Растения со сниженным содержанием аспарагина - RU2018112407A

1. Мутантное, неприродное или трансгенное растение или его часть, которое характеризуется сниженной экспрессией или активностью аспарагинсинтетазы, причем указанная аспарагинсинтетаза содержит, состоит из или состоит по существу из:

полинуклеотидной последовательности, содержащей, состоящей из или состоящей по существу из последовательности, которая характеризуется идентичностью последовательности по меньшей мере 90% с SEQ ID NO:1 или идентичностью последовательности по меньшей мере 72% с SEQ ID NO:3, или SEQ ID NO:5, или SEQ ID NO:7; или

полипептида, кодируемого полинуклеотидом, описанным в (i); или

полипептида, который характеризуется идентичностью последовательности по меньшей мере 78% с SEQ ID NO:2, или SEQ ID NO:4, или SEQ ID NO:6, или SEQ ID NO:8;

причем экспрессия или активность аспарагинсинтетазы, изложенной в (i), (ii) или (iii), снижена по сравнению с контрольным растением.

2. Мутантное, неприродное или трансгенное растение или его часть по п. 1, причем указанное растение содержит по меньшей мере одно генетическое изменение в регуляторной области или в кодирующей последовательности полинуклеотида, кодирующего аспарагинсинтетазу.

3. Мутантное, неприродное или трансгенное растение или его часть по п. 1 или 2, причем указанная сниженная экспрессия или активность аспарагинсинтетазы обеспечивает снижение уровня аспарагина в обработанном или высушенном листе, полученном из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, по сравнению с уровнем аспарагина в обработанном или высушенном листе, полученном из контрольного растения, причем, предпочтительно, уровень аспарагина снижен по меньшей мере приблизительно на 17% по сравнению с контрольным растением; и/или

указанная сниженная экспрессия или активность аспарагинсинтетазы обеспечивает снижение уровня акриламида в аэрозоле, который образуется после нагревания или сгорания обработанного или высушенного листа, полученного из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, по сравнению с обработанным или высушенным листом, полученным из контрольного растения, причем, предпочтительно, уровень акриламида в аэрозоле снижен по меньшей мере на 20% по сравнению с обработанным или высушенным листом контрольного растения; и/или

уровень аспарагина в обработанном или высушенном листе, полученном из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, является по меньшей мере приблизительно на 22% меньшим, и количество акриламида в аэрозоле, который образуется после нагревания или сгорания обработанного или высушенного листа, полученного из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, является по меньшей мере на 24% ниже по сравнению с обработанным или высушенным листом и аэрозолем из контрольного растения; предпочтительно, отличающееся тем, что уровень аспарагина в обработанном или высушенном листе, полученном из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, является по меньшей мере приблизительно на 44% меньшим, и количество акриламида в аэрозоле, который образуется после нагревания или сгорания обработанного или высушенного листа, полученного из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, является по меньшей мере на 66% ниже по сравнению с обработанным или высушенным листом и аэрозолем из контрольного растения; предпочтительно, отличающееся тем, что уровень аспарагина в обработанном или высушенном листе, полученном из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, является по меньшей мере приблизительно на 70% меньшим, и количество акриламида в аэрозоле, который образуется после нагревания или сгорания обработанного или высушенного листа, полученного из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, является по меньшей мере приблизительно на 88% ниже по сравнению с обработанным или высушенным листом и аэрозолем из контрольного растения.

4. Мутантное, неприродное или трансгенное растение или его часть по любому из предшествующих пунктов, причем уровень никотина в обработанном или высушенном листе из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения является по существу таким же, как и уровень никотина в обработанном или высушенном листе контрольного растения; и/или

образование глутамина, аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты повышено в обработанном или высушенном листе из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения по сравнению с обработанным или высушенным листом контрольного растения; и/или

указанное растение выбрано из группы, состоящей из табака или чая, предпочтительно,

5. Мутантное, неприродное или трансгенное растение или его часть по любому из предшествующих пунктов, причем указанное растение содержит по меньшей мере одну мутацию в каждой копии полинуклеотидной последовательности, кодирующей аспарагинсинтетазу, изложенную в (i), (ii) или (iii), предпочтительно, стоп-мутацию или стоп-мутации и/или фрагмент или фрагменты гена, которые препятствуют трансляции РНК-транскрипта, кодирующего аспарагинсинтетазу.

