Проточные ячейки с покрытием из гидрогеля - RU2019139643A
Код документа: RU2019139643A
Формула
1. Проточная ячейка, содержащая:
структурированную подложку, включающую углубления, разделенные промежуточными участками;
поверхностный химический состав для секвенирования, присоединенный к каждому из углублений, при этом указанный поверхностный химический состав для секвенирования включает:
слой функционализированного покрытия; и
праймер, привитый к слою функционализированного покрытия; и
гидрогель на по меньшей мере привитом слое функционализированного покрытия.
2. Проточная ячейка по п. 1, в которой гидрогель также присутствует по меньшей мере на некоторых промежуточных участках.
3. Проточная ячейка по любому из пп. 1 или 2, в которой слой функционализированного покрытия представляет собой сополимер N-(5- азидоацетамидилпентил)акриламида и акриламида.
4. Проточная ячейка по любому из пп 1-3, в которой гидрогель выбран из группы, состоящей из сополимера N-(5-азидоацетамидилпентил)акриламида и акриламида, сшитого полиакриламида, агарозного геля и сшитого полиэтиленгликоля.
5. Проточная ячейка по любому из пп. 1-4, в которой гидрогель не является привитым.
6. Проточная ячейка по любому из пп. 1-5, в которой:
структурированная подложка включает по меньшей мере один проточный канал;
указанные углубления заданы в указанном по меньшей мере одном проточном канале; при этом
указанная проточная ячейка дополнительно содержит разделительный слой, присоединенный к другим промежуточным участкам структурированной подложки таким образом, что указанный разделительный слой ограничивает периметр по меньшей мере одного проточного канала.
7. Проточная ячейка по п. 6, дополнительно содержащая крышку, присоединенную к разделительному слою.
8. Способ получения проточной ячейки, включающий:
нанесение слоя функционализированного покрытия в углубления структурированной подложки проточной ячейки, где указанные углубления разделены промежуточными участками;
прививку праймера к слою функционализированного покрытия с образованием привитого слоя функционализированного покрытия в углублениях; и
нанесение гидрогеля на по меньшей мере указанный привитой слой функционализированного покрытия.
9. Способ по п. 8, в котором гидрогель выбран из группы, состоящей из сополимера N-(5-азидоацетамидилпентил)акриламида и акриламида, сшитого полиакриламида, агарозного геля и сшитого полиэтиленгликоля.
10. Способ по п. 8 или 9, в котором гидрогель расположен на привитом слое функционализированного покрытия и на некоторых промежуточных участках.
11. Способ по любому из пп. 8-10, в котором перед нанесением слоя функционализированного покрытия указанный способ дополнительно включает обработку поверхности структурированной подложки проточной ячейки для присоединения к указанной поверхности функциональной группы с образованием обработанных углублений и обработанных промежуточных участков.
12. Способ по п. 11, в котором нанесение слоя функционализированного покрытия в углубления включает:
нанесение слоя функционализированного покрытия в обработанные углубления и на обработанные промежуточные участки; и
удаление слоя функционализированного покрытия шлифовкой с обработанных промежуточных участков.
13. Способ по любому из пп. 8-12, в котором нанесение гидрогеля включает нанесение водной смеси, включающей от приблизительно 0,001% до приблизительно 0,1% (масс./об.) гидрогелевого материала.
14. Способ по любому из пп. 8-13, в котором периметр структурированной подложки проточной ячейки имеет соединенный c ним разделительный слой, причем после нанесения гидрогеля указанный способ дополнительно включает прикрепление крышки к разделительному слою.
15. Способ по любому из пп. 8-14, в котором после нанесения слоя функционализированного покрытия и перед прививкой праймера указанный способ дополнительно включает прикрепление крышки к по меньшей мере некоторым промежуточным участкам.
16. Способ по любому из пп. 8, 9 и 11-15, в котором нанесение гидрогеля включает селективное осаждение гидрогеля на привитой слой функционализированного покрытия.
17. Способ получения проточной ячейки, включающий:
присоединение силана или производного силана к поверхности структурированной подложки, включающей проточный канал с заданными в нем углублениями, при этом указанные углубления разделены промежуточными участками, образуя тем самым силанизированные углубления и силанизированные промежуточные участки;
нанесение слоя функционализированного покрытия в силанизированные углубления и на силанизированные промежуточные участки;
удаление слоя функционализированного покрытия шлифовкой с силанизированных промежуточных участков;
прививку праймера к слою функционализированного покрытия в силанизированных углублениях с образованием привитого слоя функционализированного покрытия в указанных углублениях; и
нанесение гидрогеля на привитой слой функционализированного покрытия в углублениях.
18. Способ по п. 17, в котором нанесение гидрогеля включает нанесение водной смеси, включающей от приблизительно 0,001% до приблизительно 0,1% (масс./об.) гидрогелевого материала.
19. Способ по п. 17 или 18, в котором гидрогелевый материал выбран из группы, состоящей из сополимера N-(5-азидоацетамидилпентил)акриламида и акриламида, сшитого полиакриламида, агарозного геля и сшитого полиэтиленгликоля.
20. Способ по любому из пп. 17-19, в котором:
дополнительно разделительный слой прикреплен к структурированной подложке и ограничивает периметр проточного канала; и
после нанесения гидрогеля, указанный способ дополнительно включает прикрепление крышки к разделительному слою.
21. Способ по любому из пп. 17-20, в котором после выполнения шлифовки слоя функционализированного покрытия и перед прививкой праймера указанный способ дополнительно включает прикрепление крышки к по меньшей мере некоторым промежуточным участкам.
22. Способ по любому из пп. 17-21, в котором нанесение гидрогеля включает селективное осаждение гидрогеля на привитой слой функционализированного покрытия в углублениях.
