Код документа: RU2006141419A
1. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, содержащий следующие этапы:
а. отбор клеток спермы от самца определенного вида млекопитающих;
b. определение характеристики, дифференцирующей половые признаки указанных клеток спермы;
с. дифференцирование клеток спермы с учетом указанной характеристики дифференцирования половых признаков;
d. разделение дифференцированных клеток спермы на популяции, несущие Х-хромосому, и популяции, несущие Y-хромосому; и
е. получение популяций клеток спермы, несущих X-хромосому и несущих Y-хромосому, со степенью чистоты выше, чем 90% для каждой.
2. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.1, отличающийся тем, что этап дифференцирования клеток с учетом характеристики дифференцирования половых признаков, содержит оценку количества ДНК в ядрах клеток спермы.
3. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.1, отличающийся тем, что этап дифференцирования клеток спермы с учетом характеристики дифференцирования половых признаков, содержит оценку объема капсулы, содержащей указанное количество ДНК.
4. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.3, отличающийся тем, что этап оценки объема капсулы, содержащей указанное количество ДНК, включает определение объема ядер в клетках спермы.
5. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.3, отличающийся тем, что этап оценки объема капсулы, содержащей указанное количество ДНК, включает определение объема головки клетки сперматозоида.
6. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.5, отличающийся тем, что этап оценки объема капсулы, содержащей указанное количество ДНК, дополнительно включает следующие этапы:
а. генерирование пучка электромагнитного излучения, с исходными характеристиками формы колебаний;
b. перемещение объема капсулы, содержащей указанное количество ДНК, через пучок электромагнитного излучения;
с. изменение исходных характеристик формы колебаний при перемещении объема капсулы;
d. анализ измененных характеристик формы колебаний.
7. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.6, отличающийся тем, что изменение исходных характеристик формы колебаний при перемещении капсулы, состоит в сдвиге по фазе исходных колебаний в пучке электромагнитного излучения.
8. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.6, отличающийся тем, что содержит этап наложения пучка электромагнитного излучения со сдвигом фазы на пучок электромагнитного излучения, имеющий исходные характеристики формы колебаний.
9. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.8, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап сравнения интенсивности электромагнитного излучения наложенных пучков электромагнитного излучения с интенсивностью электромагнитного излучения пучка с исходными характеристиками формы колебаний.
10. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.9, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап определения объема капсулы, содержащей указанное количество ДНК, в зависимости от разности интенсивности света между наложенными пучками электромагнитного излучения и пучком электромагнитного излучения с исходными характеристиками формы колебаний.
11. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.2, отличающийся тем, что дополнительно содержит следующие этапы:
а. ввод клеток спермы в поток текучей среды;
b. анализ клеток спермы, захваченных потоком текучей среды;
с. формирование множества капелек, содержащих одну из клеток спермы;
d. зарядка каждой из капелек по-разному, в зависимости от характеристик дифференцирования половых признаков клетки спермы, содержащейся в данной капельке;
е. отклонение каждой из капелек;
f. раздельное накопление капелек с учетом характеристик дифференцирования половых признаков клетки спермы, захваченной в каждую капельку.
12. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.11, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап сохранения количества ДНК в ядро клеток спермы в неокрашенном состоянии.
13. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.11, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап окрашивания указанного количества ДНК в ядрах клеток спермы.
14. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.13, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап облучения окрашенной ДНК, находящейся в ядрах клеток спермы.
15. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.14, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап детектирования флуоресцентного света, излучаемого облученной окрашенной ДНК, находящейся в ядрах клеток спермы.
16. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.15, отличающийся тем, что этап детектирования флуоресцентного света от облученной окрашенной ДНК, находящейся в ядрах клеток спермы, содержит генерирование сигнала с помощью трубки фотоумножителя.
17. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.16, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап работы указанной трубки фотоумножителя с напряжением, выбираемым за пределами обычного диапазона рабочих напряжений.
18. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.14, отличающийся тем, что этап облучения окрашенной ДНК, находящейся внутри ядер клеток спермы, дополнительно содержит генерирование пучка с пятном облучения уменьшенной высоты.
19. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.18, отличающийся тем, что уменьшенная высота представляет собой высоту от величины, приблизительно равной длине клеток спермы по продольной оси, до величины, приблизительно в три раза большей длины клеток спермы по продольной оси.
20. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.19, отличающийся тем, что клетки спермы имеют продольную ось длиной приблизительно 9 мкм, и высота пятна облучения составляет приблизительно 20 мкм.
21. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.18, отличающийся тем, что этап формирования капелек содержит формирование капелек с размером, достаточным для обволакивания клеток спермы.
22. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.21, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап эжектирования потока текучей среды через сопло, содержащее отверстие диаметром 70 мкм.
23. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.22, отличающийся тем, что дополнительно содержит этапы:
а. ориентирование клеток спермы по отношению к детектору;
b. детектирование света, имеющего характеристики, отличающиеся в зависимости от ориентации клетки по отношению к детектору;
с. преобразование света, имеющего характеристики, отличающиеся в зависимости от ориентации клетки спермы, по меньшей мере, в один сигнал, содержащий информацию об ориентации клетки спермы; и
d. определение ориентации клетки спермы по отношению к указанному детектору.
24. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.23, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап раздельного накопления клеток в зависимости от определенной ориентации клетки спермы по отношению к указанному детектору.
25. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по любому из пп.1, 6, 12, 13, 17, 18, 21 или 23, отличающийся тем, что степень чистоты популяций клеток спермы, несущих Х-хромосому и клеток спермы, несущих Y-хромосому, выбирают из группы, состоящей из: от 90% до приблизительно 100%, от приблизительно 91% до приблизительно 100%, от приблизительно 92% до приблизительно 100%, от приблизительно 93% до приблизительно 100%, от приблизительно 94% до приблизительно 100%, от приблизительно 95% до приблизительно 100%, от приблизительно 96% до приблизительно 100%, от приблизительно 97% до приблизительно 100%, от приблизительно 98% до приблизительно 100%, от приблизительно 99% до приблизительно 100%.
26. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по любому из пп.1, 6, 12, 13, 17, 18, 21 или 23, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап установления вероятности отделимых событий выбранной из группы, состоящей, по меньшей мере, из: 5000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 6000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 7000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 8000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 9000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 10000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 11000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 12000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 13000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 14000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 15000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 16000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 17000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 18000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 19000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 20000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 21000 отделимых событий в секунду.
27. Способ разделения клеток спермы, несущих X-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по любому из пп.1, 6, 12, 13, 18, 21 или 23, отличающийся тем, что на этапе разделения клеток спермы скорость разделения выбирают из группы, состоящей из: по меньшей мере, 500 разделений в секунду, по меньшей мере, 1000 разделений в секунду, по меньшей мере, 2000 разделений в секунду, по меньшей мере, 3000 разделений в секунду, по меньшей мере, 4000 разделений в секунду, по меньшей мере, 5000 разделений в секунду, по меньшей мере, 6000 разделений в секунду, по меньшей мере, 7000 разделений в секунду, по меньшей мере, 8000 разделений в секунду, по меньшей мере, 9000 разделений в секунду, по меньшей мере, 10000 разделений в секунду.
