Синергетические антибактериальные эффекты экстракта коры магнолии и сложного этилового эфира n-лауроил-l-аргинина на биопленку зубного налета - RU2722421C2

Чертежи

Описание

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Данная заявка испрашивает приоритет предварительной заявки США № 62/217213, поданной 11 сентября 2015, содержание которой полностью включено в настоящее описание посредством ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0002] Настоящее раскрытие относится в целом к композициям для ухода за полостью рта и способам ингибирования образования бактериями слюны биопленки зубного налета, и более конкретно к композициям для ухода за полостью рта, содержащим комбинацию экстракта коры магнолии (МВЕ) и сложного этилового эфира N^α-лауроил-L-аргинина (LAE). Композиции для ухода за полостью рта полезны для улучшения гигиены полости рта, включая ингибирование образования биопленки налета, снижение образования налета и адгезии к зубам.

[0003] В полости рта содержится более 700 видов бактерий (Aas, et al., ʺDefining the normal bacterial flora of the oral cavity,ʺ J. Clin. Microbiol., 2005, Vol. 43(11), pp. 5721-32), которые живут вместе в симбиозе в периоды удовлетворительного состояния полости рта (Zarco, et al., ʺThe oral microbiome in health and disease and the potential impact on personalized dental medicine,ʺ Oral. Dis., 2012, Vol. 18(2), pp. 109-20). Экологический сдвиг в микробиоте полости рта из-за различных внешних или внутренних стимулов может привести к избытку некоторых патогенных бактериальных штаммов и вызывать заболевание полости рта, такое как кариес, гингивит и/или галитоз (неприятный запах изо рта). Ключевым моментом для поддержания гигиены полости рта является сохранение симбиотической природы микроорганизмов полости рта и предотвращение чрезмерного роста патогенных видов в биопленке полости рта. Это в значительной степени достигается с помощью обычной гигиены полости рта, такой как чистка зубов с использованием зубной щетки, которая механически удаляет биопленку из полости рта. Зубная нить, зубочистки, полоскания рта и жевательная резинка также способствуют этому процессу в качестве вспомогательных средств для регулярной гигиены полости рта (см. Imfeld, T., ʺChewing gum - facts and fiction: A review of gum-chewing and oral health,ʺ Crit. Rev. Oral Biol. Med., 1999, Vol. 10(3), pp. 405-19; Crocombe, et al. ʺIs self interdental cleaning associated with dental plaque levels, dental calculus, gingivitis and periodontal disease?ʺ J. Periodontal Res., 2012, Vol. 47(1), pp. 188-97).

[0004] Зубной налет представляет собой биологическую пленку с очень сложной структурой, состоящую из более 300 микробов, их метаболитов и слюнного налета, который образуется на зубах в течение короткого промежутка времени после чистки зубов. Одна из проблем, связанных с предотвращением образования зубного налета, заключается в природе биопленки налета. В частности, биопленка налета имеет сложную структуру, которая защищает слюнные бактерии от ксенобиотиков (Marsh, P.D. (2004). ʺDental plaque as a microbial biofilmʺ Caries Research, 38(3):204-211). Сложность структуры биопленки ограничивает диффузию антимикробных веществ в матрицу биопленки, что приводит к защите бактерий в биопленке от воздействия противомикробного агента. Кроме того, было высказано предположение, что бактерии в биопленке налета образуют симбиотические связи для защиты друг друга за счет метаболитов, которые угрожают другим микробам при попадании в биопленку (Busscher H.J., Evans L.V., Editors. 1998. ʺOral Biofilms and Plaque Control,ʺ CRC Press. ISBN 978-90-5702-391-0). Таким образом, гораздо легче предотвратить образование налета, чем удалить образовавшийся налет. Для удаления существующей биопленки или для проникновения в нее необходимо использовать поверхностно-активные вещества, абразивы, ферменты или другие средства, которые могли бы помочь проникнуть в биопленку и удалить налет.

[0005] Двумя основными механизмами действия для предотвращения образования налета являются следующие: 1) использование антимикробных агентов и 2) ингибирование глюкозилтрансферазы (GTF). Антимикробные агенты, которые, как было показано, имеют определенные способности уменьшать налет, включают хлоргексидин, цетилпиридинийхлорид (CPC), триклозан и делмопинол. Все они представляют собой лекарственные и неприродные антимикробные агенты. Также было обнаружено, что эфирные масла, такие как тимол, эвкалиптол, метилсалицилат и ментол, наряду с другими эфирными маслами, используемые в носителе на основе спирта, уменьшают образование налета. Хотя тимол и является наиболее эффективным для уменьшения налета, он имеет неприятный вкус. В целом, эти масла успешно применяются из-за присутствия спирта, облегчающего их растворимость и проникновение в биологическую пленку налета. Кроме того, несмотря на то, что они используются в составе средств для полоскания рта, таких как жидкости для полоскания рта, высокие концентрации спиртов могут оставлять горькое послевкусие в композициях для ухода за полостью рта, таких как жевательные резинки, мятные конфеты, съедобные пленки, кондитерские изделия и тому подобное. Несмотря на то, что известно несколько ингибиторов GTF, описанных в научных публикациях и патентах, их потенциал для применения в композициях для ухода за полостью рта и кондитерских изделиях не был достаточно исследован.

[0006] Таким образом, существует потребность в других композициях для ухода за полостью рта, которые можно использовать для облегчения удаления бактерий из полости рта и для ингибирования образования бактериями слюны биопленки налета.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0007] Настоящее изобретение относится, в целом, к композициям для ухода за полостью рта и способам ухода за полостью рта и ингибирования образования бактериями слюны биопленки налета, и, более конкретно, к композициям для ухода за полостью рта, содержащим комбинацию экстракта коры магнолии (МВЕ) и сложного этилового эфира N^α-лауроил-L-аргинина (LAE). Композиции для ухода за полостью рта полезны для улучшения гигиены полости рта, включая ингибирование образования биопленки налета и снижение образования налета, а также для снижения его адгезии к зубам.

[0008] Таким образом, в одном аспекте настоящее изобретение направлено на композицию для ухода за полостью рта, содержащую МВЕ и LAE, где композиция предназначена для ингибирования образования бактериями слюны биопленки налета в полости рта потребителя, и эта композиция для ухода за полостью рта содержит МВЕ и LAE в количествах, обеспечивающих синергетическое ингибирование образования биопленки налета в полости рта. В различных вариантах осуществления изобретения композиция для ухода за полостью рта может содержать МВЕ и LAE в массовом соотношении от приблизительно 16:1 до приблизительно 4:1.

[0009] В другом аспекте настоящее изобретение относится к композиции для ухода за полостью рта с покрытием, предназначенной для ингибирования образования биопленки налета бактериями слюны в полости рта потребителя, где композиция для ухода за полостью рта с покрытием содержит МВЕ и LAE в количествах, обеспечивающих синергетическое ингибирование образования биопленки налета в полости рта.

[0010] В другом аспекте настоящее изобретение направлено на способ получения композиции для ухода за полостью рта с покрытием, где способ включает: предварительную обработку МВЕ и LAE с образованием предварительной смеси; добавление предварительной смеси к сиропу для покрытия, и нанесение сиропа для покрытия на композицию для ухода за полостью рта, с получением композиции для ухода за полостью рта с покрытием, где композиция для ухода за полостью рта с покрытием содержит МВЕ и LAE в количествах, которые обеспечивают синергетическое ингибирование образования бактериями слюны биопленки зубного налета в полости рта потребителя. В различных вариантах осуществления предварительная обработка может включать просеивание МВЕ и LAE, обработку ультразвуком (сонификацию) MBE и LAE и/или смешивание МВЕ и LAE с одним или более органолептическими компонентами.

[0011] В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения композиции жевательной резинки, где способ включает: предварительную обработку МВЕ и LAE с получением предварительной смеси; и образование композиции жевательной резинки из предварительной смеси, где композиция жевательной резинки содержит МВЕ и LAE в количествах, которые обеспечивают синергетическое ингибирование образования бактериями слюны биопленки зубного налета в полости рта потребителя. В различных вариантах осуществления предварительная обработка может включать просеивание МВЕ и LAE, обработку ультразвуком (сонификацию) MBE и LAE и/или смешивание МВЕ и LAE с порошком основы жевательной резинки.

[0012] В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу ингибирования образования биопленки зубного налета в полости рта млекопитающего, где способ включает: приведение в контакт композиции для ухода за полостью рта по изобретению с полостью рта субъекта.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

[0013] Сущность изобретения будет лучше понятна, и признаки, аспекты и преимущества, отличные от тех, которые изложены выше, станут очевидными при рассмотрении следующего подробного описания изобретения. Это подробное описание содержит ссылки на следующие фигуры.

[0014] На Фигуре 1A и Фигуре 1B представлены графики, показывающие результаты качественной светоиндуцированной флуоресценции (QLF), которые обсуждаются в Примере 2. На Фигуре 1A показана площадь красной флуоресценции лабиальной поверхности передних зубов (от клыка до клыка, минимум (Mn), максимум (Mx)) На Фигуре 1В показан процентная доля площади красной флуоресценции по отношению ко всей поверхности зубов.

[0015] На Фигуре 2 представлен график, показывающий влияние жевательной резинки на образование кислоты в бактериальных налетах. Бактерии зубного налета собирали до ("до") и после ("после") жевания жевательной резинки, содержащей MBE/LAE (жевательная резинка "MBE"), контрольной жевательной резинки, не содержащей МВЕ или LAE (жевательная резинка "контроль"), или основы жевательной резинки, не содержащей МВЕ или LAE. На Фигуре 2 показаны средние значения рН дисперсий биомассы зубного налета, полученной во время сбора налета (0 час) или через 2 или 4 часа инкубации.

[0016] На Фигуре 3 представлен график, показывающий изменение продуцирования кислоты (представленный в виде разности рН, "ΔpΗ") бактериями зубного налета через 2 и 4 часа после жевания ("после") жевательной резинки, содержащей MBE/LAE (жевательная резинка "MBE"), контрольной жевательной резинки, не содержащей МВЕ или LAE (жевательная резинка "контроль"), или основы жевательной резинки, не содержащей МВЕ или LAE. Также показано изменение продуцирования кислоты во время роста бактерий налета, собранных до жевания ("до").

[0017] На Фигуре 4 представлен график, показывающий влияние жевательных резинок на повторный рост бактерий зубного налета (выраженный в виде отношения возобновленного роста, OD_{конечн./начальн.}) у шести испытуемых через 2 и 4 часа после жевания ("после") жевательной резинки, содержащей MBE/LAE (жевательная резинка "MBE"), контрольной жевательной резинки, не содержащей МВЕ или LAE (жевательная резинка "контроль"), или основы жевательной резинки, не содержащей МВЕ или LAE. Также показан повторный рост бактерий зубного налета, собранных до жевания ("до").

[0018] На Фигуре 5 представлен график, показывающий средние отношения повторного роста бактерий зубного налета через 2 и 4 часа после жевания ("после") жевательной резинки, содержащей MBE/LAE (жевательная резинка "MBE"), контрольной жевательной резинки, не содержащей МВЕ или LAE (жевательная резинка "контроль"), или основы жевательной резинки, не содержащей МВЕ или LAE. Также показан повторный рост бактерий зубного налета, собранных до жевания ("до").

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0019] Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном описании, имеют смысловое значение, обычно понимаемое специалистом в области техники, к которой относится изобретение. Хотя на практике или при тестировании настоящего изобретения могут быть использованы любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны здесь, предпочтительные материалы и способы описаны ниже.