6. Мутантное, неприродное или трансгенное растение или его часть по любому из предшествующих пунктов, причем указанная нуклеотидная последовательность аспарагинсинтетазы содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую стоп-мутацию в положении, эквивалентном расположению нуклеотидной последовательности, кодирующей стоп-мутацию, в SEQ ID No. 19, 21 и 23, или указанная аспарагинсинтетаза содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую стоп-кодон, в положении, эквивалентном расположению стоп-кодона в SEQ ID No. 20, 22 и 24.

7. Мутантное, неприродное или трансгенное растение или его часть по любому из предшествующих пунктов, причем указанная аспарагинсинтетаза содержит нуклеотидную последовательность, которая выбрана из группы, состоящей из SEQ ID No. 19, 21 и 23, или кодируется нуклеотидной последовательностью, которая выбрана из группы, состоящей из SEQ ID No. 19, 21 и 23, или содержит, состоит из или состоит по существу из полипептидной последовательности, представленной в SEQ ID No. 20, 22 и 24; и/или

количество биомассы листа из указанного мутантного, неприродного или трансгенного растения или части указанного растения, является по существу таким же, как и количество биомассы листа из контрольного растения.

8. Мутантное, неприродное или трансгенное растение или его часть по любому из пп. 3-7, причем указанный лист представляет собой лист, обработанный воздушной обработкой, предпочтительно при этом обработанный воздушной обработкой лист является обработанным на солнце или обработанным огневой обработкой; или указанный лист высушен воздушной сушкой, предпочтительно при этом высушенный воздушной сушкой лист является высушенным на солнце или высушенным огневой сушкой.

9. Растительный материал или обработанный или высушенный растительный материал из растения по любому из пп. 1-8.

10. Растительный продукт, содержащий по меньшей мере часть растения по любому из пп. 1-8 или растительный материал по п. 9.

11. Способ получения растительного материала со сниженными уровнями аспарагина и сниженными уровнями акриламида в аэрозоле, полученном из укакзанного растительного материала, по сравнению с растительным материалом из контрольного растения, причем указанный способ включает следующие стадии:

обеспечение растения или части указанного растения, содержащего полинуклеотид, содержащий состоящий из или состоящий по существу из последовательности, кодирующей аспарагинсинтетазу, которая характеризуется идентичностью последовательности по меньшей мере 90% с SEQ ID NO:1 или идентичностью последовательности по меньшей мере 72% с SEQ ID NO:3, или SEQ ID NO:5, или SEQ ID NO:7;

снижение экспрессии полинуклеотида или активности белка, кодируемого указанным полинуклеотидом, в растении или части указанного растения ;

сбор растительного материала из растения или части указанного растения;

сушку или обработку растительного материала;

необязательно, измерение уровней аспарагина в растении или части указанного растения и/или измерение уровней акриламида в аэрозоле, полученном из растения или части указанного растения; и

получение обработанного или высушенного растительного материала со сниженными уровнями аспарагина и сниженными уровнями акриламида в аэрозоле, полученном из указанного растительного материала, причем, предпочтительно, уровень никотина является по существу таким же, как и уровень никотина в контрольном растении; причем, предпочтительно, образование глутамина, аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты повышено по сравнению с обработанным или высушенным листом контрольного растения.

12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что указанный растительный материал обрабатывают или высушивают в течение по меньшей мере 3 дней после сбора; и/или

отличающийся тем, что указанный растительный материал обрабатывают воздушной обработкой, предпочтительно при этом обработанный воздушной обработкой лист является обработанным на солнце или обработанным огневой обработкой; или указанный растительный материал высушен воздушной сушкой или сушкой на солнце или выобработан огневой сушкой.

13. Растительный материал, полученный или получаемый посредством способа по п. 11 или 12.

14. Способ получения растительного материала со сниженными уровнями аспарагина и сниженными уровнями акриламида в аэрозоле, полученном из обработанного или высушенного растительного материала, по сравнению с контрольным растением, причем указанный способ включает следующие стадии:

(а) обеспечение растения по любому из пп. 1-8 или растительного материала по п. 9;

(b) сбор растительного материала из растения;

(c) обработку или сушку растительного материала в течение периода времени; и

(d) получение обработанного или высушенного растительного материала, который содержит сниженные уровни аспарагина и сниженные уровни акриламида в аэрозоле, полученном из обработанного или высушенного растительного материала, причем, предпочтительно, уровень никотина является по существу таким же, как и уровень никотина в контрольном растении; причем, предпочтительно, образование глутамина, аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты повышено по сравнению с контрольным растением.

15. Табачный продукт или курительное изделие, содержащее растительный материал по п. 9 или 13.