28. Способ разделения клеток спермы, несущих X-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по любому из пп.1, 6, 12, 13, 18, 21 или 23, отличающийся тем, что на этапе формирования капелек, каждая из которых содержит одну клетку спермы, скорость формирования капелек выбирают из группы, состоящей из: по меньшей мере, 10000 капелек в секунду, по меньшей мере, 20000 капелек в секунду, по меньшей мере, 30000 капелек в секунду, по меньшей мере, 40000 капелек в секунду, по меньшей мере, 50000 капелек в секунду, по меньшей мере, 60000 капелек в секунду, по меньшей мере, 70000 капелек в секунду, по меньшей мере, 80000 капелек в секунду, по меньшей мере, 90000 капелек в секунду, по меньшей мере, 100000 капелек в секунду.
29. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.1, отличающийся тем, что в качестве представителя вида млекопитающих выбирают быка.
30. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.1, отличающийся тем, что представителем вида млекопитающих является конь.
31. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.1, отличающийся тем, что представителем вида млекопитающих является баран.
32. Устройство, предназначенное для разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, содержащее емкость для клеток спермы, имеющих головки сперматозоидов разного объема у клеток спермы, несущих X-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, средство формирования пучка электромагнитного излучения, имеющего исходные характеристики формы колебаний, дифференциально реагирующие на указанную разницу объема между клетками спермы, несущими Х-хромосому, и клетками спермы, несущими Y-хромосому, детектор, чувствительный к изменяющимся характеристикам формы колебаний указанного пучка электромагнитного излучения, анализатор, подключенный к детектору и способный определять разницу в объеме между клетками спермы, несущими Х-хромосому, и клетками спермы, несущими Y-хромосому, в зависимости от изменяющихся характеристик формы колебаний.
33. Устройство по п.32, отличающееся тем, что дополнительно содержит средство формирования потока текучей среды, приспособленного для ввода в него клеток спермы.
34. Устройство по п.33, отличающееся тем, что дополнительно содержит средство отделения от потока текучей среды, множества капелек которые захватывают одну из клеток спермы.
35. Устройство по п.34, отличающееся тем, что капельки, отделяемые от потока текучей среды, имеют размер, достаточный для обволакивания одной клетки спермы.
36. Устройство по п.35, отличающееся тем, что дополнительно содержит сопло, имеющее отверстие диаметром приблизительно 100 мкм.
37. Устройство по п.36, отличающееся тем, что дополнительно содержит устройство заряда капелек, подключенное к анализатору, в котором капельки получают различный заряд в зависимости от разности объема клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому.
38. Устройство по п.37, отличающееся тем, что дополнительно содержит разделитель капелек в зависимости от их заряда.
39. Устройство по п.38, отличающееся тем, что дополнительно содержит, по меньшей мере, один контейнер для сбора капелек, содержащих клетки спермы, несущие Х-хромосому, в качестве популяции, несущей Х-хромосому.
40. Устройство по п.38, отличающееся тем, что дополнительно содержит, по меньшей мере, один контейнер для сбора капелек, содержащих клетки спермы, несущие Y-хромосому, в качестве популяции несущей Y-хромосому.
41. Устройство по п.38 или 39, отличающееся тем, что популяция, несущая Х-хромосому, и популяция, несущая Y-хромосому, клеток спермы имеет степень чистоты, выбранную из группы, состоящей из: от 90% до приблизительно 100%, от приблизительно 91% до приблизительно 100%, от приблизительно 92% до приблизительно 100%, от приблизительно 93% до приблизительно 100%, от приблизительно 94% до приблизительно 100%, от приблизительно 95% до приблизительно 100%, от приблизительно 96% до приблизительно 100%, от приблизительно 97% до приблизительно 100%, от приблизительно 98% до приблизительно 100%, от приблизительно 99% до приблизительно 100%.
42. Устройство по п.41, отличающееся тем, что выполнено с возможностью установления вероятности отделимых событий, выбранной из группы, состоящей, по меньшей мере, из: 5000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 6000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 7000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 8000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 9000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 10000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 11000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 12000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 13000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 14000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 15000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 16000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 17000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 18000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 19000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 20000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 21000 отделимых событий в секунду.
43. Устройство по п.42, отличающееся тем, что выполнено с возможностью обеспечения скорости разделения, выбранной из группы, состоящей из: по меньшей мере, 500 разделений в секунду, по меньшей мере, 1000 разделений в секунду, по меньшей мере, 2000 разделений в секунду, по меньшей мере, 3000 разделений в секунду, по меньшей мере, 4000 разделений в секунду, по меньшей мере, 5000 разделений в секунду, по меньшей мере, 6000 разделений в секунду, по меньшей мере, 7000 разделений в секунду, по меньшей мере, 8000 разделений в секунду, по меньшей мере, 9000 разделений в секунду, по меньшей мере, 10000 разделений в секунду, 11000 разделений в секунду.
44. Устройство по п.43, отличающееся тем, что выполнено с возможностью обеспечения скорости формирования капелек, выбранной из группы, состоящей из: по меньшей мере, 10000 капелек в секунду, по меньшей мере, 20000 капелек в секунду, по меньшей мере, 30000 капелек в секунду, по меньшей мере, 40000 капелек в секунду, по меньшей мере, 50000 капелек в секунду, по меньшей мере, 60000 капелек в секунду, по меньшей мере, 70000 капелек в секунду, по меньшей мере, 80000 капелек в секунду, по меньшей мере, 90000 капелек в секунду, по меньшей мере, 100000 капелек в секунду.
45. Устройство по п.44, отличающееся тем, что детектор содержит, по меньшей мере, одну трубку фотоумножителя, выполненную с возможностью преобразования электромагнитного излучения в, по меньшей мере, один сигнал, имеет обычный диапазон рабочих напряжений, и приспособлен для работы за пределами обычного диапазона рабочих напряжений.
46. Устройство по п.45, отличающееся тем, что обычный диапазон рабочих напряжений трубки фотоумножителя составляет от приблизительно 400 до приблизительно 999 В.
47. Устройство по п.46, отличающееся тем, что трубка фотоумножителя работает в диапазоне от приблизительно 0 до приблизительно 300 В.
48. Устройство по п.41, отличающееся тем, что виды млекопитающих представлены быками.
49. Устройство по п.41, отличающееся тем, что виды млекопитающих представлены лошадьми.
50. Устройство по п.41, отличающееся тем, что виды млекопитающих представлены баранами.
51. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, содержащий следующие этапы:
а. отбор клеток спермы от самца определенного вида млекопитающих;
b. оценка объема капсулы, содержащей ядерную ДНК указанных клеток спермы;
с. дифференциирование клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, в зависимости от объема капсулы, содержащей ядерную ДНК указанных клеток спермы;
52. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.51, отличающийся тем, что этап оценки объема капсулы, содержащей ДНК, включает определение сдвига фазы в электромагнитном излучении.
53. Способ изолирования клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.52, отличающийся тем, что этап оценки объема капсулы, содержащей ДНК, включает:
а. генерирование пучка электромагнитного излучения, имеющего исходные характеристики формы колебаний;
b. перемещение объема указанной капсулы, содержащей ДНК, через пучок электромагнитного излучения, с исходными характеристиками формы колебаний;
с. изменение исходных характеристик формы колебаний при пропускании объема капсулы через пучок; и
d. анализ измененных характеристик формы колебаний пучка электромагнитного излучения.
54. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.53, отличающийся тем, что этап изменения исходных характеристик формы колебаний при перемещении объема капсулы содержит сдвиг фазы исходных характеристик формы колебаний электромагнитного излучения.
55. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.54, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап взаимного наложения исходных характеристик формы колебаний и характеристик формы колебаний со сдвигом фазы.
56. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.55, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап сравнения указанных характеристик колебаний исходной формы с наложенными характеристиками формы колебаний.
57. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.56, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап определения объема капсулы, содержащей указанную ДНК, на основе различий в интенсивности между наложенными характеристиками формы со сдвигом фазы и исходными характеристиками формы колебаний.
58. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.57, отличающийся тем, что дополнительно содержит следующие этапы:
а. ввод клеток спермы в поток текучей среды;
b. формирование множества капелек, каждая из которых захватывает одну из клеток спермы;
с. зарядку каждой из капелек по-разному в зависимости от оценки объема капсулы, содержащей ядерную ДНК клеток спермы;
d. отклонение каждой из капелек;
е. раздельное накопление капелек в зависимости от объема капсулы, содержащей ДНК; и
f. генерирование популяций клеток спермы, несущих X-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому.
59. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.58, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап сохранения указанного количества ДНК в ядрах клеток спермы в неокрашенном состоянии.
60. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.59, отличающийся тем, что содержит этап формирования капелек, имеющих размер, достаточный для обволакивания клеток спермы.
61. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.60, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап выталкивания потока текучей среды через сопло, содержащее отверстие диаметром 100 мкм.
62. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.58, отличающийся тем, что дополнительно содержит следующие этапы:
а. детектирование сигнала, имеющего характеристики ориентации клеток спермы;
b. сравнение сигнала, имеющего характеристики ориентации клеток спермы с сигналом, имеющим характеристики ориентированной клетки спермы;
с. определение того, что указанная клетка спермы имеет характеристики неправильно ориентированной клетки спермы; и
d. раздельное накопление клеток спермы, имеющих характеристики неправильно ориентированной клетки спермы.
63. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.58 или 62, отличающейся тем, что степень чистоты популяций, несущих X-хромосому и указанных популяций, несущих Y-хромосому, указанных клеток спермы выбирают из группы, состоящей из: от 90% до приблизительно 100%, от приблизительно 91% до приблизительно 100%, от приблизительно 92% до приблизительно 100%, от приблизительно 93% до приблизительно 100%, от приблизительно 94% до приблизительно 100%, от приблизительно 95% до приблизительно 100%, от приблизительно 96% до приблизительно 100%, от приблизительно 97% до приблизительно 100%, от приблизительно 98% до приблизительно 100%, от приблизительно 99% до приблизительно 100%.
64. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.63, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап установления вероятности отделимых событий, выбранной из группы, состоящей, по меньшей мере, из: 5000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 6000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 7000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 8000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 9000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 10000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 11000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 12000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 13000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 14000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 15000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 16000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 17000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 18000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 19000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 20000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 21000 отделимых событий в секунду.
65. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.64, отличающийся тем, что на этапе разделения клеток спермы скорость разделения выбирают из группы, состоящей из: по меньшей мере, 500 разделений в секунду, по меньшей мере, 1000 разделений в секунду, по меньшей мере, 2000 разделений в секунду, по меньшей мере, 3000 разделений в секунду, по меньшей мере, 4000 разделений в секунду, по меньшей мере, 5000 разделений в секунду, по меньшей мере, 6000 разделений в секунду, по меньшей мере, 7000 разделений в секунду, по меньшей мере, 8000 разделений в секунду, по меньшей мере, 9000 разделений в секунду, по меньшей мере, 10000 разделений в секунду.
66. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.65, отличающийся тем, что на этапе формирования капелек, в каждой из которых содержится одна клетка спермы, скорость формирования капелек выбирают из группы, состоящей, по меньшей мере, из 10000 капелек в секунду, по меньшей мере, 20000 капелек в секунду, по меньшей мере, 30000 капелек в секунду, по меньшей мере, 40000 капелек в секунду, по меньшей мере, 50000 капелек в секунду, по меньшей мере, 60000 капелек в секунду, по меньшей мере, 70000 капелек в секунду, по меньшей мере, 80000 капелек в секунду, по меньшей мере, 90000 капелек в секунду, по меньшей мере, 100000 капелек в секунду.
67. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.51, отличавшийся тем, что виды млекопитающих представлены быками.
68. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.51, отличающийся тем, что виды млекопитающих представлены лошадьми.
69. Способ разделения клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому, по п.51, отличающийся тем, что виды млекопитающих представлены баранами.
70. Способ разделения частиц, содержащий следующие этапы:
а. сбор асимметричных частиц;
b. формирование потока текучей среды через проточный цитометр;
с. ввод асимметричных частиц в поток текучей среды;
d. ориентирование асимметричных частиц по отношению к детектору;
е. детектирование света, имеющего характеристики, дифференциально чувствительные к ориентации асимметричной частицы по отношению к детектору;
g. преобразование света, имеющего характеристики, дифференциально чувствительные к ориентации асимметричной частицы в, по меньшей мере, один сигнал, содержащий информацию об ориентации асимметричной частицы;
h. анализ информации об ориентации асимметричной частицы; и
i. определение ориентации асимметричных частиц по отношению к детектору.
71. Способ разделения частиц по п.70, отличающийся тем, что поток текучей среды содержит обволакивающую жидкость.
72. Способ разделения частиц по п.70, отличающийся тем, что детектор содержит трубку фотоумножителя.
73. Способ разделения частиц по п.72, отличающийся тем, что свет является флуоресцентным светом.
74. Способ разделения частиц по п.73, отличающийся тем, что флуоресцентный свет излучают эмиссионным материалом, связанным с асимметричными частицами.
75. Способ разделения частиц по п.70, отличающийся тем, что этап анализа информации об ориентации асимметричной частицы содержит:
а. построение графика формы электронного сигнала в течение определенного периода времени;
b. интегрирование областей графика, соответствующих указанному электронному сигналу; и
с. сравнение результатов интегрирования областей графика с результатами интегрирования ориентированных асимметричных частиц.
76. Способ разделения частиц по п.70, отличающийся тем, что дополнительно содержит отдельный отбор асимметричных частиц в зависимости от определенной ориентации асимметричных частиц по отношению к детектору.
77. Способ разделения частиц по п.70, отличающийся тем, что асимметричные частицы представляют собой клетки спермы, полученные от самца определенного вида млекопитающих.
78. Способ разделения частиц по п.70, отличающийся тем, что дополнительно содержит следующие этапы:
а. оценку объема капсулы, содержащей ядерную ДНК клеток спермы; и
b. дифференцирование между клетками спермы, несущими X-хромосому, и клетками спермы, несущими Y-хромосому, в зависимости от объема капсулы, содержащей ядерную ДНК клеток спермы.
79. Способ разделения частиц по п.78, отличающийся тем, что капсула, содержащая ДНК, содержит головку сперматозоида.
80. Способ разделения частиц по п.78, отличающийся тем, что этап оценки объема капсулы, содержащей указанную ДНК, включает:
а. генерирование пучка электромагнитного излучения, имеющего исходные характеристики формы колебаний;
b. перемещение объема капсулы, содержащей указанную ДНК, через пучок электромагнитного излучения, имеющий исходные характеристики формы колебаний;
с. изменение исходных характеристик формы колебаний пучка электромагнитного излучения при перемещении объема капсулы; и
d. анализ измененных характеристик формы колебаний.
81. Способ разделения частиц по п.80, отличающийся тем, что этап изменения характеристик формы колебаний при перемещении объема капсулы, содержит сдвиг по фазе исходных характеристик формы колебания.