[0020] Настоящее изобретение относится, в целом, к композициям для ухода за полостью рта и способам гигиены полости рта и ингибирования образования бактериями слюны биопленки зубного налета. Более конкретно, настоящее изобретение относится к композициям для ухода за полостью рта, содержащих комбинацию экстракта коры магнолии (МВЕ) и сложного этилового эфира N^α-лауроил-L-аргинина (LAE). Композиции для ухода за полостью рта полезны для улучшения гигиены полости рта, включая ингибирование образования биопленок налета в полости рта, и, в частности, на зубах, и для уменьшения адгезии налета к зубам.

[0021] В частности, налет (также называемый как "зубной налет" или "биопленка налета") представляет собой биопленку или массу бактерий, растущих на поверхностях в полости рта. Зубной налет может приводить к различным заболеваниям полости рта, таким как кариес и заболевания периодонта. Streptococcus mutans (грамположительные, факультативные анаэробные бактерии) являются одними из основных компонентов налета и причин кариеса зубов.

[0022] Неожиданно было обнаружено, что MBE в сочетании с LAE является синергетически эффективным при ингибировании образования бактериями слюны биопленки налета. Используемый здесь термин "синергизм" или "синергетический эффект" относится к эффекту, возникающему при взаимодействии химических веществ или биологических структур, когда в результате общий эффект больше суммы индивидуальных эффектов любого из них. Введение комбинации эффективного количества МВЕ и LAE в композицию для ухода за полостью рта может, таким образом, предоставить композицию для ухода за полостью рта, которая ингибирует образование бактериями слюны биопленки налета. Композиции для ухода за полостью рта настоящего изобретения также могут быть эффективны для использования при удалении существующей биопленки налета.

[0023] Используемый в настоящем описании термин "эффективный" означает получение или способность получения желаемого эффекта. Кроме того, "эффективное количество" или "эффективная концентрация" относится к уровню, количеству, доле или проценту, который обеспечивает или способен обеспечивать желаемый эффект. Все проценты и соотношения, используемые в данном описании, являются массовыми, выраженными по отношению к общей массы композиции, и все измерения проводились при 25°С, если не указано иное.

[0024] Таким образом, в другом аспекте настоящее изобретение направлено на способ ингибирования образования бактериями слюны биопленки налета в полости рта субъекта-млекопитающего. Способ включает контактирование композиции по изобретению с полостью рта субъекта. Субъект-млекопитающее может быть человеком или животным, не являющимся человеком.

[0025] В еще одном варианте осуществления, настоящее изобретение направлено на способ получения композиции для ухода за полостью рта с покрытием. Способ включает предварительную обработку МВЕ и LAE с получением предварительной смеси, добавление предварительной смеси к сиропу для покрытия, и нанесение сиропа на композицию для ухода за полостью рта, с получением композиции для ухода за полостью рта с покрытием. Предварительная обработка МВЕ и LAE включает просеивание МВЕ и LAE перед добавлением к сиропу для нанесения покрытия; МВЕ и LAE могут быть обработаны ультразвуком перед добавлением к сиропу для покрытия; МВЕ и LAE могут быть смешаны с одним или более органолептическими компонентами до добавления к сиропу для покрытия; или могут быть применены комбинации указанных операций.

[0026] В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения композиции жевательной резинки. Способ включает предварительную обработку МВЕ и LAE с получением предварительной смеси, и получения композиции жевательной резинки из предварительной смеси. Предварительная обработка МВЕ и LAE включает просеивание МВЕ и LAE; МВЕ и LAE могут быть обработаны ультразвуком; МВЕ и LAE могут быть смешаны с порошкообразной основой резинки; или могут быть применены комбинации указанных операций.

[0027] Не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, считается, что предварительная обработка МВЕ и LAE приводит к повышению эффективности нагрузки и скорости высвобождения МВЕ из композиции для ухода за полостью рта, по сравнению с композициями для ухода за полостью рта, содержащими только МВЕ, или по сравнению с композициями, включающими МВЕ и LAE, которые не прошли предварительную обработку. В частности, в некоторых вариантах осуществления изобретения предварительная обработка путем просеивания активных веществ или путем ультразвуковой обработки для растворения активных веществ приводят к эффективности нагрузки в обычных жевательных резинках, составляющей более 90%. Таким образом, предварительная обработка улучшает эффективность нагрузки жевательной резинки от приблизительно 50% до приблизительно 90%.

Экстракт коры магнолии

[0028] Композиции настоящего изобретения содержат экстракт магнолии (также упоминаемый в настоящем описании как "экстракт магнолии", "экстракт коры магнолии" или "МВЕ"). Как указано в настоящей заявке, такой "экстракт" магнолии представляет собой экстракт из сухого слоя коры или всей коры растения семейства магнолиевых (Magnoliaceae), такого как Magnolia officinalis, ("магнолия лекарственная"), или синтетический или полусинтетический эквивалент такого экстракта, или активный компонент или соединение. Обычно экстракты коры магнолии (коры Magnolia officinalis) содержат гидрофобные соединения, включая магнолол, гонокиол, тетрагидромагнолол и тетрагидрогонокиол. Любое растение из семейства Magnoliaceae пригодно для настоящего изобретения и может быть использовано в альтернативных вариантах осуществления изобретения, и при этом предпочтительно, чтобы экстракт содержал эффективную концентрацию соединения, выбранного из группы, включающей магнолол, гонокиол, тетрагидромагнолол, тетрагидрогонокиол и их комбинации, и, предпочтительно, эффективную концентрацию магнолола и/или гонокиола. Предпочтительно, когда эффективная концентрация экстракта магнолии (или активного соединения (соединений) присутствующего в нем) представляет собой концентрацию, которая приводит к уменьшению образования биопленки зубного налета или к удалению ее в случае наличия биопленки, при использовании в сочетании с LAE. Предпочтительно, чтобы эффективная концентрация экстракта магнолии была такой, чтобы синергетически ингибировать образование бактериями слюны биопленки налета при использовании экстракта коры магнолии в сочетании с LAE.

[0029] Используемый в настоящем описании термин "экстрагирование" или "экстракция" твердого или жидкого материала означает контактирование материала с соответствующим растворителем для выделения вещества (веществ), которые желательны для извлечения из материала. Когда материал является твердым, то перед контактированием с растворителем его предпочтительно сушат и измельчают или размалывают. Такая экстракция может быть проведена обычными средствами, известными специалистам в данной области техники, например, используя экстракционный аппарат, такой как аппарат Сокслета, который удерживает твердый материал в держателе и позволяет растворителю протекать через материал; или путем совместного смешивания растворителя и материала с последующим разделением жидкой и твердой фаз или двух несмешивающихся жидких фаз, например, фильтрацией или отстаиванием и декантацией.

[0030] В одном из вариантов осуществления изобретения экстракт магнолии получают из высушенной коры магнолии, и он может быть получен экстракцией из коры с использованием подходящего растворителя. Растворители включают совместимые жидкости, такие как углеводороды и замещенные углеводороды.

[0031] В предпочтительных вариантах осуществления изобретения природные активные ингредиенты экстракта, используемые в композициях для ухода за полостью рта, являются воспроизводимыми и стабильными, и они являются микробиологически безопасными. В одном варианте осуществления изобретения экстракт коры магнолии выделяют экстракцией сверхкритической жидкостью (SFE) с использованием углекислого газа (СО₂). В сверхкритических жидкостях используют растворитель, который легко доступен, недорог и экологически безопасен (такой как СО₂). Диоксид углерода является нетоксичным, не взрывоопасным веществом, и он является легкодоступным и легко удаляется из экстрагированных продуктов. В некоторых вариантах осуществления изобретения экстракция с использованием SFE приводит к получению экстракта коры магнолии более светлого цвета (светло-бежевый продукт), что особенно подходит для композиций для ухода за полостью рта с точки зрения эстетики.

[0032] В различных вариантах осуществления изобретения предпочтительно, чтобы активный ингредиент в экстракте магнолии содержал либо магнолол, либо гонокиол, либо оба соединения. Магнолол и гонокиол представляют собой неионогенные гидроксибифенильные соединения, структуры которых, как полагают, являются следующими:

[0033] Кроме того, тетрагидроманолол и тетрагидрогонокиол представляют собой гидрированные аналоги магнолола и гонокиола, которые часто встречаются в относительно небольших концентрациях в экстрактах магнолии, и они, как таковые, могут быть включены в композицию.

[0034] Таким образом, как будет описано более подробно ниже, в различных вариантах осуществления настоящего изобретения экстракт магнолии содержит одно или несколько гидрофобных соединений: магнолол, гонокиол, террагидромагнолол, тетрагидрогонокиол и их смеси, которые используют в комбинации с LAE для ингибирования образования бактериями слюны биопленки налета в полости рта.

[0035] В различных вариантах осуществления, экстракт коры магнолии по изобретению содержит магнолол, гонокиол или оба соединения в количестве от приблизительно 2% до приблизительно 99% по массе. В других вариантах осуществления изобретения экстракт магнолии содержит магнолол, гонокиол, или оба соединения в количестве более 50 мас.%. В одном варианте осуществления изобретения, магнолол присутствует в количестве более 50 мас.%, предпочтительно - более 70 мас.%, или, наиболее предпочтительно - более 90 мас.%. В другом варианте осуществления изобретения гонокиол присутствует в количестве менее 50 мас.%, более предпочтительно - в количестве менее 30 мас.%, или наиболее предпочтительно - менее 10 мас.%.

[0036] МВЕ может присутствовать в композиции для ухода за полостью рта в количестве от 0,001 мас.% до 10 мас.%. В некоторых вариантах осуществления изобретения МВЕ присутствует в композиции для ухода за полостью рта в количестве от приблизительно 0,001 мас.% до приблизительно 5,0 мас.%, или от приблизительно 0,001 мас.% до приблизительно 2,0 мас.%. В другом варианте осуществления изобретения МВЕ присутствует в композиции для ухода за полостью рта в количестве от приблизительно 1,0 мас.% до приблизительно 2,0 мас.%. В других вариантах осуществления изобретения МВЕ присутствует в количестве менее 1 мас.%. Например, МВЕ может присутствовать в композиции для ухода за полостью рта в количестве от приблизительно 0,01 мас.% до приблизительно 1 мас.%. В предпочтительном варианте осуществления изобретения МВЕ присутствует в количестве от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,5 мас.%. Наиболее предпочтительно, когда МВЕ присутствует в композициях для ухода за полостью рта в количестве, достаточном для обеспечения синергетического массового соотношения МВЕ и LAE в композиции. В частности, МВЕ предпочтительно присутствует в композициях для ухода за полостью рта в комбинации с LAE в количестве, достаточном для ингибирования образования бактериями слюны биопленки налета.

[0037] В различных вариантах осуществления изобретения, композиции для ухода за полостью рта будут содержать от приблизительно 1 мг до приблизительно 20 мг МВЕ. В другом аспекте осуществления изобретения композиции для ухода за полостью рта будут содержать от приблизительно 1 мг до приблизительно 10 мг МВЕ.

