Иммобилизация модифицированного олигонуклеотида на полимерном субстрате посредством физической адсорбции - RU2017126986A
Код документа: RU2017126986A
Формула
1. Способ иммобилизации меченного олигонуклеотида на немодифицированном полимерном субстрате, где способ включает следующие стадии:
a) получение смеси, включающей
жидкость и
меченный олигонуклеотид, и
b) нанесение смеси стадии a) на немодифицированный полимерный субстрат;
где олигонуклеотид иммобилизуют на немодифицированном полимерном субстрате посредством физической адсорбции с помощью метки олигонуклеотида, и где метка для иммобилизации ковалентно связана с олигонуклеотидом, где полимерным субстратом является циклический олефиновый полимер (СОС).
2. Способ по п. 1, где меченный олигонуклеотид включает олигонуклеотид, к которому присоединена по меньшей мере одна химическая группа, где химическая группа подходит для иммобилизации меченного олигонуклеотида на немодифицированном полимерном субстрате посредством физической адсорбции.
3. Способ по любому из предшествующих пунктов, где меченный олигонуклеотид включает олигонуклеотид, к которому присоединена по меньшей мере одна химическая группа, где химическая группа предпочтительно имеет молекулярную массу от 0,1 до 1000 кДа, от 0,1 до 50 кДа, от 0,1 до 1,5 кДа, от 0,15 до 1 кДа, от 0,2 до 0,8 кДа необязательно где указанная химическая группа представляет собой химическую группу, предпочтительно выбираемую из группы, состоящей из биотина или сульфородамина 101 кислого хлорида (CAS номер 82354-19-6; Texas Red).
4. Способ по любому из предшествующих пунктов, где длина меченного олигонуклеотида составляет от около 2 до 2000, от около 2 до 500, от около 2 до около 200 нуклеотидов, от около 2 до около 100 нуклеотидов, от около 2 до около 50 нуклеотидов.
5. Способ по любому из предшествующих пунктов, где способ не включает стадию УФ воздействия и где олигонуклеотид ковалентно не связан с субстратом.
6. Способ по любому из предшествующих пунктов, где за стадией b) следует стадия инкубации субстрата и/или где за стадиями способа по любому из пп. 1-5 следует стадия сушки субстрата и/или где за стадиями способа по любому из пп. 1-5 следует стадия промывки субстрата.
7. Способ по любому из предшествующих пунктов, где нанесение смеси стадии a) на немодифицированный полимерный субстрат осуществляют контактной печатью или неконтактной печатью, предпочтительно неконтактной печатью.
8. Способ иммобилизации интересующей молекулы на немодифицированном полимерном субстрате, где способ включает стадии способа иммобилизации меченного олигонуклеотида по любому из пп. 1-7, где меченный олигонуклеотид, получаемый на стадии a), дополнительно включает интересующую молекулу, которая присоединена к олигонуклеотиду.
9. Способ иммобилизации интересующей молекулы на немодифицированном полимерном субстрате, где способ включает стадии способа иммобилизации меченного олигонуклеотида по любому из пп. 1-7 и дополнительно по меньшей мере стадию:
c) гибридизации олигонуклеотида, к которому присоединена интересующая молекула.
10. Применение метки, присоединенной к олигонуклеотиду, для иммобилизации меченного олигонуклеотида на немодифицированном полимерном субстрате путем физической адсорбции, где полимерным субстратом является циклический олефиновый полимер (СОС).
11. Микрочип, полученный способом по любому из пп. 1-9.
12. Микрочип, включающий
немодифицированный полимерный субстрат и
меченный олигонуклеотид, который иммобилизован на полимерном субстрате посредством метки олигонуклеотида;
где не существует ковалентной связи между олигонуклеотидом и немодифицированным полимерным субстратом, и где метка олигонуклеотида ковалентно связана с олигонуклеотидом, где полимерным субстратом является циклический олефиновый полимер (СОС).
13. Микрочип по п. 12, где меченный олигонуклеотид дополнительно включает интересующую молекулу, которая присоединена к меченному олигонуклеотиду.
14. Микрочип по п. 12, дополнительно включающий олигонуклеотид, к которому присоединена интересующая молекула, где указанный олигонуклеотид гибридизован с меченным олигонуклеотидом, иммобилизованным на полимерном субстрате.
15. Диагностический набор, включающий микрочип, включающий олигонуклеотиды, которые иммобилизованы в соответствии со способом по любому из пп. 1-7, и контрольную матрицу, содержащую определенное количество известной меченной нуклеиновой кислоты, комплементарной по меньшей мере одному указанному иммобилизованному олигонуклеотиду.