82. Способ разделения частиц по п.81, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап наложения исходных характеристик формы колебаний на характеристики формы колебаний со сдвигом фазы.
83. Способ разделения частиц по п.82, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап сравнения исходных характеристик формы колебаний и наложенных характеристик формы колебаний.
84. Способ разделения частиц по п.83, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап определения объема капсулы, содержащей указанную ДНК, на основе разности интенсивности.
85. Способ разделения частиц по п.80, отличающийся тем, что дополнительно содержит этапы:
а. формирование множества капелек, каждая из которых захватывают одну клетку спермы;
b. зарядку каждой капельки по-разному, в зависимости от определенного объема капсулы, содержащей ядерную ДНК клеток спермы;
с. отклонение каждой капельки;
d. накопление каждой из указанных капелек в зависимости от их заряда; и
е. получение популяций клеток спермы, несущих Х-хромосому и несущих Y-хромосому.
86. Способ разделения частиц по п.77, отличающийся тем, что дополнительно содержит следующие этапы:
а. формирование множества капелек, каждая из которых захватывает одну из клеток спермы;
b. зарядку каждой из указанных капелек по-разному, в зависимости от количества ядерой ДНК в клетках спермы;
с. отклонение каждой из указанных капелек;
d. накопление капелек в зависимости от их заряда; и
е. получение популяций клеток спермы, несущих X-хромосому и несущих Y-хромосому.
87. Способ разделения частиц по п.85 или 86, отличающийся тем, что этап формирования множества капелек, которые захватывают клетку спермы, содержит формирование капелек, имеющих размер, достаточный для обволакивания клетки спермы, в котором указанная клетка спермы является неповрежденной живой клеткой спермы, имеющей хвостик.
88. Способ разделения частиц по п.87, отличающийся тем, что дополнительно содержит этап выталкивания потока текучей среды из сопла, содержащего отверстие диаметром 100 мкм.
89. Способ разделения частиц по п.88, отличающийся тем, что популяции клеток спермы, несущие Х-хромосому и несущие Y-хромосому, имеют степень чистоты, выбранную из группы, состоящей из: от 90 до приблизительно 100%, от приблизительно 91 до приблизительно 100%, от приблизительно 92 до приблизительно 100%, от приблизительно 93 до приблизительно 100%, от приблизительно 94 до приблизительно 100%, от приблизительно 95 до приблизительно 100%, от приблизительно 96 до приблизительно 100%, от приблизительно 97 до приблизительно 100%, от приблизительно 98 до приблизительно 100%, от приблизительно 99 до приблизительно 100%.
90. Способ разделения частиц по п.88, отличавшийся тем, что дополнительно содержит этап установления вероятности отделимого события, выбранной из группы, состоящей, по меньшей мере, из: 5000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 6000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 7000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 8000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 9000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 10000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 11000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 12000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 13000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 14000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 15000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 16000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 17000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 18000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 19000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 20000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 21000 отделимых событий в секунду.
91. Способ разделения частиц по п.88, отличающийся тем, что на этапе разделения клеток спермы скорость разделения выбирают из группы, состоящей из: по меньшей мере, 500 разделений в секунду, по меньшей мере, 1000 разделений в секунду, по меньшей мере, 2000 разделений в секунду, по меньшей мере, 3000 разделений в секунду, по меньшей мере, 4000 разделений в секунду, по меньшей мере, 5000 разделений в секунду, по меньшей мере, 6000 разделений в секунду, по меньшей мере, 7000 разделений в секунду, по меньшей мере, 8000 разделений в секунду, по меньшей мере, 9000 разделений в секунду, по меньшей мере, 10000 разделений в секунду.
92. Способ разделения частиц по п.88, отличающийся тем, что на этапе формирования капелек, в каждой из которых содержится одна клетка спермы, скорость формирования капелек выбирают из группы, состоящей из: по меньшей мере, 10000 капелек в секунду, по меньшей мере, 20000 капелек в секунду, по меньшей мере, 30000 капелек в секунду, по меньшей мере, 40000 капелек в секунду, по меньшей мере, 50000 капелек в секунду, по меньшей мере, 60000 капелек в секунду, по меньшей мере, 70000 капелек в секунду, по меньшей мере, 80000 капелек в секунду, по меньшей мере, 90000 капелек в секунду, по меньшей мере, 100000 капелек в секунду.
93. Способ разделения частиц по п.77, отличающийся тем, что виды млекопитающих представлены быками.
94. Способ разделения частиц по п.77, отличающийся тем, что виды млекопитающих представлены лошадьми.
95. Способ разделения частиц по п.77, отличающийся тем, что виды млекопитающих представлены баранами.
96. Устройство разделения частиц, содержащее:
а. по меньшей мере, одну асимметричную частицу, имеющую характеристики ориентации в потоке текучей среды;
b. источник облучения, генерирующий пучок облучения, который реагирует на указанные асимметричные частицы;
с. оптическое средство, предназначенное для фокусировки указанного пучка облучения;
d. светоэмиссионный материал, соединенный с указанной асимметричной частицей и излучающий свет в ответ на воздействие пучка луча облучения;
е. детектор, дифференциально реагирующий на указанный свет, излучаемый светоэмиссионным материалом в зависимости от характеристик ориентации указанной частицы; и
f. анализатор, соединенный с детектором и способный разделять асимметричные частицы в зависимости от их ориентации в потоке текучей среды.
97. Устройство разделения частиц по п.96, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна асимметричная частица содержит, по меньшей мере, одну клетку спермы.
98. Устройство разделения частиц по п.96, отличающееся тем, что оптическое средство фокусирует пучок для получения пятна облучения с высотой, от величины, приблизительно равной длине асимметричной частицы по ее продольной оси, до величины, приблизительно в три раза большей, чем длина асимметричной частицы по ее продольной оси.
99. Устройство разделения частиц по п.98, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна клетка спермы имеет головку, имеющую длину по продольной оси, равную приблизительно 9 мкм, при этом пятно облучения имеет высоту приблизительно 20 мкм.
100. Устройство разделения частиц по п.96, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна асимметричная частица, имеющая характеристики ориентирования, дополнительно имеет, по меньшей мере, одну характеристику дифференцирования частицы.
101. Устройство разделения частиц, по п.96, отличающееся тем, что светоэмиссионный материал, соединенный с, по меньшей мере, одной асимметричной частицей, содержит краситель, связанный с ядерной ДНК клеток спермы самца определенных видов млекопитающих.
102. Устройство разделения частиц по п.101, отличающееся тем, что характеристика дифференцирования частиц включает разность количества красителя, связанного с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Х-хромосому, и ядерной ДНК клеток спермы, несущих Y-хромосому.
103. Устройство разделения частиц по п.96, отличающееся тем, что детектор содержит, по меньшей мере, одну трубку фотоумножителя, имеющую обычный диапазон рабочих напряжений и приспособленную для работы за пределами обычного диапазона рабочих напряжений.
104. Устройство разделения частиц по п.103, отличающееся тем, что обычный диапазон рабочих напряжений трубки фотоумножителя составляет от приблизительно 400 до приблизительно 999 В.
105. Устройство разделения частиц по п.104, отличающееся тем, что трубка фотоумножителя работает в диапазоне от приблизительно 0 до приблизительно 300 В.
106. Устройство разделения частиц по п.96, отличающееся тем, что дополнительно содержит отделение от потока текучей среды множества капелек, каждая из которых захватывает, по меньшей мере, одну из асимметричных частиц.
