R₂=R₃=R₅=OH, R₄=CH₂CH₃),
β-родомицинон (R₁=R₃=R₅=OH, R₂=COOCH₃, R₄=CH₂CH₃),
соответствующие 7-дезокси-производные (R₅= H) (см. : F. Acramone in "Doxorubicin", Medicinal Chemistry, vol. 17, Academic Press, 1981)
или производные сахаров формулы М
β
такие как аминосахара даунозамин, 3-амино-2,3,6-тридезокси- L-ликсо-гексопираноза, (M1: R₈= NH₂, R_t=R_x=OH, R_u=H) (см.: J. Am. Chem. Soc., 86, 5334, 1964) или акозамин, 3-амино-2,3,6-тридезокси-1-арабино-геусопираноза (М2: R₈= NH₂, R_u=R_x=OH, R_t=H) (см.: J. Med. Chem., 18, 703, 1975) или соответствующие 1-хлор-3,4-ди-трифторуксусные производные даунозамина (R_x=Cl и R_s= NHCOCF₃, R_t=OCOCF₃) или 1-хлор-3,4-дитрифторацетильные производные акозамина (R_х =Cl и R₈=NHCOCF₃), R_и = OCOCR₃).

Соединения по настоящему изобретению отличаются высокой ингибирующей активностью в отношении амилоидоза.

Термин амилоидоз указывает на наличие общей характерной тенденции некоторых белков к полимеризации и осаждению во внеклеточном пространстве в виде нерастворимых фибрилл, вызывая структурные и функциональные повреждения органов и тканей. Недавно в Бюллетене Всемирной Организации Здравоохранения (Bulletin of the World Health Organisation 71(1): 105, 1993) была приведена пересмотренная классификация амилоида и амилоидоза.

Все самые различные типы амилоида обладают общей ультраструктурной организацией антипараллельных β-складчатых полос, несмотря на то, что они содержат множество очень различающихся белковых субъединиц (см.: Glenner G.G., New England J. Med., 302(23): 1283, 1980). AL амилоидоз вызывает особый моноклональный иммуноглобулин, его легкие цепи, которые образуют амилоидные фибриллы. Такие легкие моноклональные фибриллы продуцируются моноклональными плазматическими клетками, которые имеют низкий митотический индекс и известны по их нечувствительности к химиотерапии. Злокачественное перерождение этих клеток связано с их белоксинтезирующей активностью.

Клинический курс лечения болезни зависит от того, какой орган вовлечен в патологический процесс; при этом прогноз может быть крайне неблагоприятен в случае сердечного инфильтрата (средний срок выживания >12 месяцев), несколько лучше он в случае почечного инфильтрата (средний срок выживания примерно 5 лет).

При этом достижение относительной нечувствительности амилоидогенных молекул, которые могут блокировать или замедлять образование амилоида и увеличивать растворимость имеющихся амилоидных отложений, может рассматриваться, по-видимому, как единственная обоснованная надежда для пациентов с AL амилоидозом. Кроме того, поскольку супермолекулярная организация амилоидных фибрилл одинакова для всех типов амилоида, доступность препарата, который препятствует образованию амилоида и повышает растворимость имеющихся отложений, что приводит к возможности осуществлять клиренс за счет функционирования нормальных механизмов, может иметь большое значение при использовании в случае всех типов амилоидоза и в особенности для лечения болезни Альцгеймера.

И в действительности основным патологическим признаком, общим для болезни Альцгеймера (БА, АD), синдрома Дауна, dementia pugilistica и церебральной амилоидной ангиопатии является образование амилоидных отложений в паренхиме головного мозга и на стенках сосудов. Такого рода маркеры связаны с потерей нейрональных клеток в коре головного мозга, лимбических регионах и в подкорковых ядрах. Ряд исследований показал наличие корреляции селективного повреждения различных нейрональных систем и утраты синапса в лобной доле коры головного мозга со снижением познавательной способности. Патогенез и молекулярные основы нейродегенеративных процессов, происходящих при БА, до сих пор не известны, однако в последних сообщениях четко вырисовывается роль β-амилоида, откладывающегося в паренхиме головного мозга и на стенках сосудов в связи с показанной in vitro и in vivo нейротоксичностью (Yanker et al. Science, 245: 417, 1990; Kowall et al., PNAS, 88: 7247, 1991). Кроме того, выделение сходных AD с мутацией в гене белкового предшественника амилоида (БПА, АРР) вызвало интерес к возможной патогенетической роли β-амилоида в развитии БA [Mullan M. et al., TINS, 16(10): 393, 1993].

Нейротоксичность β-амилоида связана с фибрилогенными свойствами белка. Исследования гомологичных синтетических пептидов указывают на то, что клетки гиппокампа нечувствительны к 24-часовому воздействию свежеприготовленного раствора β 1-42, в то время как их жизнеспособность снижалась в том случае, если нейроны подвергали воздействию β 1-42, который перед этим хранился в течение 2-4 дней при температуре 37^oC в солевом растворе, что в результате способствовало агрегации пептидов. Наличие связи между фибриллами и нейротоксичностью подтверждается также недавно полученными данными о том, что in vivo и in vitro в ходе нормального клеточного метаболизма продуцируется растворимая форма β-амилоида (Hass et al. Nature, 359, 322, 1993) и только в том случае, когда агрегация носит конгофильный характер, она связана с дистрофическими невритами. С другой стороны, неконгофильное "предамилоидное" образование, содержащее единичные молекулы β-амилоида, не связано с изменениями нейронов (Tagliavini et al. Neurosci. Let., 93, 193, 1998).

Нейротоксичность β-амилоида была также подтверждена с использованием пептидного гомолога фрагмента β-амилоида 25- 35 (β25-35), сохраняющего самоагрегирующие свойства полного β-амилоидного фрагмента β 142.

Хроническое, но не одноразовое воздействие микромолярных концентраций β 25-35 на нейроны гиппокампа индуцировало гибель нейронов за счет активации механизма программированной гибели клеток, известной как апоптоз (Forloni et al. , NeuroReport, 4, 523, 1993). Это также указывает на связь нейротоксичности со способностью β 25-35 к самоагрегации.

Другое нейодегенеративное заболевание, такое как губковидная энцефалопатия (spongiform encephalopathy) (СЭ, SE), характеризуется гибелью нейронов и отложением во внеклеточном пространстве амилоида, который в этом случае происходит из Прион белка (Prion, PrP). Основываясь на данных о нейротоксичности β -амилоида, аналогично было исследовано воздействие синтетических пептидов, гомологичных к различным сегментам PrP, на жизнеспособность первичных нейронов гиппокампа крысы. Хроническое применение пептида, соответствующего PrP 106-126, индуцировало гибель нейронов посредством апоптоза, тогда как в тех же самых условиях при исследовании всех других пептидов и восходящей последовательности PrP 106-126 не было выявлено снижения жизнеспособности клеток (Forioni et al. Nature, 362, 543). PrP 106-126 обладает высокой фибриллогенной активностью in vitro, а также при окраске красителем конго ред, при этом пептидные агрегаты демонстрируют двойное лучепреломление в зеленом свете (green biifrangence), указывающее на наличие β-складчатой конформации, характерной для амилоида.