Сложный этиловый эфир N^α-лауроил-L-аргинина

[0038] Помимо МВЕ, композиции для ухода за полостью рта настоящего изобретения дополнительно содержат сложный этиловый эфир N^α-лауроил-L-аргинина (LAE). LAE также известен как этиловый эфир лауринаргината, этиловый эфир лаурамидаргинина, N-лауроил-L-аргинин этиловый эфир, этил-N^α-лауроил-L-аргинат·HCl, и INS No. 243. Он представляет собой производное катионной аминокислоты, которое может быть использовано в качестве консерванта для пищевых продуктов. LAE обладает бактериостатической активностью в отношении грамположительных бактерий, грамотрицательных бактерий, плесени, дрожжей и других микроорганизмов, вызывающих порчу пищевых продуктов (см. Rodriguez, E., et. al, ʺCellular effects of monohydrochloride of L-arginine, N^α-lauroyl-ethyl ester (LAE) on exposure to Salmonella typhimurium and Staphylococcus aureusʺ, J. Applied Microbio., 2004, Vol. 96(5), 903-912). LAE представляет собой производное лауриновой кислоты, L-аргинина и этанола, и метаболизм LAE приводит к образованию L-аргинина, этанола и лауриновой кислоты, которые являются тремя обычными компонентами нормального пищевого рациона (см. Ruckman, S., et. al, ʺToxicological and metabolic investigations of the safety of N^α-lauroyl ethyl ester monohydrochloride (LAE)ʺ, Food and Chemical Toxicology, 2004, Vol. 42, 245-259).

[0039] Нейтральная, т.е. несолевая, форма LAE показана ниже:

Сложный этиловый эфир N^α-лауроил-L-аргинина (LAE)

[0040] LAE может образовывать как нейтральные, так и катионные соли. Используемый здесь термин "LAE" предназначен для охвата как соли, так и нейтральной формы соединения, если не указано иное.

[0041] В некоторых вариантах осуществления изобретения LAE представляет собой продукт пищевого класса, который пригоден для использования в качестве пищевой добавки. Он был признан FDA (Управлением по контролю за пищевыми продуктами и лекарствами правительства США) как безопасный, получив категорию GRAS, или FEMA GRAS (по классификации Intl. Flavor Manuf. Assoc.). В одном неограничивающем примере, LAE представляет собой катионную моногидрохлоридную соль. LAE является коммерчески доступным веществом, и он продается компанией Vedeqsa (Барселона, Испания) под торговым названием MIRINAT®-P/100.

[0042] LAE присутствует в композиции для ухода за полостью рта в количестве от 0,001 мас.% до 10 мас.%. В некоторых вариантах осуществления изобретения LAE присутствует в композиции для ухода за полостью рта в количестве от приблизительно 0,001 мас.% до приблизительно 5,0 мас.%, или от приблизительно 0,001 мас.% до приблизительно 2,0 мас.%. В другом варианте осуществления изобретения LAE присутствует в композиции для ухода за полостью рта в количестве от приблизительно 1,0 мас.% до приблизительно 2,0 мас.%. В других вариантах осуществления изобретения LAE присутствует в количествах менее 1 мас.%, например, LAE может присутствовать в композиции для ухода за полостью рта в количестве от приблизительно 0,01 мас.% до приблизительно 1 мас.%. В предпочтительном варианте осуществления изобретения LAE присутствует в композиции количестве от приблизительно 0,01 мас.% до 0,5 мас.%. Наиболее предпочтительно, когда LAE присутствует в композициях для ухода за полостью рта в количестве, достаточном для обеспечения синергетического массового соотношения МВЕ и LAE. В частности, LAE предпочтительно присутствует в композициях для ухода за полостью рта в комбинации с МВЕ в количестве, достаточном для того, чтобы привести к синергетическому ингибированию образования бактериями слюны биопленки зубного налета.

[0043] В различных вариантах осуществления изобретения композиции для ухода за полостью рта будут содержать от приблизительно 1 мг до приблизительно 20 мг LAE. В другом аспекте композиции для ухода за полостью рта будут содержать от приблизительно 1 мг до приблизительно 10 мг LAE.

Композиция для ухода за полостью рта

[0044] Композиции для ухода за полостью рта по изобретению, содержащие МВЕ и LAE, представлены в форме приемлемых пищевых продуктов или материала, приемлемого для использования с пищевыми продуктами, или вместе с носителем, в состав которых могут быть включены МВЕ и LAE, или они могут быть диспергированы в них без неблагоприятного эффекта. Композиция для ухода за полостью рта может представлять собой растворимое в воде твердое вещество или твердое вещество для жевания, такое как жевательная резинка (например: жевательные резинки в виде таблетки, жевательные резинки в виде пеллет, жевательные резинки в виде палочки, прессованные жевательные резинки, совместно экструдированные слоистые жевательные резинки, надуваемые жевательные резинки и т.п.), кондитерские изделия (например, мятные конфеты, твердые леденцы, жевательные конфеты, шоколад, желеобразные конфеты, кондитерские пасты и т.п.), или растворимые во рту таблетки, гранулы или пастилки. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция представляет собой кондитерскую композицию в форме покрытия, оболочки, пленки, сиропа или суспензии. Такие системы доставки хорошо известны специалистам в данной области техники, и приготовление их в целом включает перемешивание МВЕ и LAE в теплой основе с ароматизатором, некариогенными подсластителями и дополнительными органолептическими компонентами. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция для ухода за полостью рта может быть пригодна для употребления млекопитающими, не относящимися к людям, и может представлять собой, например, печенье для кормления животных.

[0045] Как обсуждалось выше в настоящем описании, композиции для ухода за полостью рта по изобретению предпочтительно содержат синергетическое массовое соотношение МВЕ и LAE. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое соотношение МВЕ и LAE предпочтительно является таким, чтобы композиция для ухода за полостью рта обеспечивала синергетическое ингибирование образования бактериями слюны биопленки налета в полости рта потребителя композиции. В таких вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE обычно присутствует в композиции для ухода за полостью рта в массовом соотношении от приблизительно 16:1 до приблизительно 4:1, включая диапазоны от приблизительно 16:1 до приблизительно 8:1 и от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1.

[0046] В некоторых вариантах осуществления изобретения синергетическое ингибирование биопленки налета, вызванное бактериями слюны в полости рта, может быть достигнуто за счет жевания композиции для ухода за полостью рта в течение по меньшей мере 10 минут, в том числе по меньшей мере 20 минут.

[0047] Одним из способов оценки эффективности LAE и МВЕ в отношении бактерий слюны является определение минимальной ингибирующей концентрации (MIC) Один подходящий способ определения MIC описан в патенте США US 770442, который включен в настоящее описание посредством ссылки. Вкратце, хлоргексидин используют в качестве положительного контроля, а в качестве отрицательного контроля используют стерильную воду. Метанол и Твин 80 используют в качестве растворителя для МВЕ. Твин 80 представляет собой общее название продукта Полисорбат 80. Для этого исследования используют 96-луночные планшеты для микротитрования. Каждая лунка содержит 5×10⁵ КОЕ/мл бактерий, серийно разбавленные агенты и среду для роста бактерий. Все бактериальные культуры инкубируют в стационарных условиях при 37°С. Рост бактерий оценивают спектрофотометрически при 660 нм через 48 часов инкубации. MIC для каждой тест-бактерии определяют как минимальную концентрацию испытуемого соединения, ограничивающую мутность до оптической плотности при 660 нм, составляющую менее 0,05.

[0048] Другой способ оценки эффективности LAE и МВЕ в отношении бактерий слюны заключается в определении минимальной бактерицидной концентрации (MBC). Один подходящий способ определения МВС описан в патенте США US 770442. Вкратце, МВС определяют, используя 96-луночный планшет для микротитрования, как описано выше для теста MIC. Выполняют серийные разведения культур в лунках, не имеющих видимого роста, и 10 мкл культуры высевают трижды на чашки с кровяным агаром. Жизнеспособные колонии подсчитывают после инкубации чашек в течение 48 часов при 37°C. Для каждой испытуемой бактерии определяют количество колониеобразующих единиц (КОЕ) в одном миллилитре исходного инокулята. МВС определяют как самую низкую концентрацию испытуемого соединения, которая вызывает гибель по меньшей мере 99,9% клеток, присутствующих в исходном инокуляте.

Жевательные резинки

[0049] В одном варианте осуществления изобретения композиция для ухода за полостью рта представляет собой жевательную резинку. Жевательная резинка может содержать МВЕ и LAE в любом из указанных здесь количеств или в любых указанных массовых соотношениях. В некоторых вариантах осуществления изобретения жевательная резинка содержит МВЕ и LAE в количествах, таких, что жевательная резинка обеспечивает синергетическое ингибирование образования бактериями слюны биопленки налета. В таких вариантах осуществления изобретения MBE и LAE предпочтительно присутствуют в жевательной резинке в массовом соотношении от приблизительно 16:1 до приблизительно до 4:1.

[0050] Продукты в виде жевательной резинки по изобретению могут быть получены с использованием множества различных композиций, которые обычно используются в составах жевательной резинки. Подходящие физические формы продуктов в виде жевательной резинки включают палочки, таблетки, куски, твердые шарики, полые шарики, пеллеты, пластовые продуты и тому подобное. Хотя конкретные ингредиенты для каждой формы продукта будут изменяться от продукта к продукту, конкретные ингредиенты и способы их переработки хорошо известны специалистам в данной области техники. Обычно композиция жевательной резинки обычно содержит нерастворимую в воде часть из основы жевательной резинки, а водорастворимая объемная часть включает растворимые в воде наполнители (т.е. сахара, полиолы) и другие растворимые в воде компоненты, и, возможно, другие активные ингредиенты, которые обычно не растворимы в воде. Водорастворимая часть расходуется вместе с частью ароматизатора во время жевания. Часть из основы жевательной резинки сохраняется во рту в течение всего процесса жевания.

[0051] Жевательная резинка может содержать основу жевательной резинки в количестве от приблизительно 5 мас.% до приблизительно 95 мас.% от массы всей жевательной резинки. Как правило, нерастворимая основа жевательной резинки может составлять от приблизительно 10 мас.% до приблизительно 50 мас.%, или от приблизительно 20 мас.% до приблизительно 40 мас.%. Настоящее изобретение предусматривает использование любой коммерчески приемлемой основы жевательной резинки.

[0052] В целом, нерастворимая основа жевательной резинки может содержать эластомеры, растворители эластомеров, пластификаторы, воски, эмульгаторы и неорганические наполнители. Также могут быть включены пластичные полимеры, такие как поливинилацетат, которые ведут себя в некоторой степени как пластификаторы. Другие синтетические полимеры, которые могут быть использованы, включают поливиниллаурат, поливиниловый спирт и поливинилпирролидон. Основа жевательной резинки может составлять как минимум 5 мас.% или как максимум 95 мас.%, или более типично от 20 мас.% до 40 мас.% от массы всей композиции жевательной резинки.

[0053] Эластомеры обеспечивают каучукоподобную текстуру, характерную для жевательной резинки. Эластомеры обычно составляют от приблизительно 5 мас.% до приблизительно 25 мас.% основы жевательной резинки. Синтетические эластомеры могут включать, но без ограничения, полиизобутилен, бутилкаучук (изобутилен-изопреновый сополимер), сополимеры стирола (имеющие, например, соотношение стирол:бутадиен от приблизительно 1:3 до приблизительно 3:1), полиизопрен, полиэтилен, сополимер винилацетата и виниллаурата, а также их комбинации.

[0054] Природные эластомеры могут включать, например, натуральные каучуки, такие как копченый или жидкий латекс, и латекс из гваюлы, а также натуральные растительные смолы, такие как чикл (chicle), джелутонг (jelutong), лечи каспи (lechi caspi), перилло (perillo), сорва (sorva), массарандуба балата (massaranduba balata), массарандуба шоколадная (massaranduba chocolate), нисперо (nispero), розиндинга (rosindinha), гуттаперча (gutta hang kang) и их смеси. Предпочтительные эластомеры будут зависеть, например, от того, будет ли жевательная резинка, в которой используется основа, липкой или обычной, будет ли она синтетической или натуральной, надуваемой жевательной резинкой или обычной жевательной резинкой. Эластомеры придают каучукоподобную текстуру, характерную для жевательной резинки.