107. Устройство разделения частиц по п.106, отличающееся тем, что капельки, отделяемые от текучей среды, имеют размер, достаточный для обволакивания одной из клеток спермы, при этом клетки спермы содержат не поврежденные живые клетки спермы, имеющие хвостик.
108. Устройство разделения частиц по п.107, отличающееся тем, что дополнительно содержит сопло, имеющее отверстие диаметром приблизительно 100 мкм.
109. Устройство разделения частиц по п.106, отличающееся тем, что дополнительно содержит устройство заряда капелек, соединенное с анализатором, в котором капельки получают заряд в зависимости от разности в количестве красителя, связанного с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Х-хромосому и с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Y-хромосому.
110. Устройство разделения частиц по п.109, отличающееся тем, что дополнительно содержит устройство заряда капелек, соединенное с анализатором, в котором капельки получают различный заряд, в зависимости от различий в объеме частиц, причем различие в объеме частиц содержит различие между клетками спермы, несущими Х-хромосому, и клетками спермы, несущими Y-хромосому.
111. Устройство разделения частиц по п.110, отличающееся тем, что дополнительно содержит разделитель капелек, выполненный с возможностью разделения их на основе заряда указанной капельки.
112. Устройство разделения частиц по п.111, отличающееся тем, что дополнительно содержит, по меньшей мере, один контейнер для сбора капелек, содержащих клетки спермы, несущие Х-хромосому, в качестве популяции, несущей Х-хромосому.
113. Устройство разделения частиц по п.111, отличающееся тем, что дополнительно содержит, по меньшей мере, один контейнер для сбора капелек, содержащих клетки спермы, несущие Y-хромосому, в качестве популяции, несущий Y-хромосому.
114. Устройство разделения частиц по п.112 или 113, отличающееся тем, что популяцию, несущую Х-хромосому, и популяцию, несущую Y-хромосому клеток спермы имеют степень чистоты, которая выбрана из группы, состоящей из: от 90 до приблизительно 100%, от приблизительно 91 до приблизительно 100%, от приблизительно 92 до приблизительно 100%, от приблизительно 93 до приблизительно 100%, от приблизительно 94 до приблизительно 100%, от приблизительно 95 до приблизительно 100%, от приблизительно 96 до приблизительно 100%, от приблизительно 97 до приблизительно 100%, от приблизительно 98 до приблизительно 100%, от приблизительно 99 до приблизительно 100%.
115. Устройство разделения частиц по п.114, отличающееся тем, что дополнительно содержит этап установления вероятности отделимых событий, в выбранной из группы, состоящей, по меньшей мере, из: 5000 разделений событий в секунду, по меньшей мере, 6000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 7000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 8000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 9000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 10000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 11000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 12000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 13000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 14000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 15000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 16000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 17000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 18000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 19000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 20000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 21000 отделимых событий в секунду.
116. Устройство разделения частиц по п.115, отличающееся тем, что на этапе разделения клеток спермы скорость разделения выбирают из группы, состоящей из: по меньшей мере, 500 разделений в секунду, по меньшей мере, 1000 разделений в секунду, по меньшей мере, 2000 разделений в секунду, по меньшей мере, 3000 разделений в секунду, по меньшей мере, 4000 разделений в секунду, по меньшей мере, 5000 разделений в секунду, по меньшей мере, 6000 разделений в секунду, по меньшей мере, 7000 разделений в секунду, по меньшей мере, 8000 разделений в секунду, по меньшей мере, 9000 разделений в секунду, по меньшей мере, 10000 разделений в секунду, 11000 разделений в секунду.
117. Устройство разделения частиц по п.116, отличающееся тем, что на этапе формирования капелек, в каждой из которых содержится одна клетка спермы, скорость формирования капелек выбирают из группы, состоящей из: по меньшей мере, 10000 капелек в секунду, по меньшей мере, 20000 капелек в секунду, по меньшей мере, 30000 капелек в секунду, по меньшей мере, 40000 капелек в секунду, по меньшей мере, 50000 капелек в секунду, по меньшей мере, 60000 капелек в секунду, по меньшей мере, 70000 капелек в секунду, по меньшей мере, 80000 капелек в секунду, по меньшей мере, 90000 капелек в секунду, по меньшей мере, 100000 капелек в секунду.
118. Устройство разделения частиц по п.102, отличающееся тем, что виды млекопитающих представлены быками.
119. Устройство разделения частиц по п.102, отличающееся тем, что виды млекопитающих представлены лошадьми.
120. Устройство разделения частиц по п.102, отличающееся тем, что виды млекопитающих представлены баранами.
121. Устройство разделения частиц, содержащее:
а. поток текучей среды;
b. неповрежденные живые клетки спермы, введенные в указанный поток текучей среды;
с. сопло, имеющее отверстие, через которое выходит поток текучей среды;
d. осциллятор, реагирующий на поток текучей среды; и
е. средство отделения множества капелек от потока текучей среды, каждая из которых захватывает неповрежденную живую клетку спермы и имеет достаточный размер для обволакивания одной из живых клеток спермы.
122. Устройство разделения частиц по п.121, отличающееся тем, что отверстие имеет диаметр 100 мкм.
123. Устройство разделения частиц по п.122, отличающееся тем, что выполнено с возможностью отделения капелек от потока текучей среды со скоростью, выбираемой из группы, состоящей из: по меньшей мере, 10000 капелек в секунду, по меньшей мере, 20000 капелек в секунду, по меньшей мере, 30000 капелек в секунду, по меньшей мере, 40000 капелек в секунду, по меньшей мере, 50000 капелек в секунду, по меньшей мере, 60000 капелек в секунду, по меньшей мере, 70000 капелек в секунду, по меньшей мере, 80000 капелек в секунду, по меньшей мере, 90000 капелек в секунду, по меньшей мере, 100000 капелек в секунду.
124. Устройство разделения частиц по п.123, отличающееся тем, что дополнительно содержит источник излучения света.
125. Устройство разделения частиц по п.124, отличающееся тем, что дополнительно содержит детектор, реагирующий на указанный свет.
126. Устройство разделения частиц по п.125, отличающееся тем, что неповрежденные живые клетки спермы имеют, по меньшей мере, одну характеристику дифференцирования полового признака.
127. Устройство разделения частиц по п.126, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна характеристика дифференцирования полового признака включает разницу объема головок клеток спермы неповрежденных живых клеток спермы.
128. Устройство разделения частиц по п.127, отличающееся тем, что источник излучения света выполнен с возможностью излучения пучка электромагнитного излучения, проходящего через объем головок клеток спермы, и имеющего исходные характеристики формы колебаний, по-разному реагирующие на разный объем головок клеток спермы.
129. Устройство разделения частиц по п.128, отличающееся тем, что дополнительно содержит анализатор, реагирующий на сигналы детектора, причем анализатор способен разделять неповрежденные живые клетки спермы, в зависимости от разного объема головок клеток спермы.
130. Устройство разделения частиц по п.129, отличающееся тем, что разница в объеме головок клеток спермы содержит разницу между живыми неповрежденными клетками спермы, несущими Х-хромосому, и живыми неповрежденными клетками спермы, несущими Y-хромосому.
131. Устройство разделения частиц по п.126, отличающееся тем, что причем источник облучения генерирует пучок облучения, реагирующий на неповрежденные живые клетки спермы.