Соединения по настоящему изобретению могут использоваться для изготовления медикаментов, используемых с целью профилактики или остановки прогрессирования заболеваний, вызванных амилоидными белками, такими как AL амилоидоз, болезнь Альцгеймера, синдром Дауна и др.

Настоящее изобретение включает также фармацевтические композиции, содержащие в качестве активных ингредиентов одно или более из соединений А в сочетании, при необходимости, с фармацевтически приемлемыми носителями, наполнителями или другими добавками.

Фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы А или его соли, могут быть получены обычным способом при использовании обычных нетоксичных фармацевтических носителей или разбавителей в широком диапазоне дозирования форм и способом их введения.

В частности, соединения формулы А могут вводиться:
А) перорально, например, в виде таблеток, пастилок, лепешек, водных или масляных суспензий, диспергированных порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул, а также сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального использования, могут быть приготовлены по любому известному в технике методу, применяемому для производства фармацевтических композиций, при этом такие композиции могут содержать один или более агентов, выбранных из группы, состоящей из подсластителей, ароматизаторов, красителей и консервантов, вводимых для создания фармацевтических препаратов, обладающих хорошими эстетическими и вкусовыми показателями.

Таблетки содержат активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми наполнителями, которые применяются для изготовления таблеток. Упомянутые наполнители могут представлять собой, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактозу, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие агенты, например кукурузный крахмал или альгиновую кислоту; связующие вещества, в частности кукурузный крахмал, желатин или аравийскую камедь, и замасливатели, такие как стеарат магния, стеариновую кислоту или тальк. Таблетки могут или вовсе не содержать покрытия или с помощью известных методов могут быть покрыты оболочкой, способствующей задержке процесса их разрушения и всасывания в желудочно-кишечном тракте, оказывая, таким образом, пролонгированное воздействие в течение более длительного периода времени. В частности, для этой цели могут применяться глицерил моностеарат или глицерил дистеарат как вещества, замедляющие процесс разрушения. Композиции для перорального использования могут также представлять собой твердые желатиновые капсулы, в которых активный ингредиент смешивается с инертным твердым разбавителем, таким, например, как карбонат кальция, фосфат кальция или каолин, а также мягкие желатиновые капсулы, в которых активный ингредиент смешивается с водной или масляной средой, например с арахисовым маслом, жидким парафином или оливковым маслом. Водные суспензии содержат активные материалы в смеси с наполнителями, пригодными для производства водных суспензий.

Упомянутые наполнители могут представлять собой суспендирующие агенты, например натрий-карбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовую камедь и аравийскую камедь; диспергирующие или смачивающие вещества, которые могут представлять собой либо натуральные фосфатиды, например лецитин, либо продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, например полиоксиэтилен стеарат, или продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например гептадекаэтиленоксицетанол, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такого как полиоксиэтилен сорбит моноолеат, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гексита, например полиоксиэтилен сорбитан моноолеат. Указанные водные суспензии могут также содержать один или более консервантов, например этил- или н-пропилоксибензоат, один или более красителей, один или более ароматизаторов, один или более подсластителей, таких как сахароза или сахарин. Масляные суспензии могут быть получены при суспендировании активного ингредиента в растительном масле, например в арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном масле или кокосовом масле, или в минеральном масле, таком как жидкий парафин. Водные суспензии могут содержать загустители, например пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Указанные выше подсластители, а также ароматизаторы могут добавляться в препарат для придания ему приятного вкуса. Сохранность таких композиций может быть улучшена за счет добавления антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота. Диспергированные порошки и гранулы, пригодные для приготовления водной суспензии при добавлении воды, представляют смесь активного ингредиента с диспергирующим или смачивающим веществом, с добавлением суспендирующего агента, а также одного или более консервантов. Выше уже были приведены примеры материалов, которые могут использоваться в качестве диспергирующих или смачивающих веществ, а также суспендирующих агентов. В композициях могут быть представлены также другие наполнители, например подсластители, красители и другие агенты.

Фармацевтические композиции настоящего изобретения могут также иметь вид эмульсии масла в воде. Масляная фаза может быть представлена растительным маслом, например оливковым маслом или арахисовым маслом, или минеральным маслом, в частности жидким парафином, а также их смесями.

Подходящие эмульгаторы могут включать натуральные камеди, например аравийскую камедь или трагакантовую камедь, натуральные фосфатиды, например из соевых бобов, лецитин, а также эфиры или неполные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гексита, такие, например, как сореитан моноолеат, а также продукты конденсации упомянутых неполных эфиров с этиленоксидом, например полиоксиэтилен сорбитан моноолеат. Эмульсия может также содержать подсластители и ароматизаторы. Сиропы и эликсиры могут содержать подсластители, такие как глицерин, сорбит или сахароза. Описанные композиции могут также содержать средство, уменьшающее раздражение, консервант, ароматизатор и краситель.

Б) Парентерально, т.е. либо подкожно, либо внутривенно, либо интерстернально, либо с применением техники инфузий в виде стерильных водных или маслянистых инъецируемых суспензий. Фармацевтические композиции могут представлять собой инъецируемые водные или маслянистые суспензии.

Такие суспензии могут быть получены известными методами с использованием указанных выше подходящих диспергирующих и увлажняющих веществ, а также суспендирующих агентов. Стерильный препарат для инъекций может представлять стерильный раствор или суспензию для инъекций в нетоксичном подходящем для парентерального введения разбавителе или растворителе, например, может быть в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди подходящих для использования по настоящему изобретению носителей и растворителей могут найти применение такие, как вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используются стерильные жирные масла.

Для описываемых целей может найти применение любая смесь жирных масел, включая синтетические моно- и диглицериды. Кроме того, для изготовления инъецируемых форм могут использоваться жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. Еще один объект настоящего изобретения касается способа лечения амилоидозных заболеваний путем введения людям, нуждающимся в таком лечении, терапевтически эффективного количества одного или более активных соединений, охватываемых формулой А.

Дневные дозы варьируют в диапазоне примерно от 0,1 до 50 мг на кг веса тела, в зависимости от активности конкретного соединения, возраста, веса и состояния здоровья пациента, типа и тяжести заболевания, а также от частоты и способа введения; предпочтительно дневные дозы находятся в диапазоне от 5 мг до 2 г. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с материальными наполнителями для получения единичной дозированной формы, может изменяться в зависимости от состояния пациента и применяемого способа введения. Так, например, композиция, предназначенная для перорального введения, может содержать от 5 мг до 2 г активного вещества, объединенного с подходящим количеством соответствующего материала наполнителя, содержание которого может изменяться от 5 до 95% от всей композиции. Дозированные формы содержат обычно от примерно 5 мг до примерно 500 мг активного ингредиента.