[0055] Растворители эластомеров, которые иногда называют эластомерными пластификаторами, включают, без ограничения, природные сложные эфиры канифоли, такие как сложные эфиры с глицерином, или частично гидрированную канифоль, глицериновые эфиры полимеризованной канифоли, глицериновые эфиры частично димеризованной канифоли, глицериновые эфиры канифоли, пентаэритритные эфиры частично гидрированной канифоли, метиловые эфиры канифоли и метиловые эфиры частично гидрированной канифоли, сложные пентаэритритные эфиры канифоли, синтетические материалы, такие как терпеновые смолы, полилимонен и другие политерпены, и/или любую подходящую комбинацию вышеуказанных веществ. Растворители эластомеров обычно используют в количестве 5-30 мас.% от массы основы жевательной резинки.

[0056] Пластификаторы основы жевательной резинки иногда называют умягчителями. Как правило, они включают жиры и масла, а также воски. Жиры и масла обычно представляют собой растительные масла, которые обычно частично или полностью гидрогенизируют для увеличения их температуры плавления. Растительные масла, пригодные для такого использования, включают масла из семян хлопчатника, соевое масло, пальмовое масло (включая пальмоядерное масло), кокосовое масло, масло ши, касторовое масло, арахисовое масло, кукурузное масло, рапсовое масло, масло канолы, подсолнечное масло, масло какао и другие. Также могут быть использованы животные жиры, такие как молочный жир, животный жир и лярд. Обычно используемые воски включают парафин, микрокристаллические и природные воски, такие как пчелиный воск и карнаубский воск. Пластификаторы обычно используют в количестве от 5 мас.% до 40 мас.% от массы основы жевательной резинки.

[0057] Основы жевательной резинки обычно содержат необязательные добавки, такие как антиоксиданты и красители, которые выполняют свои обычные функции. В основу жевательной резинки необязательно могут быть добавлены ароматизаторы и подсластители. Эти добавки, если их применяют, обычно используют в количествах на уровне приблизительно 1 мас.% или менее от массы основы жевательной резинки.

[0058] Жевательная резинка и/или основа жевательной резинки также может включать наполнитель. Компонент наполнителя обычно представляет собой неорганический порошок, такой как карбонат кальция, измельченный известняк, карбонат магния, тальк, силикаты, такие как силикат алюминия и магния, дикальцийфосфат, трикальцийфосфат, целлюлозные полимеры, такие как древесина, их комбинации и тому подобное. Наполнитель может составлять от 5 мас.% до 50 мас.% от массы жевательной резинки.

[0059] Обычно используемые эмульгаторы включают моно- и диглицериды, такие как моностеарат глицерина, лецитин, триацетат глицерина, моностеарат глицерина, ацетилированные моноглицериды, жирные кислоты и их комбинации. Эмульгаторы обычно используют в количестве от 1 мас.% до 10 мас.% от массы жевательной резинки.

[0060] Водорастворимая часть жевательной резинки может содержать умягчители, подсластители, ароматизирующие вещества и их комбинации, а также другие необязательные ингредиенты. Например, большая часть водорастворимой части жевательной резинки будет, как правило, содержать водорастворимый порошкообразный углевод, который служит в качестве наполнителя. В сладких жевательных резинках он чаще всего представляет собой сахарозу, хотя другие сахара, такие как фруктоза, эритроза, декстроза (глюкоза), левулоза, тагатоза, галактоза, трегалоза, твердые кукурузные патоки/сиропы и тому подобное, также можно использовать по отдельности или в любой комбинации.

[0061] Как правило, в несладких жевательных резинках в качестве наполнителей используют сахарные спирты (также называемые альдитами, полиолами или многоатомными спиртами) благодаря их преимуществам из-за низкой кариесогенности, сниженной калорийности и сниженных гликемических показателей. Такие сахарные спирты включают сорбит, маннит, ксилит, гидрированную изомальтулозу, мальтит, эритрит, гидрированные твердые продукты гидролиза крахмала и тому подобное, используемые по отдельности или в любой комбинации. Сахариды с более длинной цепью, такие как полидекстроза и фруктоолигосахариды, иногда используют для снижения калорийных свойств жевательной резинки и для других преимуществ для здоровья. Наполнители обычно составляют от приблизительно 5 мас.% до приблизительно 95 мас.% от массы композиции жевательной резинки.

[0062] Умягчители, также известные в данной области как пластификаторы или пластифицирующие агенты, обычно составляют от приблизительно 0,5 мас.% до приблизительно 15 мас.% от массы всей жевательной резинки. Они включают глицерин, растворы пропиленгликоля и водные подсластители (сиропы) Примеры сиропов включают кукурузные и глюкозные сиропы, которые обычно получают из гидролизованного крахмала. Для несладких продуктов гидролизат крахмала может быть подвергнут гидрогенизации, с получением ингредиента, известного как сиропы гидрированного гидролизата крахмала или сиропы мальтита.

[0063] В случае несладких жевательных резинок желательно добавлять сильные подсластители для компенсации сниженного сладкого вкуса, что является результатом замены сахарозы в сладких резинках на сахарные спирты. Сильные подсластители могут быть определены как приемлемые пищевые соединения, которые по меньшей мере в двадцать раз слаще сахарозы. Обычно используемые сильные подсластители включают, но без ограничения, аспартам, сукралозу, ацесульфам-К, сахарин, тауматин, алитам, неотам и цикламат, а также природные или растительные подсластители, такие как перилла, стевия, монатин, монеллин и халконы.

[0064] Используемые количества сильных подсластителей могут варьировать в широких пределах в зависимости от активности подсластителя, предпочтений местного рынка, вкуса и регулирующих нормативов. Типичные уровни могут находиться в интервале от приблизительно 0,01 мас.% до приблизительно 5 мас.%, хотя некоторые варианты могут потребовать использования подсластителей вне этого диапазона. Эти подсластители могут быть объединены вместе, или использоваться с низкоактивными подсластителями в различных количествах для придания всей композиции желаемой сладости.

[0065] Для придания жевательным резинкам характерного аромата и вкуса могут быть использованы ароматизаторы. Эти ароматизаторы могут быть натуральными или искусственными (синтетическими) по своему происхождению, или представлять комбинацию обоих видов. Хотя перечень ароматизаторов и их комбинации, используемые в жевательных резинках, практически не ограничены, они обычно включают фруктовый ароматизатор, такой как лимон, апельсин, лайм, грейпфрут, мандарин, клубника, яблоко, вишня, малина, малина, ежевика, черника, банан, ананас, мускусная дыня, сетчатая дыня, арбуз, виноград, смородина, манго, киви и многие другие, а также их комбинации. Мятные ароматизаторы включают мяту кудрявую, мяту перечную, гаультерию, базилик, мяту полевую, ментол и другие, а также их смеси. Пряные ароматизаторы включают корицу, ваниль, гвоздику, шоколад, мускатный орех, кофе, лакрицу, эвкалипт, имбирь, кардамон и многие другие. Кроме того, используют растительные и острые ароматизаторы, такие как попкорн, чили, кукурузные чипсы и тому подобное. Ароматизаторы обычно используют в количествах от 0,1 мас.% до 10 мас.% от всей массы жевательной резинки.

[0066] В жевательной резинке (как и в любых композициях для ухода за полостью рта) настоящего изобретения могут использоваться различные соединения, вызывающие те или иные ощущения, или органолептические компоненты. Как правило, такие компоненты могут быть любыми соединениями, которые вызывают чувство прохлады, нагрева, тепла, вызывают слюноотделение, покалывание или чувство онемения, например, во рту или на коже.

[0067] Органолептические компоненты необязательно выбирают из группы, состоящей из ароматизирующего вещества, агента, вызывающего чувство прохлады, агента, вызывающего чувство тепла, агента, вызывающего вкусовое ощущение во рту, агента, вызывающего чувство покалывания, подсластителя, агента, вызывающего кислый привкус, агента, вызывающего слюноотделение, агента, вызывающего горький привкус, агента для отбеливания зубов, агента против кариеса, агента, освежающего дыхание, агента, вызывающего звуки, и их комбинаций. Они хорошо известны в данной области, и их выбирают на основе желаемого профиля и назначения жевательной резинки или композиции для ухода за полостью рта.

[0068] Агенты, вызывающие чувство прохлады, охватывают множество агентов, вызывающих физиологическое ощущение прохлады, но не включают традиционные производные ароматизаторов, таких как ментол или ментон. Предпочтительно, когда агенты, вызывающие чувство прохлады, обеспечивают этот эффект без придания продукту ощутимого вкуса. Агенты, вызывающие чувство прохлады, воспринимаются как охлаждающие или холодные при контакте с телом человека и, в частности, со слизистыми оболочками рта, носа и горла. Агенты, вызывающие чувство прохлады, могут быть природными или синтетическими химическими веществами, используемыми для придания ощущения прохлады с минимальным ароматом. Обычно применяемые агенты, вызывающие чувство прохлады, включают этил-п-ментанкарбоксамид и другие N-замещенные карбоксамиды п-ментана, N,2,3-триметил-2-изопропилбутанамид и другие ациклические карбоксамиды, ментилглутарат, 3-1-ментоксипропан-1,2-диол, изопулегол, ментилсукцинат, ментол-пропиленгликолькарбонат, этиленгликолькарбонат, ментиллактат, ментилглутарат, п-ментан-1,8-диол, сложный ментол-глицериловый эфир, N-трет-бутил-п-ментан-3-карбоксамид, простой глицериновый эфир п-ментан-3-карбоновой кислоты, метил-2-изопропил-бицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксамид, сложный ментол метиловый эфир и другие, а также их комбинации.

[0069] В жевательных резинках по настоящему изобретению могут быть использованы другие стимуляторы тройничного нерва, отличные от агентов, вызывающие чувство прохлады. Они включают агенты, вызывающие чувство тепла, такие как капсаицин, эфирное масло стручкового перца, эфирное масло красного перца, эфирное масло горького черного перца, пиперин, эфирное масло имбиря, гингерол, шоагол, эфирное масло корицы, эфирное масло кассии, коричный альдегид, эвгенол, циклический ацеталь ванилина, сложный ментол-глицериновый эфир и ненасыщенные амиды, а также агенты, вызывающие ощущение покалывания, такие как экстракт джамбу, сложные ваниллилалкиловые эфиры, такие как сложный ваниллил н-бутиловый эфир, спилантол, экстракт эхинацеи и экстракт североамериканского колючего ясеня.

[0070] Жевательная резинка, как правило, обладает рядом преимуществ для ухода за полостью рта. В дополнение к механической очистке зубов, обеспечиваемых жевательным действием, слюна, стимулированная жеванием, а также аромат и вкус продукта придают дополнительные полезные свойства, такие как уменьшение неприятного запаха изо рта, нейтрализация кислоты и т.п.