132. Устройство разделения частиц по п.131, отличающееся тем, что дополнительно содержит оптическое средство, способное фокусировать пучок облучения в пятно, имеющее высоту, от величины, приблизительно равной длине головок сперматозоидов по продольной оси, до величины, приблизительно в три раза большей длины головки сперматозоида по продольной оси.
133. Устройство разделения частиц по п.132, отличающееся тем, что головки сперматозоидов имеют длину по продольной оси, составляющую приблизительно девяти микрометрам, при этом пятно облучения имеет высоту приблизительно 20 мкм.
134. Устройство разделения частиц по п.131, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна характеристика дифференцирования полового признака содержит разницу в количестве ядерной ДНК неповрежденных живых клеток спермы, а источник излучения света содержит светоэмиссионный материал, связанный с ядерной ДНК, и приспособленный для излучения света по-разному, в зависимости от разности в количестве ядерной ДНК, при этом детектор выполнен с возможностью генерации, по меньшей мере, одного сигнала в соответствии с излучением.
135. Устройство разделения частиц по п.134, отличающееся тем, что дополнительно содержит анализатор, реагирующий на детектор и способный разделять указанную, по меньшей мере, одну неповрежденную живую клетку спермы, в зависимости от разницы в количестве ядерной ДНК.
136. Устройство разделения частиц по п.135, отличающееся тем, что разница в количестве ядерной ДНК содержит разность между клетками спермы, несущими Х-хромосому, и клетками спермы, несущими Y-хромосому.
137. Устройство разделения частиц по п.136, отличающееся тем, что дополнительно содержит устройство заряда капелек, соединенное с анализатором и выполненное с возможностью заряда капелек по-разному, в зависимости от разности в количестве ядерной ДНК.
138. Устройство разделения частиц по п.129, отличающееся тем, что дополнительно содержит устройство заряда капелек, соединенное с анализатором и выполненное с возможностью заряда капелек по-разному, в зависимости от различий в объеме головок клеток спермы, причем разница в объеме головок клеток спермы содержит разницу между клетками спермы, несущими Х-хромосому, и клетками спермы, несущими Y-хромосому.
139. Устройство разделения частиц по п.137 или 138, отличающееся тем, что дополнительно содержит разделитель капелек, выполненный с возможностью разделения капелек в зависимости от их заряда.
140. Устройство разделения частиц по п.139, отличающееся тем, что дополнительно содержит, по меньшей мере, один контейнер для сбора капелек, содержащих клетки спермы, несущие Х-хромосому, в качестве популяции, несущей Х-хромосому.
141. Устройство разделения частиц по п.139, отличающееся тем, что дополнительно содержит, по меньшей мере, один контейнер для сбора капелек, содержащих клетки спермы, несущие Y-хромосому, в качестве популяции, несущей Y-хромосому.
142. Устройство разделения частиц по п.125, отличающееся тем, что детектор содержит, по меньшей мере, одну трубку фотоумножителя, выполненную с возможностью преобразования света от источника излучения в, по меньшей мере, один сигнал, при этом трубка фотоумножителя имеет обычный диапазон рабочего напряжения и способна работать за пределами обычного диапазона рабочего напряжения.
143. Устройство разделения частиц по п.142, отличающееся тем, что обычный диапазон рабочего напряжения трубки фотоумножителя находится в диапазоне от приблизительно 400 до приблизительно 999 В.
144. Устройство разделения частиц по п.143, отличающееся тем, что трубка фотоумножителя приспособлена для работы в диапазоне от приблизительно 0 до приблизительно 300 В.
145. Устройство разделения частиц по п.140 или 141, отличающееся тем, что выполнено с возможностью обеспечения популяции, несущей Х-хромосому, и популяции, несущей Y-хромосому, клеток спермы, имеющих степень чистоты, выбранную из группы, состоящей из: от 90 до приблизительно 100%, от приблизительно 91 до приблизительно 100%, от приблизительно 92 до приблизительно 100%, от приблизительно 93 до приблизительно 100%, от приблизительно 94 до приблизительно 100%, от приблизительно 95 до приблизительно 100%, от приблизительно 96 до приблизительно 100%, от приблизительно 97 до приблизительно 100%, от приблизительно 98 до приблизительно 100%, от приблизительно 99 до приблизительно 100%.
146. Устройство разделения частиц по п.145, отличающееся тем, что выполнено с возможностью установления вероятности отделимых событий, выбранной из группы, состоящей, по меньшей мере, из: 5000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 6000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 7000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 8000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 9000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 10000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 11000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 12000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 13000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 14000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 15000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 16000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 17000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 18000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 19000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 20000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 21000 отделимых событий в секунду.
147. Устройство разделения частиц по п.146, отличающееся тем, что выполнено с возможностью обеспечения скорости разделения, выбранной из группы, состоящей из: по меньшей мере, 500 разделений в секунду, по меньшей мере, 1000 разделений в секунду, по меньшей мере, 2000 разделений в секунду, по меньшей мере, 3000 разделений в секунду, по меньшей мере, 4000 разделений в секунду, по меньшей мере, 5000 разделений в секунду, по меньшей мере, 6000 разделений в секунду, по меньшей мере, 7000 разделений в секунду, по меньшей мере, 8000 разделений в секунду, по меньшей мере, 9000 разделений в секунду, по меньшей мере, 10000 разделений в секунду, 11000 разделений в секунду.
148. Устройство разделения частиц, содержащее:
а. частицы, содержащие, по меньшей мере, одну характеристику дифференцирования частицы;
b. источник излучения света, который по-разному реагирует на указанные характеристики дифференцирования частиц;
с. по меньшей мере, одну трубку фотоумножителя, которая способна преобразовать свет от источника, по меньшей мере, в один сигнал и имеет обычный диапазон рабочего напряжения, при этом трубка фотоумножителя способна работать за пределами указанного обычного диапазона рабочего напряжения; и
d. анализатор, реагирующий на, по меньшей мере, один сигнал, который дифференцирует частицы в зависимости от характеристик дифференциирования частиц.
149. Устройство разделения частиц по п.148, отличающееся тем, что обычный диапазон рабочих напряжений трубки фотоумножителя составляет от приблизительно 400 до приблизительно 999 В.
150. Устройство разделения частиц по п.149, отличающееся тем, что трубка фотоумножителя приспособлена для работы в диапазоне от приблизительно 0 до приблизительно 300 В.
151. Устройство разделения частиц по п.148, отличающееся тем, что дополнительно содержит источник облучения, генерирующий пучок облучения, который реагирует на указанные частицы.
152. Устройство разделения частиц по п.151, отличающееся тем, что источник излучения содержит светоэмиссионный материал, связанный с частицами и способный излучать свет в ответ на облучение пучком.
153. Устройство разделения частиц по п.152, отличающееся тем, что светоэмиссионный материал, связанный с частицами, содержит краситель, связанный с ядерной ДНК клеток спермы.
154. Устройство разделения частиц по п.153, отличающееся тем, что характеристики дифференцирования частиц содержат различие в количестве красителя, связанного с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Х-хромосому, и ядерной ДНК клеток спермы, несущих Y-хромосому.
155. Устройство разделения частиц по п.152, отличающееся тем, что частицы содержат асимметричную частицу.
156. Устройство разделения частиц по п.155, отличающееся тем, что дополнительно содержит оптическое средство, предназначенное для фокусировки пучка облучения, реагирующего на частицы и фокусировки пучка для получения пятна облучения с высотой от величины, приблизительно равной длине асимметричной частицы по ее продольной оси до величины, приблизительно в три раза большей, чем длина асимметричной частицы по продольной оси.