Приведенные ниже примеры иллюстрируют настоящее изобретение, не ограничивая его никоим образом.

Пример 1: Получение 14-(N-морфолино)дауномицинона (А1)
14-Бромдауномицинон (L1': R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH) (0,95 г, 2 ммоль), полученный, как описано в J. Org. Chem., 42, 3653, 1977, растворяют в сухом метиленхлориде (50 мл), обрабатывают морфолином (0,34 г, 4 ммоль) и выдерживают при комнатной температуре в течение 24 часов. После этого удаляют при пониженном давлении растворитель, и полученный сырой продукт подвергают флэш хроматографии на силикагеле с использованием смеси метиленхлорида и ацетона (90: 10 по объему) в качестве элюента с получением указанного в заголовке соединения А1, которое затем преобразуют в соответствующий гидрохлорид (0,8 г, выход 77%), путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/ацетон (9:1 по объему), R_f=0,5.

FD-MS:m/e 483 [M]+
¹H ЯМР (200 МГц, DMSO-O₆) δ:
2,03 (дд. , J = 4,5, 14,2 Гц, 1H, H-8ax); 2,32 (д., J=14,2 Гц, 1H, H-8eq); 2,95 (д. , J=18,5 Гц, 1H, H-10ax); 3,17 (д., J=18,5 Гц, 1H, H-10eg); 3,2, 3,5 (м. , 4H, -CH₂-N-CH₂-); 3,7, 4,0 (м., 4H, -CH₂-O-CH₂-); 4,02 (с., 3H, OCH₃); 4,87 (м., 2H, CH₂-14); 5,16 (м., 1H, H-7); 5,70 (широкий сигнал, 1H, OH-7); 6,36 (с., 1H, OH-9); 7,68 (м., 1H, H-3); 7,93 (м., 2H, H-1 + H-2); 10,40 (широкий сигнал, 1H, NH⁺); 13,29 (с., 1H, OH-11); 14,01 (с., 1H, OH-6).

Пример 2: Получение 7-дезокси-7-(N-морфолино)дауномицинона (А30)
7-Этоксикарбонилдауномицинон (К': R₁= OCH₃, R₂= H) (0,94 г, 2 ммоль), приготовленный, как описано в DE-A-2 750 812, растворяют в смеси метиленхлорида (50 мл) и метанола (5 мл), добавляемой вместе с морфолином (3 мл), после чего смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 20 часов. После этого при пониженном давлении удаляют растворитель и сырой продукт подвергают флэш-хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюирующей системы смеси метиленхлорида и ацетона (95:5 по объему), получая при этом указанное в заголовке соединение А30, которое затем преобразуют в соответствующий гидрохлорид (0,5 г, выход 53%) путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием с помощью диэтилового эфира.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/ацетон (9:1 по объему), R_f =0,58.

FD-MS: m/e 467 [M]^+
1H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ :
1,77 (дд. , J =3,3, 14,5 Гц, 1H, H-8ax); 2,32 (дд., J=2,0, 14,5 Гц, 1H, H-8eg); 2,40 (с., 3H, COCH₃); 2,50, 3,00 (м., 4H, -CH₂-N-CH₂-); 3,10, 3,20 (Abg, J =18,7 Гц, 2H, CH₂-10); 3,64 (м., 4H, -CH₂-O-CH₂-); 4,08 (с., 3H, OCH₃); 4,35 (дд., J=2,0, 3,3 Гц, 1H, H-7); 7,38 (д., J=8,3 Гц, 1H, H-3); 7,78 (дд. , J =7,7, 8,3 Гц, 1H, H-2); 8,02 (д., J =7,7 Гц, 1H, H-1); 13,29 (с., 1H, OH-11); 14,11 (с., 1H, OH-6).

Пример 3: Получение 7-дезокси-7-(3', 4'-диметокси- бензиламино)-13-дезоксо-13-этилендиоксидауномицинона (А32)
7-Этоксикарбонилдауномицинон (K': 1,88 г, 4 ммоль), приготовленный по вышеописанному методу, растворяют в толуоле (100 мл), который добавляют вместе с этиленгликолем (3 мл) и п-толуолсульфонатом пиридиния (0,1 г). Смесь нагревают при температуре кипячения с обратным холодильником в течение 6 часов для удаления воды с использованием аппарата Дина Старка (Dean Stark). Затем реакционную смесь охлаждают при комнатной температуре, промывают 1% водным раствором однозамещенного карбоната натрия и водой. Органическую фазу высушивают над безводным сульфатом натрия, и органический растворитель удаляют при пониженном давлении с получением 13-этилендиоксо производного K' (0,92 г).

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/ацетон (9:1 по объему), R_f =0,25.

FD-MS: m/e 518 [M]⁺
13-Этилендиоксопроизводное K' (0,85 г, 1,64 ммоль) растворяют в смеси пиридина (20 мл) и сухого тетрагидрофурана (20 мл), добавляемой вместе с 3,4-диметоксибензиламином (1 мл), и выдерживают при комнатной температуре в течение двух дней. После этого реакционную смесь разбавляют метиленхлоридом (100 мл) и промывают 1H водным раствором хлористого водорода, водой и 1% водным раствором однозамещенного карбоната натрия. Отделяют органическую фазу, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Сырой продукт подвергают флеш-хроматографии на силикагеле, элюируя системой смесь метиленхлорида и ацетона (95:5 по объему) и получая указанное в заголовке соединение А32, который затем преобразуют в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим осаждением диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/ацетон (9:1 по объему), R_f =0,8.

FD-MS: m/e 607 [M]^+
1H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ :
1,49 (с., 3H, CH₃); 1,62 (дд., J=4,0, 14,2 Гц, 1H, H-8ах); 2,45 (ддд., J =1,8, 1,8, 14,2 Гц, 1H, H-8eg); 2,86 (д., J=19,1 Гц, 1H, H-10ах); 3,21 (дд., J=1,8, 19,1 Гц, 1H, H-10ag);
3.85, 3,88 (2хс, 6H, OCH₃); 4,06 (с., 7H, 4-OCH₃ + -O-CH₂-CH₂-O-); 4,44 (дд. , J =1, 8, 4,0 Гц, 1H, H-7); 6,8-6,9 (м., 3H, H-2'- + H-5' + H-6'); 7,34 (дд. , J= 1,0, 8,5 Гц, 1H, H-3); 7,75 (дд., J =7,8, 8,5 Гц, 1H, H-2); 8,01 (дд., J=10, 7,8 Гц, 1H, H-1).