[0071] Жевательные резинки настоящего изобретения могут обеспечить эти преимущества наряду с преимуществами, описанными в настоящей заявке, и они могут также использоваться в качестве носителей для доставки специализированных агентов для ухода за полостью рта. Например, могут быть использованы агенты, освежающие дыхание, которые включают соли цинка, соли меди, полифенолы, экстракты грибов и их смеси. Также могут быть использованы ароматизаторы, маскирующие запах изо рта, такие как корица, мята, гаультерия (винтергрин), фруктовые ароматизаторы и их смеси. Также могут быть использованы и другие активные в отношении зубов вещества, например, отбеливатели зубов, фторид, удаляющие пятна вещества, соли кальция, фосфатные соли и их смеси.

[0072] Жевательные резинки по изобретению могут быть использованы для доставки биологически активных агентов лицу, употребляющему жевательную резинку. Биологически активные агенты включают витамины, минералы, антиоксиданты, пищевые добавки, добавки к рациону питания, функциональные пищевые ингредиенты (например, пробиотики, пребиотики, ликопен, фитостеролы, сложные эфиры станола/стерола, омега-3 жирные кислоты, аденозин, лютеин, зеаксантин, экстракт виноградных косточек, гинко билоба и тому подобное), биологически активные добавки (БАД) и лекарственные средства, отпускаемые по рецептам, вакцины и пищевые добавки.

[0073] Может оказаться желательным предпринять определенные усилия для увеличения или уменьшения скорости высвобождения активных веществ или других ингредиентов (например, подсластителей, ароматизаторов) или для обеспечения высвобождения по меньшей мере их минимальных количеств. С этой целью могут быть использованы такие приемы, как инкапсулирование, изоляция активного вещества, а также могут быть предприняты меры по увеличению или уменьшению взаимодействий активных веществ и ингредиентов. Эти приемы хорошо известны специалистам в данной области техники.

[0074] В целом, в качестве неограничивающего примера, жевательную резинку получают путем одновременного или последовательного добавления различных ингредиентов жевательной резинки в коммерчески доступный смеситель, который известен в данной области. После тщательного перемешивания ингредиентов, массу жевательной резинки выгружают из смесителя и формуют в желаемую форму, такую как раскатные листы, и затем режут на палочки, экструдируют в виде порционных кусков или отливают в пеллеты, на которые потом наносят покрытие или подвергают дражированию.

[0075] LAE и МВЕ могут быть включены одновременно или последовательно в центральную часть жевательной резинки и/или в покрытие жевательной резинки. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения LAE и MBE объединяют и затем вводят в центральный слой жевательной резинки, или вводят в виде начинки в центр, используя любой подходящий способ, известный в данной области техники. В некоторых вариантах осуществления изобретения LAE и MBE объединяют и затем вводят в покрытие жевательной резинки с использованием любого подходящего способа, известного в данной области, например, таким, который описан здесь.

[0076] В другом варианте осуществления изобретения LAE вводят в центральную часть жевательной резинки, а МВЕ включают в состав покрытия жевательной резинки. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения, LAE вводят в центральный слой жевательной резинки или заполняют им жевательную резинку как начинкой, используя любой подходящий способ, известный в данной области техники, тогда как МВЕ вводят в сироп для покрытия или в ароматизаторе покрытия, как описано ниже.

[0077] В другом варианте осуществления изобретения МВЕ вводят в центральную часть жевательной резинки, а LAE вводят в покрытие жевательной резинку. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения, МВЕ включают в центральный слой жевательной резинки или заполняют центральную часть резинки, используя любой подходящий способ, известный в данной области техники, в то время как LAE вводят в сироп для покрытия или в ароматизатор покрытия, как описано ниже.

[0078] Жевательные резинки по изобретению также могут включать покрытие. Пеллеты или шарики резинки получают как обычную жевательную резинку, которая имеет форму пеллет или шариков. Затем на пеллеты/шарики может быть нанесено покрытие, или они могут быть покрыты путем дражирования с помощью обычных методик нанесения покрытия, с получением уникальной жевательной резинки в форме отдельных пеллет с покрытием.

[0079] Обычные процедуры дражирования, как правило, предусматривают покрытие сахарами и другими полиолами, включая, без ограничения, сахарозу, декстрозу, мальтозу, палатинозу, ксилит, лактит, мальтит, гидрогенизированную изомальтулозу и другие альдиты, или их комбинацию. Эти материалы могут быть смешаны с модификаторами для дражирования, включая, без ограничения, аравийскую камедь, мальтодекстрины, кукурузный сироп, желатин, материалы типа целлюлозы, такие как карбоксиметилцеллюлоза или гидроксиметилцеллюлоза, крахмал и модифицированные крахмалы, нерастворимые карбонаты, такие как карбонат кальция или карбонат магния, и тальк. Антиадгезивные агенты также могут быть добавлены в качестве модификаторов дражирования, которые позволяют использовать различные углеводы и сахарные спирты для новых жевательных продуктов с покрытием или с покрытием, нанесенным методом дражирования. В покрытие с МВЕ и/или LAE также могут быть добавлены ароматизаторы, подсластители и другие органолептические компоненты, обеспечивающие получение продукта с уникальными характеристиками.

[0080] МВЕ и LAE можно просто добавлять в сироп для покрытия или в раствор для покрытия, который используется при нанесении покрытия методом дражирования. В другом варианте осуществления изобретения MBE и LAE могут быть использованы в виде порошка как отдельные ингредиенты или в виде смеси с другими компонентами, используемыми в традиционных методах дражирования. В некоторых вариантах осуществления изобретения каждый из МВЕ и LAE независимо составляет от 0,001 мас.% до 5 мас.% от всей массы покрытия. В некоторых вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE независимо друг от друга присутствуют в покрытии в количестве от приблизительно 0,001 мас.% до приблизительно 5,0 мас.% или от приблизительно 0,001 мас.% до приблизительно 2,0 мас.%. В другом варианте осуществления изобретения МВЕ и LAE присутствуют в покрытии в количестве от приблизительно 1,0 мас.% до приблизительно 2,0 мас.%. В других предпочтительных вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE присутствуют в покрытии в количествах менее 1 мас.%, например, они могут присутствовать в покрытии в количестве от приблизительно 0,01 мас.% до приблизительно 1 мас.%.

[0081] В некоторых аспектах настоящего изобретения МВЕ и LAE присутствуют в покрытии композиции для ухода за полостью рта в таком количестве, что композиция для ухода за полостью рта обеспечивает синергетическое ингибирование образования бактериями слюны биопленки налета в полости рта потребителя композиции для ухода за полостью рта. В таких вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE предпочтительно присутствуют в покрытии композиция для ухода за полостью рта в массовом соотношении от приблизительно 16:1 до приблизительно 4:1, включая диапазоны от приблизительно 16:1 до приблизительно 8:1 и от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1.

Конфеты/кондитерские изделия

[0082] Как обсуждалось выше, композиции для ухода за полостью рта настоящего изобретения альтернативно могут быть представлены в форме кондитерского изделия, включая, например, мятные конфеты, твердые конфеты, жевательные конфеты, жевательные конфеты с покрытием, таблетированные конфеты, шоколад, нугу, кондитерские пасты и тому подобное. Эти конфеты или кондитерские изделия могут содержать любые компоненты из числа различных сахаров и подсластителей, ароматизирующих веществ и/или красителей, а также другие компоненты, известные в данной области техники и/или указанные выше при обсуждении жевательных резинок. Кроме того, эти конфеты или кондитерские изделия могут быть получены с использованием методов и условий их выполнения, известных в данной области техники. Конфеты или кондитерские продукты могут включать МВЕ и LAE в любом из указанных здесь количеств. В одном конкретном варианте осуществления изобретения конфеты или кондитерские изделия могут содержать до приблизительно 1,0 мас.% МВЕ и приблизительно 2,0 мас.% LAE.

[0083] Предпочтительно, когда конфета или кондитерское изделие содержит МВЕ и LAE в таких количествах, что конфета или кондитерский продукт обеспечивают синергетическое ингибирование образования бактериями слюны биопленки налета в полости рта потребителя композиции для ухода за полостью рта. В таких вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE предпочтительно присутствует в конфете или в кондитерском изделии в массовом соотношении от приблизительно 16:1 до приблизительно 4:1, включая от приблизительно 16:1 до приблизительно 8:1 или от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1.

[0084] В качестве неограничивающего примера можно представить твердую карамель, которая может главным образом состоять из кукурузного сиропа и сахара, которая, в соответствии со своим названием, содержит влагу в количестве от 1,0% до 4% по массе. По внешнему виду этот тип конфет являются твердым, но в действительности такие конфеты представляют собой переохлажденную жидкость, которая находится в состоянии, существенно ниже ее точки плавления. Существуют различные типы твердой карамели. Карамель стеклообразного типа обычно прозрачная, или ее изготавливают непрозрачной за счет использования красителей; волокнистые типы карамели всегда являются непрозрачными из-за захваченного воздуха и/или влаги.

[0085] Для иллюстративных целей следует отметить, что непрерывный способ изготовления леденцов стеклообразного типа на основе сахара можно в целом выполнить следующим образом. Смесь сахарного сиропа с сахаром загружают в барабан, нагреваемый паром высокого давления. Быстрый массообмен вызывает испарение воды в сиропе. В полученный сироп добавляют красители и ароматизаторы, и полученный сироп выгружают. Он может подаваться непосредственно в загрузочные устройства, из которых сироп подают непосредственно в формы. Леденцы можно получать из сиропа в катальной машине, где формуют заготовку с заданной формой и размерами. Затем заготовку для леденцов направляют в формующее устройство, где из нее окончательно формуют отдельные конфеты в виде дисков, шариков, цилиндров и т.п. Леденцы по изобретению могут быть изготовлены любой формы, например, в виде дисков, квадратиков, треугольников и т.п., а также в форме животных или в виде любой другой новой формы. Затем полученную конфету-леденец охлаждают, завертывают и упаковывают.

[0086] Леденцы волокнистого типа, где вода и сахар являются основными компонентами, которые смешаны с другими ингредиентами, варка сиропа при высоких температурах (от 290°F до 310°F; или от 143°С до 154°С) приводит к тому, что вода переходит в пар. Продукт переносят в охлаждающий барабан в количестве приблизительно 150 фунтов (68 кг), помещают в вытяжную машину для аэрации продукта и в смесь добавляют ароматизатор. Затем продукт переносят в катальную машину, где ему придают форму и размер. После этого заготовку для конфет подают в формующее устройство, где из нее окончательно формуют отдельные конфеты. Леденцы охлаждают при относительной влажности 35% и подают во вращающийся барабан, где их покрывают измельченным сахаром. Затем леденцы подают в камеру для кристаллизации, где поддерживается температура 90°F (32°С) и влажность 60%. Захваченный воздух и влага вызывают образование продукта с текстурированным/наполненным видом. МВЕ и LAE могут быть добавлены в любой подходящей точке процесса производства, но обычно это выполняют во время добавления ароматизаторов.

Пастилки, гранулы и таблетки

[0087] В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция для ухода за полостью рта может представлять собой пастилку, гранулу или таблетку. Пастилка, гранула или таблетка могут включать МВЕ и LAE в любом из указанных здесь количеств. В одном варианте осуществления изобретения, пастилка, гранула или таблетка может содержать до приблизительно 1,0 мас.% MBE и приблизительно 2,0 мас.% LAE.

[0088] В одном конкретном варианте осуществления изобретения, пастилка, гранула или таблетка содержит МВЕ и LAE в таких количествах, что пастилка, гранула или таблетка обеспечивает синергетическое ингибирование образования бактериями слюны биопленки в полости рта потребителя. В таких вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE предпочтительно представлены в массовом соотношении от приблизительно 16:1 до приблизительно 4:1.