157. Устройство разделения частиц по п.156, отличающееся тем, что дополнительно содержит поток текучей среды, в который вводят частицы.
158. Устройство разделения частиц по п.157, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна характеристика дифференцирования частицы содержит ориентацию асимметричной частицы в потоке текучей среды, а трубка фотоумножителя способна по-разному реагировать на свет, излучаемый светоэмиссионным материалом в зависимости от характеристики ориентации частицы, при этом анализатор, соединенный с трубкой фотоумножителя, выполнен с возможностью разделения асимметричных частиц в зависимости от их ориентации в потоке текучей среды.
159. Устройство разделения частиц по п.158, отличающееся тем, что асимметричные частицы содержат клетки спермы, имеющие головки клетки спермы.
160. Устройство разделения частиц по п.159, отличающееся тем, что головки клетки спермы клеток спермы имеют длину по продольной оси, равную приблизительно девяти микрометрам, а пятно облучения имеет высоту приблизительно 20 мкм.
161. Устройство разделения частиц по п.148, отличающееся тем, что частицы имеют объем, и, по меньшей мере, одна характеристика дифференцирования частиц содержит разницу в объеме этих частиц.
162. Устройство разделения частиц по п.161, отличающееся тем, что светоэмиссионный источник излучает пучок электромагнитного излучения, проходящий через объем частицы, и имеет исходные характеристики формы колебаний, изменяемые этим объемом частиц.
163. Устройство разделения частиц по п.162, отличающееся тем, что трубка фотоумножителя способна реагировать на характеристики формы колебаний, изменяемые объемом частиц.
164. Устройство разделения частиц по п.163, отличающееся тем, что в котором анализатор, реагирующий на, по меньшей мере, один сигнал, который дифференцирует частицы в зависимости от характеристик дифференцирования частиц, разделяет частицы в зависимости от разницы объема.
165. Устройство разделения частиц по п.164, отличающееся тем, что разница в объеме содержит разницу между клетками спермы, несущими Х-хромосому и клетками спермы, несущими Y-хромосому.
166. Устройство разделения частиц по п.160, отличающееся тем, что дополнительно содержит средство образования множества капелек, отделяющихся от потока текучей среды, каждая из которых захватывает одну из клеток спермы.
167. Устройство разделения частиц по п.165, отличающееся тем, что дополнительно содержит средство образования множества капелек, отделяющихся от потока текучей среды, каждая из которых захватывает одну из клеток спермы.
168. Устройство разделения частиц по п.166, отличающееся тем, что капельки, отделяющиеся от потока текучей среды, имеют размер, достаточный для обволакивания одной из клеток спермы.
169. Устройство разделения частиц по п.168, отличающееся тем, что дополнительно содержит сопло, имеющее отверстие диаметром приблизительно 100 мкм.
170. Устройство разделения частиц по п.166, отличающееся тем, что дополнительно содержит устройство заряда капелек, соединенное с анализатором, в котором капельки получают разный заряд в зависимости от разницы в количестве красителя, связанного с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Х-хромосому и с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Y-хромосому.
171. Устройство разделения частиц по п.167, отличающееся тем, что дополнительно содержит устройство заряда капелек, соединенное с анализатором, в котором капельки получают разный заряд, в зависимости от разницы в объеме головок клеток сперматозоидов, причем разница в объеме головок клеток сперматозоидов содержит информацию о различии клеток спермы, несущих Х-хромосому, и клеток спермы, несущих Y-хромосому.
172. Устройство разделения частиц по п.170, отличающееся тем, что дополнительно содержит разделитель капелек на основе изменения их заряда.
173. Устройство разделения частиц по п.171, отличающееся тем, что дополнительно содержит разделитель капелек на основе изменения их заряда.
174. Устройство разделения частиц по п.172, отличающееся тем, что дополнительно содержит контейнеры для сбора, связанные с разделителем капелек и приспособленные для сбора популяции клеток спермы, несущих Х-хромосому, или популяции клеток спермы, несущих Y-хромосому.
175. Устройство разделения частиц по п.173, отличающееся тем, что дополнительно содержит контейнеры для сбора, связанные с разделителем капелек и приспособленные для сбора популяции клеток спермы, несущих Х-хромосому, или популяции клеток спермы, несущих Y-хромосому.
176. Устройство, предназначенное для разделения частиц по п.174 или 175, отличающееся тем, что выполнено с возможностью обеспечения популяции клеток спермы, несущих X-хромосому, и популяции клеток спермы, несущих Y-хромосому, имеющими степень чистоты разделения, выбранную из группы, состоящей из: от 90 до приблизительно 100%, от приблизительно 91 до приблизительно 100%, от приблизительно 92 до приблизительно 100%, от приблизительно 93 до приблизительно 100%, от приблизительно 94 до приблизительно 100%, от приблизительно 95 до приблизительно 100%, от приблизительно 96 до приблизительно 100%, от приблизительно 97 до приблизительно 100%, от приблизительно 98 до приблизительно 100%, от приблизительно 99 до приблизительно 100%.
177. Устройство разделения частиц по п.176, отличающееся тем, что выполнено с возможностью установления вероятности отделимых событий, выбранную из группы, состоящей, по меньшей мере, из: 5000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 6000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 7000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 8000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 9000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 10000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 11000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 12000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 13000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 14000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 15000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 16000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 17000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 18000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 19000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 20000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 21000 отделимых событий в секунду.
178. Устройство разделения частиц по п.177, отличающееся тем, что на этапе разделения клеток спермы скорости разделения, выбранной из группы, состоящей из: по меньшей мере, 500 разделений в секунду, по меньшей мере, 1000 разделений в секунду, по меньшей мере, 2000 разделений в секунду, по меньшей мере, 3000 разделений в секунду, по меньшей мере, 4000 разделений в секунду, по меньшей мере, 5000 разделений в секунду, по меньшей мере, 6000 разделений в секунду, по меньшей мере, 7000 разделений в секунду, по меньшей мере, 8000 разделений в секунду, по меньшей мере, 9000 разделений в секунду, по меньшей мере, 10000 разделений в секунду, 11000 разделений в секунду.
179. Устройство разделения частиц по п.178, отличающееся тем, что выполнено с возможностью обеспечения на этапе формирования капелек, в каждой из которых содержится одна из захваченных клеток спермы, скорости формирования капелек, выбранной из группы, состоящей из: по меньшей мере, 10000 капелек в секунду, по меньшей мере, 20000 капелек в секунду, по меньшей мере, 30000 капелек в секунду, по меньшей мере, 40000 капелек в секунду, по меньшей мере, 50000 капелек в секунду, по меньшей мере, 60000 капелек в секунду, по меньшей мере, 70000 капелек в секунду, по меньшей мере, 80000 капелек в секунду, по меньшей мере, 90000 капелек в секунду, по меньшей мере, 100000 капелек в секунду.
180. Устройство разделения частиц по п.179, отличающееся тем, что клетки спермы содержат клетки спермы млекопитающего - представителя быков.
181. Устройство разделения частиц по п.179, отличающееся тем, что клетки спермы содержат клетки спермы млекопитающего - представителя лошадей.
182. Устройство разделения частиц по п.179, отличающееся тем, что клетки спермы содержат клетки спермы млекопитающего - представителя баранов.