Пример 4: Получение 7-дезокси-7-(3',4'-диметокси- бензиламино)дауномицинона (А36)
Соединение А32 (0,3 г), полученное, как описано в примере 3, растворяют в трифторуксусной кислоте (3 мл) и добавляют одну каплю анизола. Через один час реакционную смесь разбавляют метиленхлоридом, промывают 1% водным раствором однозамещенного карбоната натрия, сушат над безводным сульфатом натрия. При пониженном давлении удаляют органический растворитель, а сырой продукт подвергают флэш-хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюирующей системы смеси метиленхлорида и метанола (95:5 по объему) с получением 7-дезокси-7-(3',4'- диметоксибензиламино)дауномицинона (А36), который преобразуют в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метанол (8:2 по объему), R_f=0,5.

FD-MS: m/e 547 [M]^+
1H ЯМР (200 МГц, DMSO-d₆) δ :
2,02 (дд. , J=5,0, 14,4 Гц, 1H, H-8ax); 2,34 (с., 3H, COCH₃); 2,48 (м., 1H, H-8eq); 2,98, 3,08 (Abg, J=19,0 Гц, 2H, CH₁-10); 3,74, 3,78 (2xc., 6H, OCH₃); 4,00 (с., 3H, 4-OCH₃); 4,35 (м., 2H, NH-CH₂-арил); 4,59 (м., 1H, H-7); 6,80 (широкий сигнал, 1H, OH-9); 6,99 (д., J=8,1 Гц, 1H, H-5'); 7,15 (д. , J= 8,1 Гц, 1H, H-6'); 7,31 (с., 1H, H-2'); 7,69 (м., 1H, H-3); 7,92 (м., 2H, H-1 + H-2); 8,5, 9,9 (широкий сигнал, 2H, NH₂+); 12,99 (широкий сигнал, 1H, OH-11); 13,94 (широкий сигнал, 1H, OH-6).

Пример 5: Получение 7-дезокси-7-бензиламино-13-дезоксо-13- этилендиоксидауномицинона (А33)
13-Этилендиоксопроизводное К1' (0,85 г, 1,64 ммоль), полученное, как описано в Примере 3, растворяют в смеси метиленхлорида (40 мл) и метанола (4 мл), обрабатывают бензиламином (0,5 мл) и выдерживают при комнатной температуре в течение 18 часов. После этого растворитель удаляют при пониженном давлении, и сырой продукт подвергают флэш-хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюирующей системы смеси метиленхлорида и ацетона (9: 1 по объему) с получением указанного в заголовке соединения А33 (0,55 г), который преобразуют в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизильгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/ацетон (9:1 по объему), R_f=0,20.

Пример 6: Получение 7-дезокси-7-бензиламинодауномицинона (А37)
Соединение А33, полученное, как описано в Примере 5, обрабатывают трифторуксусной кислотой, как описано в Примере 4, с получением 7-дезокси-7-бензиламинодауномицинона (А37), который преобразуют в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/ацетон (9:1 по объему), R_f= 0,60.

FD-MS: m/e 487 [M]^+
1H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ :
1,76 (дд., J=4,1, 14, 4 Гц, 1H, H-8ax); 2,33 (ддд., J=1,7, 1,9, 14,4 Гц, 1H, H-eg); 2,42 (с. , 3H, COCH₃); 2,88 (д., J =18,8 Гц, 1H, H-10ax); 3,14 (дд. , J=1,9, 18,8 Гц, 1H, H-10eq); 3,91, 4,08 (Abg, J=12,4 Гц, 2H, NH-CH₂- арил); 4,04 (с. , 3H, 4-OCH₃); 4,41 (дд., J=1,7, 4,1 Гц, 1H, H-7); 7,3-7,4 (м. , 6H, C₆H₅-+H-3); 7,72) дд., J=7,8, 8,5 Гц, 1H, H-2); 7,94 (дд., J =1,1, 7,8 Гц, 1H, H-1); 13,20 (широкий сигнал, 1H, OH-11), 13,40 (широкий сигнал, 1H, OH-6).

Пример 7: Получение 7-дезокси-7-(2'-гидроксиэтиламино) - 13-дезоксо-13-этилендиоксидауномицинона (А34)
Указанное в заголовке соединение А34 получают в соответствии со способом Примера 3, используя при этом этаноламин.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метанол (9:1 по объему), R_f=0,2.

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ :
1,45 (с. , 3H, CH₃); 1,57 (дд., J=4,1, 14,1 Гц, 1H, H-8ax); 2,37 (ддд., J=1,4, 1,4, 14,1 Гц, 1H, H-8eq); 2,80 (д., J=19,0 Гц, 1H, H-10ax); 3,03 (м., 2H, NH-CH₂-CH₂-OH); 3, 11 (дд., J=1,4, 19,0 Гц, 1H, H-10eq); 3,6-4,0 (м., 2H, NH-CH₂-CH₂-OH); 3,99 (с., 3H, OCH₃); 4,04 (с., 4H, -O-CH₂-O-); 4,34 (м., 1H, H-7); 7,29 (д., J=7,7 Гц, 1H, H-3); 7,69 (дд., J=7,7, 7,7 Гц, 1H, H-2); 7,88 (д., J=7,7 Гц, 1H, H-1).

Пример 8: Получение 7-дезокси-7-(2'-гидроксиэтиламино)дауномицинона (А38)
Указанное в заголовке соединение А38 получают из соединения А34 в соответствии со способом, описанным в Примере 4.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метанол (9:1 по объему), R_f = 0,5.

FD-MS: m/e 441 [M]^+
1H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ :
1,80 (дл., J=4,2, 14,4 Гц, 1H, H-8ах); 2, 28 (ддд., J=1,8, 2,0, 14,4 Гц, 1H, H-8eq); 2,41 (с., 3H, COCH₃); 2,96 (д., J=18,5 Гц, 1H, H-10ax); 3,03 (м. , 2H, NH-CH₂-CH₂-OH); 3,20 (дд., J=1,8, 18,5 Гц, 1H, H-10eq); 3,5-4,0 (м., 2H, NH-CH₂-CH₂-OH); 4,08 (с., 3H, OCH₃); 4,45 (дд., J=2,0, 4,2 Гц, 1H, H-7); 7,39 (J=1,0, 8,5 Гц, 1H, H-3); 7,78 (J=7,7, 8,5 Гц, 1H, H-2); 8,03 (дд., J= 1,0, 7,7, 1H, H-1).