[0089] Перорально приемлемый носитель или наполнитель, используемый для формирования пастилки, гранулы или таблетки, обычно является некариогенным твердым водорастворимым многоатомным спиртом (полиолом), например, без ограничения, таким как маннит, ксилит, сорбит, мальтит, эритрит, гидрированный гидролизат крахмала (HSH), гидрированная глюкоза, гидрированные дисахариды или гидрированные полисахариды, присутствует в количестве от приблизительно 85% до приблизительно 95% от общей массы композиции. Эмульгаторы, например, глицерин, и смазывающие вещества, применяемые при таблетировании, могут быть введены в пастилки, гранулы или таблетки в незначительных количествах, составляющих от приблизительно 0,1 мас.% до мас.5%, для облегчения изготовления пастилок, гранул или таблеток. Подходящие смазывающие вещества включают растительные масла, такие как, но без ограничения, кокосовое масло, стеарат магния, стеарат алюминия, тальк, крахмал и полиэтиленгликоли. Подходящие некариогенные смолы включают каппа-каррагинан, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу и подобное.

[0090] Пастилка, гранула или таблетка необязательно могут быть покрыты оболочкой из материала для покрытия, такого как воски, шеллак, карбоксиметилцеллюлоза, сополимер полиэтилена/малеинового ангидрида или каппа-каррагинаном для дополнительного увеличения времени растворения таблетки или пастилки в полости рта. Таблетки или пастилки без покрытия является медленно растворяющимися, обеспечивая постоянную скорость высвобождения активных ингредиентов в течение приблизительно от 3 до 5 минут. Соответственно, твердая таблетка, гранула и пастилки с дозой композиции по этому варианту осуществления изобретения имеют относительно более длительный период времени контакта МВЕ и LAE с полостью рта.

[0091] В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция для ухода за полостью рта представляет собой пастилку. Пастилка может содержать ядро в виде жидкости, порошка, сиропа, суспензии, помадки, ириса или шоколада, содержащее LAE, и покрытие, такое как описано здесь, содержащее МВЕ. В другом варианте осуществления изобретения пастилки могут содержать ядро, содержащее МВЕ, и покрытие, описанное здесь, содержащее LAE.

[0092] В другом варианте осуществления изобретения МВЕ и LAE вместе включены в состав покрытия пастилки. Подходящие количества МВЕ и LAE для включения в покрытие включают те, которые указаны выше для покрытий жевательных резинок. В еще одном варианте осуществления изобретения МВЕ и LAE вместе включены в состав ядра пастилки. Способ выполнения таких вариантов изобретения хорошо известен в данной области.

Продукты для животных

[0093] В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция для ухода за полостью рта может быть пригодна для употребления млекопитающими, не относящимся к людям, и может представлять собой, например, продукт для употребления животными (например, печенье).

[0094] Кормовые продукты и добавки для животных хорошо известны в данной области, и их предпочтительно изготавливают с любым подходящим тестом. Тесто для кормовой добавки обычно содержит по меньшей мере одно из муки или муки крупного помола, а также жир, воду и, необязательно, белок в виде дисперсных частиц (для текстурирования) и ароматизатор. Например, когда желаемым продуктом является печенье, может быть использовано обычное тесто, необязательно содержащих отдельные частицы мяса и/или мясных побочных продуктов или отходов мучного производства. Примеры подходящего теста для получения твердого печенья и мягкого печенья (включающего увлажнитель для контроля содержания воды) для животных описаны в патентах США US 5405836, US 5000943, US 4454163 и US 4454164, при этом содержание каждого из них включено в настоящее описание посредством ссылки. Такие композиции предпочтительно выпекают. MBE и LAE могут быть добавлены вместе с ароматизатором, включенным во внутреннюю полость в центре мягкого продукта, или их наносят на поверхность выпеченного кормовой добавки путем погружения или распыления. Предпочтительно, чтобы продукт для животных содержал МВЕ и LAE в таких количествах, что бы продукт для животных обеспечивал синергетическое ингибирование образования бактериями слюны биопленки зубного налета. В одном варианте осуществления изобретения МВЕ и LAE присутствуют в массовом соотношении от приблизительно 16:1 до приблизительно 4:1, включая интервал от приблизительно 16:1 до приблизительно 8:1 или от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1. Также может быть использовано любое другое подходящее средство, известное специалисту в данной области для доставки активных ингредиентов животным.

Способ получения

[0095] В дополнение к вышеуказанным преимуществам композиций для ухода за полостью рта, содержащих МВЕ и LAE, также неожиданно было обнаружено, что включение LAE в композицию для ухода за полостью рта в комбинации с МВЕ улучшает эффективность нагрузки МВЕ в композиции для ухода за полостью рта, а также скорость высвобождения МВЕ из композиции для ухода за полостью рта, по сравнению с композициями для ухода за полостью рта, содержащими только МВЕ. Этот эффект дополнительно усиливается, когда МВЕ и LAE предварительно обрабатывают перед введением их в композицию для ухода за полостью рта. В частности, считается, что эффективность нагрузки и скорость высвобождения МВЕ из жевательной резинки может быть увеличена по меньшей мере на 20%, и обычно по меньшей мере на 33%, когда МВЕ и LAE предварительно обрабатывают перед введением в композицию для ухода за полостью рта. В частности, в некоторых вариантах осуществления изобретения предварительная обработка путем просеивания и/или путем ультразвуковой обработки приводит к тому, что эффективность нагрузки составляет по меньшей мере 80%, и предпочтительно по меньшей мере 90% для обычных жевательных резинок.

[0096] В некоторых вариантах осуществления изобретения по меньшей мере 60%, а предпочтительно по меньшей мере 80% МВЕ, присутствующего в композиции для ухода за полостью рта, высвобождается в полости рта потребителя после жевания композиции в течение по меньшей мере 10 минут или по меньшей мере 20 минут. В некоторых вариантах осуществления изобретения по меньшей мере 60%, и, предпочтительно, по меньшей мере 90% LAE, присутствующего в композиции для ухода за полостью рта, высвобождается в полости рта потребителя после жевания композиции для ухода за полостью рта в течение по меньшей мере 10 минут или по меньшей мере 20 минут.

[0097] Таким образом, в одном конкретном предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение направлено на способ получения композиции для ухода за полостью рта с покрытием. Способ включает предварительную обработку МВЕ и LAE с образованием предварительной смеси, добавление предварительной смеси к сиропу для покрытия, и нанесение сиропа для покрытия на композицию для ухода за полостью рта, с получением композиции для ухода за полостью рта с покрытием. МВЕ и LAE могут быть подвергнуты предварительной обработке путем просеивания МВЕ и LAE перед добавлением к сиропу для покрытия; обработке ультразвуком МВЕ и LAE перед добавлением к сиропу для покрытия; смешиванию МВЕ и LAE с одним или более органолептическими компонентами перед добавлением к сиропу для покрытия; предварительному растворению MBE и LAE в ароматизирующем веществе, глицерине и/или масле среднецепочечного триглицерида (МСТ), или они могут быть подвергнуты комбинации перечисленных обработок.

[0098] В других вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу получения композиции жевательной резинки. Способ включает предварительную обработку МВЕ и LAE с образованием предварительной смеси и получение композиции жевательной резинки из предварительно полученной смеси. МВЕ и LAE могут быть подвергнуты предварительной обработке путем просеивания МВЕ и LAE перед добавлением к сиропу для покрытия; обработке ультразвуком МВЕ и LAE; смешиванию МВЕ и LAE с порошкообразной основой жевательной резинки; предварительному растворению MBE и LAE в ароматизирующем веществе, глицерине и/или масле среднецепочечного триглицерида (МСТ), или они могут быть подвергнуты комбинации перечисленных обработок.

[0099] В некоторых вариантах осуществления изобретения количество МВЕ и LAE, включенное в предварительную смесь, является достаточным для обеспечения синергетического ингибирования образования бактериями слюны биопленки налета в полости рта потребителя композиции для ухода за полостью рта. В конкретных вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE добавляют в предварительную смесь в весовом соотношении от приблизительно 16:1 до приблизительно 4:1, включая от приблизительно 16:1 до приблизительно 8:1 или от приблизительно 8:1 до приблизительно 4:1.

[00100] В некоторых вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE подвергают предварительной обработке путем смешивания МВЕ и LAE с одним или более органолептическими компонентами до добавления в композицию для ухода за полостью рта. В конкретных вариантах осуществления изобретения предварительную смесь добавляют в сироп для покрытия и его наносят на композицию для ухода за полостью рта. Подходящие органолептические компоненты включают, без ограничения, ароматизирующее вещество, агент, вызывающий чувство прохлады, агент, вызывающий чувство тепла, агент, вызывающий вкусовое ощущение во рту, агент, вызывающий чувство покалывания, подсластитель, агент, вызывающий кислый привкус, агент, вызывающий слюноотделение, агент, вызывающего горький привкус, агент для отбеливания зубов, агент против кариеса, агент, освежающий дыхание, агент, вызывающий звуки, и их комбинации. В других вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE предварительно обрабатывают путем смешивания МВЕ и LAE с порошкообразной основой жевательной резинки перед добавлением в композицию жевательной резинки (например, в композицию прессованной жевательной резинки). В других вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE подвергают предварительной обработке путем предварительного растворения МВЕ и LAE в ароматизирующем веществе, глицерине и/или масле среднецепочечного триглицерида (МСТ) до добавления к композиции жевательной резинки.

[00101] В некоторых вариантах осуществления изобретения МВЕ и LAE объединяют и просеивают, обрабатывают ультразвуком или подвергают обоим видам обработки перед смешиванием с одним или более органолептическими компонентами или с порошкообразной основой жевательной резинки. В другом варианте осуществления изобретения МВЕ и LAE смешивают с органолептическими компонентами или порошкообразной основой жевательной резинки, и затем полученную смесь просеивают, обрабатывают ультразвуком или подвергают обоим видам обработки. Предпочтительно, когда смесь МВЕ и LAE просеивают, затем обрабатывают ультразвуком до смешивания с органолептическими компонентами или порошкообразной основой жевательной резинки.

[00102] Любая композиция для ухода за полостью рта, описанная в настоящем документе, может быть изготовлена с использованием описанных здесь способов. В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения композиция для ухода за полостью рта, полученная в соответствии с раскрытым способом, представляет собой продукт, выбранный из группы, состоящей из жевательных резинок, кондитерских изделий, мятных конфет, таблеток, гранул и пастилок. Предпочтительно, когда композиция для ухода за полостью рта представляет собой жевательную резинку или мятную конфету. Более предпочтительно, когда композиция для ухода за полостью рта представляет собой жевательную резинку, такую как жевательная резинка с покрытием, жевательная резинка с начинкой в центре или жевательная резинка с начинкой и с покрытием. Предпочтительно, когда жевательная резинка представляет собой жевательную резинку с покрытием.

Способы применения

[00103] Как обсуждалось здесь выше, неожиданно было обнаружено, что МВЕ в сочетании с LAE является синергетически эффективным средством при ингибировании образования бактериями слюны биопленки налета. Таким образом, эта комбинация значительно улучшает и облегчает ингибирование образования бактериями слюны биопленки налета в полости рта потребителя. Введение комбинации эффективного количества МВЕ и LAE в композицию для ухода за полостью рта может, таким образом, предоставить композицию для ухода за полостью рта, которая ингибирует образование бактериями слюны биопленки налета. Композиции для ухода за полостью рта настоящего изобретения также могут быть эффективны для использования при удалении существующего налета.