183. Устройство разделения частиц, содержащее:
а. асимметричные частицы;
b. источник облучения, генерирующий пучок облучения, реагирующий на асимметричные частицы;
с. оптическое средство, предназначенное для фокусирования пучка облучения, с обеспечением формирования пятна облучения высотой от величины, приблизительно равной длине асимметричных частиц по продольной оси, до величины, приблизительно в три раза большей длины асимметричных частиц по продольной оси;
d. светоэмиссионный материал, соединенный с асимметричными частицами, способный излучать свет в ответ на воздействия пучка облучения;
е. детектор, реагирующий на указанный свет.
184. Устройство разделения частиц по п.183, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна асимметричная частица содержит, по меньшей мере, одну клетку спермы.
185. Устройство разделения частиц по п.184, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна клетка спермы содержит головку, имеющую длину по продольной оси, равную приблизительно девяти микрометрам, и пятно облучения имеет высоту приблизительно 20 мкм.
186. Устройство разделения частиц по п.183, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна асимметричная частица имеет, по меньшей мере, одну характеристику дифференцирования частиц.
187. Устройство разделения частиц по п.186, отличающееся тем, что дополнительно содержит поток текучей среды.
188. Устройство разделения частиц по п.187, отличающееся тем, что, по меньшей мере, одна характеристика дифференцирования частиц содержит ориентацию асимметричной частицы в потоке текучей среды, при этом детектор выполнен с возможностью разной реакции на указанный свет, излучаемый светоэмиссионным материалом в зависимости от характеристик ориентации частиц.
189. Устройство разделения частиц по п.188, отличающееся тем, что дополнительно содержит анализатор, соединенный с детектором.
190. Устройство разделения частиц по п.189, отличающееся тем, что анализатор способен дифференцировать асимметричные частицы в зависимости от ее ориентации в потоке текучей среды.
191. Устройство разделения частиц по п.190, отличающееся тем, что светоэмиссионный материал, соединенный с, по меньшей мере, одной асимметричной частицей, содержит краситель, связанный с ядерной ДНК клеток спермы.
192. Устройство разделения частиц по п.191, отличающееся тем, что характеристика дифференцирования частиц содержит разницу в количестве указанного красителя, связанного с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Х-хромосому и с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Y-хромосому.
193. Устройство разделения частиц по п.192, отличающееся тем, что детектор содержит, по меньшей мере, одну трубку фотоумножителя с обычным диапазоном рабочего напряжения, способную работать за пределами указанного обычного диапазона рабочего напряжения.
194. Устройство разделения частиц по п.193, отличающееся тем, что обычный диапазон рабочего напряжения трубки фотоумножителя составляет от приблизительно 400 до приблизительно 999 В.
195. Устройство разделения частиц по п.194, отличающееся тем, что трубка фотоумножителя способна работать в диапазоне от приблизительно 0 до приблизительно 300 В.
196. Устройство разделения частиц по п.193, отличающееся тем, что дополнительно содержит средство отделения капелек от потока текучей среды, так, что каждая из них захватывает одну из указанных частиц.
197. Устройство разделения частиц по п.196, отличающееся тем, что капельки, отделяемые от потока текучей среды, имеют размер, достаточный для обволакивания одной из клеток спермы, причем клетки спермы содержат неповрежденные живые клетки спермы, имеющие, по меньшей мере, головку, а также шейку и хвостик.
198. Устройство разделения частиц по п.197, отличающееся тем, что дополнительно содержит сопло, имеющее отверстие диаметром приблизительно 100 мкм.
199. Устройство разделения частиц по п.196, отличающееся тем, что дополнительно содержит устройство заряда капелек, соединенное с анализатором, в котором капельки получают различный заряд, в зависимости от разницы в количестве красителя, связанного с ядерной ДНК клеток спермы, несущих X-хромосому, и с ядерной ДНК клеток спермы, несущих Y-хромосому.
200. Устройство разделения частиц по п.199, отличающееся тем, что дополнительно содержит разделитель капелек в зависимости от заряда указанной капельки.
201. Устройство разделения частиц по п.200, отличающееся тем, что дополнительно содержит, по меньшей мере, один накопительный контейнер, приспособленный для сбора капелек клеток спермы, несущих Х-хромосому, в качестве популяции, несущей Х-хромосому.
202. Устройство разделения частиц по п.200, отличающееся тем, что дополнительно содержит, по меньшей мере, один накопительный контейнер для сбора капелек клеток спермы, несущих Y-хромосому, в качестве популяции, несущей Y-хромосому.
203. Устройство разделения частиц по п.201 или 202, отличающееся тем, что выполнено с возможностью чистоты разделения популяции, несущей Х-хромосому, и популяции, несущей Y-хромосому, клеток спермы выбранной из группы, состоящей из: от 90 до приблизительно 100%, от приблизительно 91 до приблизительно 100%, от приблизительно 92 до приблизительно 100%, от приблизительно 93 до приблизительно 100%, от приблизительно 94 до приблизительно 100%, от приблизительно 95 до приблизительно 100%, от приблизительно 96 до приблизительно 100%, от приблизительно 97 до приблизительно 100%, от приблизительно 98 до приблизительно 100%, от приблизительно 99 до приблизительно 100%.
204. Устройство разделения частиц по п.203, отличающееся тем, что выполнено с возможностью установления вероятности отделимых событий, выбранную из группы, состоящей, по меньшей мере, из: 5000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 6000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 7000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 8000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 9000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 10000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 11000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 12000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 13000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 14000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 15000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 16000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 17000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 18000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 19000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 20000 отделимых событий в секунду, по меньшей мере, 21000 отделимых событий в секунду.
205. Устройство, предназначенное для разделения частиц, по п.204, отличающееся тем, что выполнено с возможностью обеспечения на этапе разделения клеток спермы скорости разделения, выбранной из группы, состоящей из: по меньшей мере, 500 разделений в секунду, по меньшей мере, 1000 разделений в секунду, по меньшей мере, 2000 разделений в секунду, по меньшей мере, 3000 разделений в секунду, по меньшей мере, 4000 разделений в секунду, по меньшей мере, 5000 разделений в секунду, по меньшей мере, 6000 разделений в секунду, по меньшей мере, 7000 разделений в секунду, по меньшей мере, 8000 разделений в секунду, по меньшей мере, 9000 разделений в секунду, по меньшей мере, 10000 разделений в секунду, 11000 разделений в секунду.
206. Устройство, предназначенное для разделения частиц по п.205, отличающееся тем, что выполнено с возможностью обеспечения на этапе формирования капелек, в каждой из которых содержится одна из захваченных клеток спермы, скорости формирования капелек, выбранной из группы, состоящей из: по меньшей мере, 10000 капелек в секунду, по меньшей мере, 20000 капелек в секунду, по меньшей мере, 30000 капелек в секунду, по меньшей мере, 40000 капелек в секунду, по меньшей мере, 50000 капелек в секунду, по меньшей мере, 60000 капелек в секунду, по меньшей мере, 70000 капелек в секунду, по меньшей мере, 80000 капелек в секунду, по меньшей мере, 90000 капелек в секунду, по меньшей мере, 100000 капелек в секунду.
207. Устройство разделения частиц по п.206, отличающееся тем, что клетки спермы содержат клетки спермы млекопитающего - представителя быков.
208. Устройство разделения частиц по п.206, отличающееся тем, что клетки спермы содержат клетки спермы млекопитающего - представителя лошадей.
209. Устройство разделения частиц по п.206, отличающееся тем, что клетки спермы содержат клетки спермы млекопитающего - представителя баранов.