Пример 9: Получение 7-дезокси-13-этилендиокси-7-амино- дауномицинона (А40)
7-Дезокси-7-(3', 4'-диметоксибензиламино)-13-дезоксо-13- этилендиоксидауномицинон (А32, 0,5 г), полученный, как описано в Примере 3, растворяют в смеси метиленхлорида (80 мл) и воды (4 мл), добавляемой вместе с 2, 3-дихлор-5,6-дициано-1,4- бензохиноном (ДДХ, DDQ), и выдерживают при комнатной температуре в течение 24 часов. После этого реакционную смесь промывают 1% водным раствором однозамещенного карбоната натрия. Органическую фазу отделяют, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения А40 (0,3 г).

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метанол (6:1 по объему), R_f=0,25.

Пример 10: Получение 7-дезокси-7-аминодауномицинона (А42)
Соединение A40 (0,2 г), полученное, как описано в Примере 9, обрабатывают трифторуксусной кислотой, как описано в Примере 4, с получением, после проведения флэш-хроматографии на силикагеле с использованием смеси метиленхлорида и метанола (95: 5 по объему), 7-дезокси-7-аминодауномицинона (А42, 0,14 г), который преобразуют в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метанол (6:1 по объему), R_f= 0,33.

FD-MS: m/e 397 [M]^+
1H ЯМР (200 МГц, DMSO-d₆) δ :
1,79 (дл., J=5,3, 14,9 Гц, 1H, H-8ax); 2,02 (д., J=14,9 Гц, 1H, H-8eq); 2,29 (с., 3H, COCH₃); 2,76 (д., J=18,6 Гц, 1H, H-10ax); 2,89 (д., J=18,6 Гц, 1H, H-10eq); 3,96 (с., 3H, 4-OCH₃); 4,31 (д., J=5,3 Гц, 1H, H-7); 7,60 (м., 1H, H-1 + H-2); 8,00 (широкий сигнал, 2H, NH₂).

Пример 11: Получение 14-(N-пиперидино)-дауномицинона (А2)
14-Бромдауномицинон (L1': R₁=OCH₃, R₂=H, R₃=OH) (0,95 г, 2 ммоль), полученный, как описано в J. Org. Chem., 42, 3653, 1977, растворяют в сухом метиленхлориде (50 мл), обрабатывают пиперидином (0,34 г, 4 ммоль) и выдерживают при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем при пониженном давлении удаляют растворитель, и сырой продукт подвергают флэш-хроматографии на селикагеле с использованием в качестве элюирующей системы смеси этиленхлорида и метанола (96:4 по объему) с получением указанного в заголовке соединения, которое переводят в соответствующий гидрохлорид (0,55 г, выход 53%) путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метанол (9:1 по объему) R_f=0,5.

FAB-MS: m/e 482 [M]^+
1H ЯМР (200 МГц, DMSO-d₆) δ :
1,2-1,9 (м. , 6H, пиперидин CH₂-3 + CH₂-4 + CH₂-5); 1,97 (дд., J=4,6, 14,1 Гц, 1H, H-8ax); 2,30 (д., J=14,1 Гц, 1H, H-8eq); 2,89 (д., J=18,4 Гц, 1H, H-10ax); 3,0, 3,4 (м., 4H, пиперидин CH₂-1 + CH₂-6); 3,13 (д., J=18,4 Гц, 1H, H-10eq); 3,97 (с., 3H, OCH₃-4); 4,76 (м., 2H, CH₂-14); 5,10 (м., 1H, H-7); 5,60 (д., J=6,6 Гц, 1H, OH-7); 6,39 (с., 1H, OH-9); 7,64 (м., 1H, H-3); 7,90 (м., 2H, H-1 + H-2); 9,7 (широкий сигнал, 1H, NH⁺); 13,23 (с., 1H, OH-11); 13,95 (с., 1H, OH-6).

Пример 12: Получение 14-[N-(N'-метил)пиперазино]дауномицина (А4)
Способ получения указанного в заголовке соединения аналогичен описанным в примерах 1 и 2.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метилекнхлорид/метанол (8:2 по объему) R_f=0,36.

FAВ-MS: m/e = 497[M+H]^+
1H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ :
2,14 (дд., J=4,8, 14,5 Гц, 1H, H-8ax); 2,32 (с., 3H, NCH₃); 2,36 (ддд., J=2,0, 2,0, 14,5 Гц, 1H, H-8eq); 2,4-2,7 (м., 8H, водороды пиперазина); 2,98 (д. , J =18,5 Гц, 1H, H-10ax); 3,17 (дд., J=2,0, 18,5 Гц, 1H, H-10eq); 3,60, 3,72 (два дуплета, J=16,7 Гц, 2H, CH₂-14); 4,0 (широкий сигнал, 1H, OH-7); 4,09 (с. , 3H, OCH₃-4); 5,27 (дд., J=2,0, 4,8 Гц, 1H, H-7); 6,1 (широкий сигнал, 1H, OH-9); 7,39 (дд., J=1,1, 8,6 Гц, 1H, H-2); 7,78 (дд., J=7,7, 8,6 Гц, 1H, H-2); 8,02 (дд., J=1,1,7,7 Гц, 1H, H-1); 13,31 (широкий сигнал, 1H, OH-11); 13,97 (с., 1H, OH-6).

Пример 13: Получение 14-[N-диэтиламино]дауномицинона (А58)
Способ получения указанного в заголовке соединения аналогичен описанным в примерах 1 и 2.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метиловый спирт (9:1 по объему), R_f=0,45.

FAВ-MS: m/e = 470 [M+H]^+
1H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ :
1,15 (т., J=7,2 Гц, 6H, N(CH₂CH₃)₂); 2,14 (дд., J=4,8, 14,5 Гц, 1H, H-8ax); 2,37 (ддд., J=2,0, 2,0, 14,5 Гц, 1H, H-8eq); 2,69 (м., 4H, N(CH₂CH₃)₂); 2,97 (д., J =18,5 Гц, 1H, H-10ax); 3,21 (дд., J=2,0, 18,5 Гц, 1H, H-10eq); 3,58, 3,73 (два дуплета, J=15,4 Гц, 2H, CH₂-14); 4,08 (с., 3H, OCH₃-4); 5,23 (дд., J=2,0, 4,8 Гц, 1H, H-7); 7,38 (дд., J=1,0, 8,3 Гц, 1H, H-3); 7,76 (дд. , J= 7,7, 8,3 Гц, 1H, H-2); 8,02 (дд., J =1,0, 7,7 Гц, 1H, H-1); 13,3 (широкий сигнал, 1H, OH-11); 14,0 (широкий сигнал, 1H, OH-6).

Пример 14: Получение 4-деметокси-14-(N-морфолино)- дауномицинона (А10)
Указанное в заголовке соединение получают, как описано в примере 1, используя в качестве исходного соединения 4-деметокси- 14-бромдауномицинон, который получен путем бромирования 4- деметоксидауномицинона по способу, описанному в J.Org. Chem., 42, 3653, 1977, для дауномицинона.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метиловый спирт (96:4 по объему), R_f=0,21.