[00104] Таким образом, в другом аспекте настоящее изобретение направлено на ингибирование образования биопленки налета в полости рта потребителя, и, в частности, на зубах. Способ включает контактирование композиции настоящего изобретения с полостью рта. Предпочтительно, когда потребитель представляет собой млекопитающее. Млекопитающее может быть человеком или животным, не являющимся человеком. Наиболее предпочтительно, когда млекопитающее представляет собой человека. Композицию можно вводить в контакт с полостью рта в течение по меньшей мере 10 минут, или по меньшей мере приблизительно 20 минут.

[00105] Настоящее изобретение иллюстрируется следующими Примерами, но не ограничивается ими.

ПРИМЕРЫ

Пример 1: Анализ биопленки в услових in vitro

[00106] Влияние различных концентраций МВЕ и LAE на образование биопленки оценивали в услових in vitro.

Исследование биопленки в услових in vitro

[00107] Биопленки готовили и испытывали модифицированным методом Гугенхейма (описан в публикации Guggenheim B, Gierstein E, Schupbach P. Shapiro S, "ʺValidation of an in vitro biofilm model of supragingival plaqueʺ Journal Dental Research 80:363-370, которая включена в настоящее описание посредством ссылки). Вкратце, биопленки выращивали путем инкубации бактерий слюны на дисках гидроксиапатита, обработанным слюной (HA), в стерильных 24-луночных планшетах для культивирования клеток. Использовали среду, дополненную слюной (25% от общего объема), и диски часто перемещали во время фазы роста, стимулируя рост биопленки, подобной зубному налету. Это выполняли в течение времени вплоть до 72 часов. Биопленку подвергали воздействию испытуемыми композициями (см. Таблицу 1) три раза в день в течение пяти минут, в день 2 и день 3 эксперимента. Биопленку подвергали количественному анализу с помощью турбидиметра и спектрофотометра по поглощению при 600 нм.

[00108] Количество КОЕ для каждой биопленки определяли следующим образом. После энергичного встряхивания из каждой лунки с биопленкий отбирали пипеткой 0,1 мл жидкости и переносили в 10 мл воды для обратного осмоса (RO) (разведение 100Х). Разведение 100Х перемешивали встряхиванием, и 0,1 мл разведения переносили пипеткой в 10 мл H₂O для RO (разведение 10000Х). Разведение 10000Х перемешивали встряхиванием, и 0,1 мл переносили пипеткой в 10 мл H₂O для RO (разведение 10000000Х). 500 мкл каждого из разведений наносили по спирали с помощью устройства автоматического нанесения проб BWSP II Autoplater на CDC-агар. Планшеты инкубировали в течение 48 часов при 37°С в анаэробных условиях. После завершения периода роста подсчитывали количество колоний бактерий, растущих в каждой чашке. Начальная концентрация всех бактерий в полости рта оценивалась как приблизительно 1~2×10⁶ КОЕ/мл.

[00109] Определяли величину IC₄₀ для МВЕ, который использовали в качестве положительного контроля концентрации.

Результаты

[00110] Результаты анализа биопленки в условиях in vitro приведены в Таблице 1

Таблица 1: Результаты анализа биопленки в условиях in vitro

*LAE представляет собой LAE-CF от Vedeqsa, Барселона, Испания (чистота 99%)

** MBE от Honsey Sunshine Biotech, Ltd., Гуаньчжоу, Китай (95% магнолола и 5% гонокиола)

[00111] Процент ингибирования в случае использования только LAE не превысил положительного контроля, но комбинация LAE и MBE имела более высокое ингибирование по сравнению с положительным контролем.

Пример 2: Анализ биопленки в условиях in vivo

[00112] Оценивали действие жевательных резинок, содержащих различные концентрации МВЕ и LAE, на образование налета и количество бактерий в слюне. Составы испытуемых жевательных резинок были следующими:

[00113] Состав А: контрольная жевательная резинка ("Winterfresh");

[00114] Состав В: жевательная резинка с покрытием, содержащим MBE (5,3 мг на порцию; 1,2 мас.% в покрытии жевательной резинки);

[00115] Состав С: жевательная резинка с покрытием, содержащим МВЕ+LAE (7,7 мг МВЕ+9,0 мг LAE на порцию; 1,2 мас.% МВЕ в покрытии жевательной резинки);

[00116] Состав D: конфета для рассасывания с жевательной резинкой (9,6 мг МВЕ на порцию; 1,2% по массе в покрытии жевательной резинки). Конфету употребляют путем рассасывания в течение 2 минут с последующим жеванием начинки.

Скринирование налета

[00117] Двенадцать (12) субъектов употребляли по 5 порций жевательной резинки как 5 разделенных доз в день в течение 4 дней (понедельник-четверг) в течение 20 минут. После окончания каждого этапа (день 5; пятница, вторая половина дня), субъекты употребляли одну дополнительную порцию жевательной резинки. Налет визуализировали и делали цифровые фотографии для количественной оценки с использованием индуцированной светом флуоресценции (QLF) лабиальных поверхностей передних зубов (от клыка до клыка, Mn, Mx) каждого субъекта (визуализирование налета с использованием красителя). Субъекты получали дополнительную профилактику (профессиональная чистка зубов) и затем они получали 9-дневный отдых, в течение которого они выполняли свои обычные процедуры гигиены полости рта с использованием предоставленной зубной щетки и пасты. Субъектов просили продолжить со следующего понедельника пройти следующую фазу эксперимента. Это повторяли до тех пор, пока каждый субъект не использовал все предоставленные образцы композиций для ухода за полостью рта.

Микробиологический анализ

[00118] Образцы слюны (в день 1 и в день 5) собирали в контейнеры со льдом и немедленно передавали в микробиологическую лабораторию для анализа. Количество бактерий в каждом образце определяли методом серийных разведений в забуференном фосфатом физиологическом растворе путем нанесения на селективные и неселективные твердые среды с последующим инкубированием в анаэробных условиях при 37°С. Использовали кровяной агар и агар Mitis salivarius для определения общего количества бактерий и Streptococcus spp. в слюне. Чашки с кровяным агаром повторно исследовали через 7 дней анаэробной инкубации для определения количества черных пигментированных анаэробных микроорганизмов.

[00119] Данные анализировали методом дисперсионного анализа с парным сравнением результатов. Микробиологические данные для анализа преобразовывали в логарифмические показатели. Для этих данных скринирования доверительный уровень альфа был установлен равным 15% (т.е., p < 0,15).

Результаты

[00120] Три состава жевательной резинки (составы В, С и D) и контроль (состав А) испытывали в отношении повторного роста налета в условиях in vivo. Результаты представлены на Фигурах 1A и 1B, а также в Таблицах 2 и 3.

Таблица 2: Статистическое различие между группами (QLF)

vs.=по сравнению с...

Таблица 3: Результаты микробиологического анализа

День 5: представлены средние значения КОЕ в конце каждого этапа лечения

Сдвиг: представлены средние изменения КОЕ для всех субъектов с дня 1 по день 5 для каждого этапа лечения

p: значения р, определенные с использованием одностороннего парного t-критерия

vs. А: по сравнению с А

FAA: агар Fastidious Anaerobe для всех анаэробов

MSA: агар Mitis salivarius agar для Streptococcus spp.

BP: черные пигметированные микроорганизмы

[00121] Как видно на Фигурах 1A и 1B, а также в Таблице 2, только МВЕ+LAE (состав C) показал значительное уменьшение размеров налета приблизительно на 30% (р=0,05) по данным метода QLF (красная флуоресценция) Состав С обладает более высокой эффективностью по сравнению с только одним МВЕ (составы В и D) и контролем (состав А), даже если количество доставляемого МВЕ было ниже, чем в случае композиции D, что показано в Таблице 3, где представлены микробиологические результаты, показывающие статистически значимые изменения для КОЕ на FAA в день 5 (снижение на 0,5 log, p=0,04).

[00122] Эти результаты показывают, что композиции для ухода за полостью рта, содержащие комбинацию МВЕ и LAE, приводят к уменьшению образования налета в условиях in vivo, по сравнению с композициями для ухода за полостью рта, содержащими MBE без LAE.

Пример 3: Синергетическое действие МВЕ и LAE при предотвращении образования биопленки зубного налета

[00123] В этом примере оценивали действие МВЕ и LAE на образование бактериями слюны биопленки налета.

[00124] От 4 доноров собирали 80 мл слюны и центрифугировали при 3800 об/мин для удаления остатков пищи. Супернатант объемом 15 мл удаляли и смешивали с равным объемом фосфатно-солевого буфера (PBS). Затем смесь стерилизовали фильтрацией для сбора белков слюны, которые использовали для предварительного покрытия штифтов, подвешенных на крышке устройства Калгари в течение 3 часов. Между тем оставшуюся слюну центрифугировали при 10000 об/мин для сбора бактерий для инокулирования биопленки. После центрифугирования осадок ресуспендировали до величины OD₆₀₀ равной 0,05, и предварительно смешивали с определенными концентрациями LAE-CF (от Vedeqsa, чистота 99%), MBE и комбинацией этих двух активных веществ при заданных соотношениях. Активные вещества и инокулят добавляли к предварительно покрытым слюной штифтам и инкубировали в течение ночи в течение по меньшей мере 16 часов, чтобы обеспечить образование биопленки. Контроль включал рост (без активных веществ) и только среду (без бактерий).

Результаты

[00125] Результаты показаны в Таблице 4, приведенной ниже. Эффективность синергетического действия LAE И МВЕ показана как минимальная ингибирующая концентрация в отношении биопленки (MBIC)) и фракционная ингибирующая концентрация в отношении биопленки (FBIC) для двух активных веществ. FBIC рассчитывали по следующей формуле:

[00126] FBIC=[Q_A/Q_a+Q_B/Q_b], где

[00127] Q_A=MBIC для компонента A в сочетании с компонентом B

[00128] Q_a=MBIC для компонента А, используемого отдельно.

[00129] Q_B=MBIC для компонента В в сочетании с компонентом А

[00130] Q_b=MBIC для компонента B, используемого отдельно.

[00131] Если FBIC < 1, то компоненты А и В действуют синергетически; если 1 < FBIC < 2, компоненты А и В являются аддитивными; и если 2 < FBIC, то компоненты А и В являются антагонистами. Чем ниже значение FBIC (когда FBIC <1), тем сильнее синергетическое действие двух компонентов.

[00132] Неожиданно было обнаружено, что синергетическая активность в отношении ингибирования образования биопленки наблюдается для отношений МВЕ:LAE равных 4:1, 8:1 и 16:1. Комбинация МВЕ и LAE от 1,3 до 1,8 раз более эффективна, чем МВЕ или LAE, при их использовании по отдельности. В частности, очень неожиданно оказалось, что для соотношения МВЕ:LAE, равного 16:1, была обнаружена высокая эффективность: значение FBIC составило 0,564, что соответствует почти в 2 раза более высокой эффективности, чем в случае использования МВЕ или LAE по отдельности. Небольшое количество LAE по отношению к МВЕ позволило получить более экономичный и эффективный препарат для различных композиций для ухода за полостью рта.

Таблица 4: Синергетическое действие МВЕ и LAE на ингибирование образования биопленки бактериями слюны

Пример 4: Эффективность нагрузки и высвобождения LAE из жевательной резинки

[00133] В этом примере оценивали эффективность нагрузки и высвобождения LAE из жевательной резинки.

[00134] Для оценки высвобождения LAE из пелет жевательной резинки, готовили образцы жевательной резинки с вкусом перечной мяты, содержащие LAE-CF. Добровольцы жевали образцы в течение 20 минут. Болюс жевательной резинки сохраняли в замороженном состоянии до анализа. Болюс жевательной резинки из 6 жеванных резинок, а также нежеванную резинку с LAE тестировали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) и сравнивали результаты для определения выделения/высвобождения из жевательной резинки при ее жевании. В Таблице 5 показаны результаты выделения и высвобождения LAE из центральной части жевательной резинки.

Таблица 5: Эффективность нагрузки и высвобождение LAE из центра жевательной резинки со вкусом перечной мяты

[00135] Как можно видеть из Таблицы 5, приблизительно 85-100% LAE, добавленного при изготовлении жевательной резинки, присутствовало в образцах жевательной резинки, что указывает на то, что только приблизительно 0-15% LAE, добавленного во время изготовления резинки, было утрачено во время ее изготовления. После 20 минут жевания жевательной резинки, высвобождалось 25,4% LAE, присутствующего в образцах жевательной резинки в виде палочек; и 17% LAE высвобождалось из жевательной резинки в виде пеллет.

Пример 5: Эффективность нагрузки и высвобождения МВЕ и LAE из жевательной резинки

[00136] Для оценки эффективности нагрузки и высвобождения МВЕ или МВЕ плюс LAE из жевательной резинки использовали следующие составы жевательных резинок.

[00137] Для состава 3 (МВЕ-сосание) пеллеты жевательной резинки употребляли путем сосания в течение 2 минут до полного растворения слоя покрытия, с последующим жеванием в течение 8 минут. Составы 1, 2 и 4 употребляли путем непрерывного жевания в течение 10 минут. Определяли количество МВЕ и LAE до (для оценки нагрузки) и после (для оценки высвобождения) жевания. Результаты представлены в Таблице 6.

Таблица 6: Результаты определения нагрузки и высвобождения

[00138] Как видно из Таблицы 6, высвобождение МВЕ и LAE является более высоким, когда они представлены в покрытии жевательной резинки для сосания. Кроме того, способ сосания с жеванием дополнительно улучшает высвобождение МВЕ.

Пример 6: Жевательная резинка с покрытием

[00139] В этом примере получали композиции для покрытия, содержащие МВЕ или МВЕ и LAE. Композиции для покрытий могут быть использованы для получения композиций для ухода за полостью рта с покрытием, содержащим МВЕ и LAE.

[00140] Состав композиции для покрытия представлен в Таблице 7.

Таблица 7: Состав композиции для покрытия

[00141] Состав покрытия с МВЕ: 3,75 г МВЕ добавляли к 300 г композиции для покрытия, указанной в Таблице 7. Полученная композиция для покрытия содержит 1,25 мас.% МВЕ. Композиция для покрытия, содержащая МВЕ, может быть нанесена на композиции для ухода за полостью рта, такие как жевательная резинка, в количестве, достаточном для обеспечения концентрации МВЕ 12 мг на порцию.

[00142] Состав покрытия с МВЕ/LAE: 3,75 г МВЕ и 4,65 г LAE добавляли к 300 г состава покрытия, указанного в Таблице 7. Полученная композиция для покрытия содержит 1,25 мас.% МВЕ И 1,55 мас.% LAE. Композиция для покрытия, содержащая МВЕ/LAE, может быть нанесена на композиции для ухода за полостью рта, такие как жевательная резинка, в количестве, достаточном для обеспечения концентрации МВЕ 12 мг на порцию и концентрации LAE 15 мг/порцию.

Пример 7: Эффект действия жевательной резинки, содержащей MBE и LAE, на продуцирование кислоты и на повторный рост бактерий наддесневых бляшек человека

[00143] В этом примере оценивали эффект действия МВЕ и LAE на повторный рост бактерий наддесневых бляшек человека и эффективность жевательной резинки в качестве средства доставки, с использованием метода гликолиза налета и повторного роста бактерий (PGRM).

[00144] В исследовании участвовали шесть взрослых субъектов в возрасте 18-65 лет (пять женщин, один мужчина) различных рас и разных полов. Участники воздерживались от вечерней гигиены полости рта перед днем визита для испытаний, а также от утренней гигиены полости рта перед визитом. Собирали наддесневый налет, образовавшийся за ночь (с левой стороны верхней десны и нижней десны), до жевания образца жевательной резинки (пробы до обработки, обозначенные как "до"). Затем участники испытания жевали один из образцов жевательной резинки в течение 10 минут, и у них собирали пробы налета с правой стороны верхней десны и нижней десны через 20 минут после жевания (пробы после обработки, обозначенные как "после"). Все образцы зубного налета "до" и "после" жевания тестировали в условиях in vitro по их способности роста и продуцирования кислоты с использованием метода PGRM, как описано в публикации White et al., J. Clin. Dent. 6 [специальный выпуск]: рр. 59-70, 1995, которая включена в настоящее описание посредством ссылки. Также в условиях in vitro тестировали способность образовывать биопленку.

[00145] Группы обработки

[00146] Образцы жевательной резинки, оцененные в этом испытании, были следующими: a) основа жевательной резинки (контроль); b) экспериментальная жевательная резинка, содержащая МВЕ и LAE (резинка "МВЕ"); и с) резинка без МВЕ или без LAE ("контрольная резинка"). Резинка "MBE" (порция 3000 мг, получаемая в виде двух пеллет по 1500 мг) по своему составу идентична контрольной резинке, за исключением того, что она содержала 15 мг (0,5 мас.%) МВЕ и 2 мг (0,067 мас.%) LAE на порцию.

[00147] Измерения активности методом гликолиза PGRM

[00148] Образцы налетов, обработанных in vivo ("после"), сравнивали с образцами налета, не подвергавшихся обработке ("до"), в отношении гликолитической активности. Образцы зубного налета до и после обработки диспергировали в буфере, и регулировали их оптическую плотность (OD) при 600 нм до 0,20 ± 0,01 путем добавления 0,03% буфера (триптический соевый бульон, "TSB") для получения нормализованной биомассы налета. Один миллилитр нормализованной биомассы налета переносили пипеткой в пробирку Эппендорфа емкостью 2 мл, и инициировали бактериальный метаболизм добавлением 50 мкл 40%-го раствора сахарозы. Затем нормализованные образцы налета инкубировали при 37°С и перемешивании при 120 об/мин. Продуцирование кислоты через 2 и 4 часа инкубации суспензии оценивали по изменению рН буфера. Результаты представлены в Таблицах 8-10 и на Фигурах 2 и 3.

Таблица 8: Эффект действия жевательной резинки "MBE" (содержащей MBE и LAE) на продуцирование кислоты бактериями наддесневых бляшек человека

Таблица 9: Эффект действия контрольной жевательной резинки (без МВЕ/LAE) на продуцирование кислоты бактериями наддесневых бляшек человека

Таблица 10: Эффект от жевания жевательной резинки (без ароматизатора) на продуцирование кислоты бактериями наддесневых бляшек человека

[00149] Ингибирование способности бактерий налета метаболизировать сахар до кислот является одним из показателей эффективности противомикробных агентов, и уменьшение количества кислоты после обработки является доказательством антимикробного действия. Как видно из результатов, представленных в Таблицах 8-10 и на Фигурах 2 и 3, значение рН для жевательной резинки "МВЕ" (содержащей МВЕ и LAE), повысилось на 0,3 единицы рН через 2 часа по сравнению с необработанными ("до") образом налета (контроль), что указывает на снижение активности бактерий продуцировать кислоту при действии этой жевательной резинки. Таким образом, полученные результаты показывают положительную тенденцию к уменьшению продуцирования кислоты в течение до 2 часов после жевания жевательной резинки "МВЕ" в течение 10 минут. В случае использования основы жевательной резинки и контрольной жевательной резинки статистически значимой тенденции снижения продуцирования кислоты не наблюдали.

[00150] Активность к повторному росту налета, по оценке методом PGRM

[00151] Эффект действия МВЕ и LAE на рост налета определяли путем оценки роста бактерий нормализованных образцов налета в аэробных средах. Аликвоты объемом 300 мкл диспергированного налета из флаконов для гликолиза, полученных, как указано выше, переносили в отдельные пробирки Эппендорфа объемом 2 мл, содержащих 0,5 мл 6% (мас./мас.) BBL TSB (рН 7,1 ± 0,2) и 100 мкл стерильной воды. Рост бактерий в бульоне ускоряли за счет добавления 50 мкл 40%-ого раствора сахарозы. После подготовки образцов измеряли начальную оптическую плотность дисперсии налета при 600 нм в одноразовой кювете для спектрометра емкостью 3 мл. Образцы инкубировали в пробирках Эппендорфа емкостью 2 мл при 37°С и перемешивании при 1200 об/мин. Образцы налета инкубировали в течение 4 часов и измеряли оптическую плотность (600 нм) через 2 и 4 часа после гомогенизации образцов с помощью миксера для измельчения осадка. Результаты представлены в Таблицах 11-14 и на Фигурах 4 и 5. Результаты, полученные для повторного роста, представлены как конечная мутность дисперсии налета (OD₆₀₀).

Таблица 11: Эффект от жевания жевательной резинки "МВЕ" (содержащей МВЕ и LAE) на повторный рост (OD₆₀₀) бактерий наддесневых бляшек человека

Таблица 12: Эффект от жевания контрольной жевательной резинки на повторный рост (OD₆₀₀) бактерий наддесневых бляшек человека

Таблица 13: Эффект от жевания жевательной резинки (без ароматизатора) на повторный рост (OD₆₀₀) бактерий наддесневых бляшек человека

Таблица 14: Отношения показателей повторного роста бактерий (OD_{конечн.}/OD_{начальн.})

^*SD=стандартное отклонение

[00152] Как можно видеть из полученных результатов, имеет место положительная тенденция к уменьшению кратковременного роста бактерий налета вплоть до 4 часов после жевания жевательной резинки "МВЕ" (содержащей МВЕ и LAE) в течение 10 минут, в то время как контрольная жевательная резинка и основа жевательной резинки не ингибируют роста бактерий налета. Эти результаты предполагают, что жевательная резинка может служить в качестве эффективной системы доставки в полость рта антимикробных агентов для кратковременного контроля роста налета.

[00153] В настоящем описании используются примеры для раскрытия изобретения, включая наилучший способ его выполнения, а также для того, чтобы дать возможность любому специалисту в данной области техники реализовать изобретение, включая изготовление и использование любых средств или систем, а также для выполнения любых описанных способов. Патентоспособный объем изобретения определяется формулой изобретения, и он может включать другие примеры, которые очевидны специалистам в данной области техники. Подразумевается, что такие другие примеры находятся в пределах объема притязаний, определенных формулой изобретения, если они имеют признаки, которые не отличаются от буквальных выражений признаков формулы изобретения, или если они включают эквивалентные признаки с несущественными отличиями от буквальных формулировок, представленных в формуле изобретения.

Реферат

Настоящее изобретение относится к композициям для ухода за полостью рта и способам ингибирования образования бактериями слюны биопленки налета и, более конкретно, к композициям для ухода за полостью рта, содержащим комбинацию экстракта коры магнолии (МВЕ) и сложного этилового эфира N-лауроил-L-аргинина (LAE) при массовом соотношении MDE и LAE от 16:1 до 4:1. Композиции для ухода за полостью рта полезны для улучшения гигиены полости рта, включая ингибирование образования бактериями слюны биопленки налета и снижение адгезии налета к зубам. 4 н. и 18 з.п. ф-лы, 6 ил., 14 табл., 7 пр.

Формула