FAВ-MS: m/e 454 [M+H]^+
1H ЯМР (200 МГц DMSO-d₆) δ :
1,96 (дд. , J=4,6, 14,3 Гц, 1H, H-8ax); 2,16 (дд., J=2,0, 14,3 Гц, 1H, H-8eq); 2,44 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 2,92, 3,00 (два дуплета, J=18,7 Гц, 2H, CH₂-10); 3,57 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 3,67, 3,72 (два дуплета, J=18,9 Гц, 2H, CH₂-14); 5,03 (м., 1H, H-7); 5,4 (широкий сигнал, 1H, OH-7); 6,05 (с., 1H, OH-9); 7,96 (м., 2H, H-2 + H-3); 8,26 (м., 2H, H-1 + H-4); 13,3 (широкий сигнал, 2H, OH-6 + OH-11).

Пример 15: Получение 4-деметокси-7-дезокси-14-(N-морфолино) дауномицинона (А24)
Указанное в заголовке соединение получают, как описано в примере 1, используя в качестве исходного соединения 4-деметокси-7-дезокси- 14-бромдауномицинон, полученный путем бромирования 4-деметокси-7-дезокси-лауномицинона по способу, описанному в J. Org. Chem., 42, 3653, 1977, для дауномицина. ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метиловый спирт (96:4 по объему), R_f=0,33.

FAВ-MS: m/e 438 [M+H]^+
1H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ :
1,9-2,0 (м. , 2H, CH₂-8); 2,63 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 1,8-3,2 (м., 4H, CH₂-7 + CH₂-10); 3,46, 3,60 (два дуплета, J=15,0 Гц, 2H, CH₂-14); 3,78 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 7,82 (м., 2H, H-2 + H-3); 8,32 (м., 2H, H-1 + H-4); 13,44, 13,46 (два синглета, OH-6 + OH-11).

Пример 16: Получение 7-дезокси-14-(N-морфолино)-дауномицинона (А17)
Смесь 14-(N-морфолино)дауномицинона (А1) (1,5 г, 3,3 ммоль) и 5% палладия на активированном угле (300 мг) в 250 мл диоксана перемешивают в атмосфере водорода под давлением 2 атм в течение одного часа. Затем катализатор отфильтровывают, растворитель выпаривают при пониженном давлении, а остаток чистят с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: метиленхлорид/метиловый спирт 96: 4 по объему). Указанное в заголовке соединение (0,4 г, 28%) выделяют в виде красного порошка, затем превращают его в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метиловый спирт (96:4 по объему), R_f = 0,20.

FAВ-MS: m/e 468 [M+H]^+
1H ЯМР (200 MГц, DMSO-d₆) δ :
1,7-2,2 (м. , 2H, CH₂-8), 2,83 (м., 2H, CH₂-7), 2,91 (м., 3H, CH₂-10); 3,3-3,8 (м. , 8H, водороды морфолина); 3,97 (с., 3H, OCH₃-4); 4,8 (м., 2H, CH₂-14); 6,14 (широкий сигнал, OH-9); 7,65 (м., 1H, H-3); 7,91 (м., 2H,H-1 + H-2); 10,4 (широкий сигнал, 1H, HN⁺); 13,34 (с., 1H, OH-11); 13,85 (с., 1H, OH-6).

Пример 17: Получение 13-дигидро-14-(N-морфолино)-дауномицинона (А59)
Эфират бромида магния (2,24 г, 8,68 ммоль) добавляют по каплям к перемешиваемой суспензии 14-(N-морфолино)дауномициноиа (А1) (2,10 г, 4,34 ммоль) в тетрагидрофуране (80 мл) в атмосфере аргона. К полученной смеси, которую охлаждают до температуры -40^oC, добавляют порциями боргидрид натрия (0,164 г, 4,34 ммоль). После перемешивания в течение 1,5 часа при температуре -40^oC реакцию гасят, добавляя по каплям метиловый спирт (25 мл). Летучие продукты выпаривают при пониженном давлении, и остаток чистят на колонке с силикагелем (элюент: хлороформ/метиловый спирт 94:6 по объему. Указанное в заголовке соединение (1,39 г, 66%) выделяют в виде красного порошка и затем переводят его в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой хлороформ/метиловый спирт (94:6 по объему), R_f= 0,30.

FAВ-MS: m/e 486 [M+H]^+
1H ЯМР (200 МГц, DMCO-d₆) δ :
1,7-2,2 (м., 2H, CH₂-8); 2,3-2,8 (м., 6H, CH₂-14 + N(CH₂CH₂)₂O; 2,86 (м. , 2H, CH₂-10); 3,57 (м., 5H, N(CH₂CH₂)₂O + CH-13); 3,97 (с., 3H, OCH₃-4); 4,81 (д.,J=5,5 Гц, 1H, OH-13); 5,03 (м., 1H, H-7); 5,20 (м., 1H, OH-7); 5,6, 5,8 (широкий сигнал, 1H, OH-9); 7,5-8,0 (м., 3H, H-1 + H-2 + H-3); 13,3 (широкий сигнал, 1H, OH-6).

Пример 18: Получение 7-дезокси-13-дигидро-14-(N-морфолино) дауномицинона (А60)
К раствору 13-дигидро-14-(N-морфолино)дауномицинона (0,240 г, 0,494 ммоль), полученного, как описано в предыдущем примере, в диметилформамиде (16 мл) при перемешивании добавляют при комнатной температуре в атмосфере аргона по каплям раствор дитионита натрия (2,15 г, 1,23 ммоль) в воде (8 мл). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре реакционную смесь вливают в воду (250 мл) и экстрагируют с помощью этилацетата (6 х 25 мл).

Слои разделяют, органический слой промывают водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают с получением 300 мг сырого продукта, который далее чистят с применением колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: хлороформ/метиловый спирт 96:4 по объему). Указанное в заголовке соединение (116 мг, 50%) выделяют в виде красного порошка и затем переводят его в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой хлороформ/метиловый спирт (96:4 по объему), R_f= 0, 20.

FAВ-MS: m/e 470 [M+H]^+
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ :
1,56 (м. , 1H, H-8ax); 1,82 (м., 1H, H-8eq); 2,38 (дд., J=7,7, 12,8 Гц, 1H, CH(H)-14); 2,63 (дд. , J= 3,7, 12,8 Гц, 1H, CH(H)-14); 2,45 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 2,6-2,9 (м., 4H, CH₂-10 + CH₂-7); 3,53 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 3,53 (м., 1H, CH-13); 3,94 (с., 3H, OCH₃-4); 4,65 (д.,J=5,1 Гц, 1H, OH-13); 4,76 (широкий сигнал, 1H, OH-9); 7,58 (м., 1H, H-3); 7,86 (м., 2H, H-1 + H-2); 13,36 (с., 1H, OH-11); 13,88 (с., 1H, OH-6).

Пример 19: Получение 4-деметокси-7-дезокси-10-гидрокси-14- (N-морфолино) дауномицинона (А61)
К суспензии 4-деметокси-7-дезокси-9,10-ангидро-дауномицинона, полученного, как описано в J. Org. Chem., 48, 2820, 1983, (0,5 г, 1,5 ммоль) в этилацетате/ацетонитриле (1:1) (20 мл) добавляют при перемешивании по каплям при температуре 0^oC в атмосфере аргона раствор гидрата трихлорида рутения (27 мг, 0,1 ммоль) и периодата натрия (0,48 г, 2,2 ммоль в воде (3 мл). После перемешивания в течение 0,5 часа при температуре 0^oC реакционную смесь выливают в водный раствор тиосульфата натрия (20 мл) и затем экстрагируют метиленхлоридом. Далее слои разделяют, органический слой промывают водой, высушивают над сульфатом натрия и выпаривают с получением 300 мг сырого продукта, который затем подвергают чистке с применением колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: хлороформ/метиловый спирт 50:0,2 по объему), 4-деметокси-7- дезокси-10-гидрокси-дауномицинон выделяют (194 мг, 35%) в виде красного порошка, Т.пл. 241-242^oC (разлож.).

4-Деметокси-7-дезокси-10-гидрокси-14-бромдауномицинон получают из 4-деметокси-7-дезокси-10-гидрокси-дауномицинона, который подвергают бромированию, как описано в J. Org. Chem., 42, 3653, 1977, для дауномицинона. Красный порошок; Т.пл. 223-225^oC (разлож.).

В соответствии со способом, указанным в примере 1, 4-деметокси-7- дезокси-10-гидрокси-14-бромдауномицинон преобразуют в указанное в заголовке соединение, которое выделяют в виде красного порошка и затем переводят в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой хлороформ/метиловый спирт (96:4 по объему), R_f =0,30.

FAВ-MS: m/e 453 [M+H]^+
1H ЯМР (200 MГц, DMSO-d₆) δ :
1,8-3,0 (м. , 4H, CH₂-8 + CH₂-7); 2, 36 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 3,47 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 3,59 (с., 2H, CH₂-14); 4,90 (с., 1H, H-10); 5,60 (широкие сигналы, 1H, OH-10); 5,67 (с., 1H, H-9); 7,94 (м., 2H, H-2 + H-2 + H-3); 8,27 (м., 2H, H-1 + H-4); 13,30 (широкие сигналы, 2H, OH-6 + OH-11).

Пример 20: получение 4-дeмeтoкcи-4-гидpoкcи-7-дeзoкcи 7- (N-морфолино) дауномицинона (А62)
4-Деметокси-4-гидрокси-O⁶, O⁷- диэтоксикарбонилдауномицинон (1,3 г, 2,5 ммоль), полученный из 6,7,11-триэтоксикарбонилдауномицинона (G1: R_b=H, R_c= COCH₃, R'_e =OCOOC₂H₅), как описано IО Farmaco, Ed. Sc., 35, 347 1980, растворяют в смеси метиленхлорида (40 мл) и метанола (40 мл) и добавляют 1 мл морфолина. Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 20 часов. При пониженном давлении удаляют растворитель и сырой продукт подвергают флэш-хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюирующей системы смеси метиленхлорида и ацетона (9:1 по объему) с получением указанного в заголовке соединения, которое переводят в соответствующий гидрохлорид (0,3 г, выход 25%) путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием его диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метанол (96:4 по объему), R_f =0,8.

FAВ-MS: m/e 502 [M+H]^+
1H ЯМР (200 МГц, DMSO-d₆) δ :
1,85 (м., 1H, H-8ax); 2,10 (м., 1H, OCH₂CH(Hax)N); 2,20 (м., 1H, H-8eq); 2,32 (д., J=10,7 Гц, 1H, CH(H)-14); 2,40 (м., 2H, NCH₂CH₂OH); 2,68 (м., 1H, OCH₂CH(Heg)N); 2,77, 2,86 (д., J=19,2 Гц, 1H, H-10ax); 2,83 (д., J=10,7 Гц, 1H, CH(H)-14); 3,07-3,10 (д. , J= 19,2 Гц, 1H, H-10eq); 3,47 (м., 2H, NCH₂ CH₂OH); 3,57 (м., 1H, NCH(Hax)O); 3,90 (м., 1H, NCH₂CH(Heg)O); 3,97 (с., 3H, OCH₃-4); 4,40 (м., 1H, CH₂OH); 5,32, 5,34, 5,84, 5,93 (с., 2H, OH-9 + OH-13); 7, 63 (м., 1H, H-3); 7,87 (м., 2H, H-1 + H-2); 13,31 (широкий сигнал, 1H, OH-11); 13,97 (широкий сигнал, 1H, OH-6).

Пример 21: Получение 4-деметокси-7, 9-дидезокси-14-(N- морфолино)дауномицинона (А63)
4-Деметокси-7,9-дидезокси-14-бромдауномицинон получают из 4- деметокси-7,9-дидезокси-10-гидрокси-дауномицинона, полученного, как описано в Synt. Commun. , 15, 1081, 1985, с последующим бромированием, как описано в J.Org. Chem., 42, 3653, 1977, для дауномицинона.

В соответствии со способом, описанным в примере 1, 4-деметокси-7,9-дидезокси-14-бромдауномицинон преобразуют в указанное в заголовке соединение, которое выделяют в виде красного порошка и затем переводят в соответствующий гидрохлорид путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой хлороформ/метиловый спирт (98:2 по объему),
R_f=0,23.

FAВ-MS: m/e 422 [M+H]^+
1H ЯМР (200 МГц, пиридин-d₅) δ :
1,78 (м., 1H, H-8ах); 2,18 (м., 1H, H-8eq); 2,54 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 2,70 (м., 1H, H-9); 2,9-3,3 (м., 4H, CH₂-10 + CH₂-7); 3,43 (м., 2H, CH₂-14); 3,78 (м. , 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 7,75 (м., 2H, H-2 + H-3); 8,39 (м., 2H, H-1 + H-4); 13,80 (широкий сигнал, 2H, OH-6 + OH-11).

Пример 22: Получение 4-деметокси, 4-гидрокси, 14-(N-морфолино) дауномицинона (А64)
Суспензию 4-деметокси-4-гидроксидауномицинона (1,4 г, 3,6 ммоль), полученного, как описано в I.Antibiotics, 31, 178, 1978, в 20 мл диоксана, обрабатывают 10,3 мл раствора брома, полученного при разбавлении диоксаном 1 мл брома до конечного объема 50 мл. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение трех часов, а полученный 4-деметокси-4-гидрокси-14- бромдауномицинон высаживают добавлением 50 мл петролейного эфира. Осадок отфильтровывают, промывают петролейным эфиром и высушивают под вакуумом с получением 1,35 г (80% выход) сырого продукта, который используют как таковой в последующем взаимодействии.

Суспензию 0.75 г (1,6 ммоль) 4-деметокси-4-гидрокси-14- бромдауномицинона в 50 мл метиленхлорида обрабатывают 0,28 г (3,2 ммоль) морфолина, и полученную при этом смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 часов. Затем при пониженном давлении удаляют растворитель, и сырой продукт подвергают флэш-хроматографии на силикагеле, используя для элюации смесь метиленхлорида в метаноле (95:5 по объему), с получением указанного в заголовке соединения, которое переводят в соответствующий гидрохлорид (0,16 г, выход 20%) путем добавления стехиометрического количества хлористого водорода в метаноле с последующим высаживанием его диэтиловым эфиром.

ТСХ проводят на Кизельгеле F₂₅₄ (Мерк), элюируя системой метиленхлорид/метанол (9:1 по объему), R_f= 0,6.

FAB-MS: m/e 470 [M+H]^+
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ :
2,01 (дд. , J=4,7, 14,1 Гц, 1H, H-8ax); 2,31 (дд., J=14, 1 Гц, 1H, H-8eq); 2,92, 3,16 (два дуплета, J =18,8 Гц, 2H, CH₂-10); 3,1-3,3 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 3,7-4,0 (м., 4H, N(CH₂CH₂)₂O); 4,80, 4,87 (два дуплета, J=18,8 Гц, 2H, CH₂-14); 5,11 (м., 1H, H-7); 5,70 (широкие сигналы, 12H, OH-7); 6,34 (с. , 1H, OH-9); 7,41 (м. , 1H, H-3); 7,8-7,9 (м., 2H, H-1 + H-2); 10,40 (широкий сигнал, 1H, HN⁺); 11,98 (с., 1H, OH-4); 12,80 (с., 1H, OH-6); 13,40 (с., 1H, OH-11).

Биологическое исследование
Способность антрациклиноновых производных формулы А препятствовать проявлению самоагрегационных свойств β-амилоидного фрагмента 25-35 и PrP фрагмента 106-126 может быть продемонстрирована при исследовании светорассеяния.

β 25-35 (GSNKGAIIGLH) и PrP 106-126 (KTNMKHMAGAAAAGAVVGGLG) синтезируют с помощью техники твердофазной химии в аппарате 430А Эпплайд Биосистемз Инструментс (430А Applied Biosystems Instruments) и последующей очистки методом ЖХВД с обращенной фазой [Бэкман Инст. мод. 243 (Beckman Inst. mod. 243)], как описано в Forloni et al. Nature 362, 543, 1993.

Светорассеяние растворов, содержащих пептид, оценивают с помощью спектрофлуориметрии [Перкин Элмер LS 50В (Perkin Elmer LS 50В), в ходе которой процессы возбуждения и эмиссии отслеживают при 600 нм. β-Амилоидный фрагмент 35-35 и PrP 106-126 растворяют в 10 мМ растворе фосфатного буфера, pH 5, до достижения концентрации от 0,5 до 1 мг/мл, (0,4-0,8 мМ и 0,2-0,4 мМ растворы соответственно), при этом в пределах часа отмечается их спонтанная агрегация.

Исследуемые соединения, растворенные в 5 мМ Трис буфере, pH 7,4, до нескольких различных концентраций (0,2-2 мМ), добавляют к раствору пептидов в момент их приготовления для исследования и оценки процесса фибриллогенеза. Показано, что добавление соединений, полученных по примерам 1-22, в эквимолярной концентрации к β-амилоидному фрагменту 25-36 и PrP 106-126, полностью блокирует агрегацию.

Нейротоксичность
Нейрональные клетки получают из коры головного мозга крысиных эмбрионов на 17 день эмбрионального развития и культивируют в присутствии эмбриональной сыворотки теленка (10%), как описано в Forloni et al., Mol. Brain Res., 16, 128, 1992.

Присущую соединениям А цитотоксичность оценивают, проводя повторные экспозиции корковых нейронов с различными концентрациями соединений, изменяющихся в широком диапазоне от наномолярных до микромолярных концентраций.

Смерть нейрональных клеток оценивают количественно с помощью колориметрического метода, описанного Моссманн с соав. (Mossmann et al., J. Immunol. Meth., 65, 55-63, 1983).

Показано, что вплоть до концентрации 10 мкМ все исследованные соединения не оказывают какого-либо нейротоксического воздействия.

Биологическое испытание
Соединения, раскрываемые в настоящей патентной заявке обладают высокой ингибиторной активностью в отношении амилоидоза. Действительно, соединения формулы А препятствуют инициируемой затравкой агрегации А β 1-40 пептида в мономерной форме. Эту активность оценивали в соответствии с описанной ниже процедурой.

Исходный раствор пептидного мономера А β 1-40 готовили путем растворения пептида в диметилсульфоксиде в концентрации 33,33 мг/мл. Исходный раствор затем разбавляли 1 - 11,5 диметилсульфоксидом. Этот раствор затем разбавляли 10 мМ фосфатного буфера, имеющего pH 7,4, содержащего 150 мМ хлорида натрия, для получения раствора для испытания.

В колбу Эппендорфа, содержащую 47 мкл раствора пептидного мономера А β 1-40, добавляли 3 мкл водного раствора испытываемого соединения (830 мкМ), содержащего 66,4 мкМ (в расчете на количество мономера А β 1-40) предварительно образованных обработанных ультразвуком фибрилл А β 1-40; полученный раствор состоял из мономера А β 1-40 (20 мкМ), испытываемого соединения (50 мкМ) и содержал 4 мкМ, в расчете на количество А β 1-40 мономера, предварительно образованных обработанных ультразвуком А β 1-40 фибрилл. Агрегации давали осуществиться в течение двух часов при температуре 37^oC. Суспензию затем центрифугировали при 15000 об/мин при температуре +4^oC в течение 15 минут, надосадочную жидкость собирали и производили количественную оценку мономера А β 1-40 при помощи ВЭЖХ.

Активность некоторых репрезентативных соединений приведена в Таблице 1. Активность выражена в процентах ингибирования агрегации 20 мкМ раствора мономера А β 1-40, стимулированной 4 мкМ, в расчете на количество мономера А β 1-40, предварительно образованных обработанных ультразвуком А β 1-40 фибрилл.

Реферат

Настоящее изобретение относится к медицине, к новому применению для лечения амилоидоза антрациклинона формулы А, в которой R₁, R₂, R₃, R₄ и R₅ представляют собой соответствующие заместители. Некоторые соединения формулы А являются новыми. Описаны также способы их получения и содержащие их фармацевтические композиции. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения амилоидоза. 3 с. и 14 з.п. ф-лы, 1 табл.

Формула