Гетероциклические соединения на основе n6-замещенного аденина, их применение при производстве медикаментов, косметических средств, регуляторов роста,фармацевтические и косметические композиции или регуляторы роста на их основе - RU2302421C2

Чертежи

Показать все 9 чертежа(ей)

Описание

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новым гетероциклическим производным на основе N⁶-замещенного аденина, обладающего противораковыми, митотическими, иммуноподавительными и противостареющими свойствами для растительных, животных и человеческих клеток, способам их приготовления и их применению в качестве лекарственных препаратов, фармацевтических составов, которые содержат эти производные как активное соединение, и к применению этих производных для приготовления лекарственных препаратов, косметических препаратов, в биотехнологических процессах, в косметике и в сельском хозяйстве.

Предпосылки к созданию изобретения

Фитогормоны являются хорошо испытанными растительными регуляторами. Среди них важное место занимают цитокинины. Структурно все природные цитокинины принадлежат к гомогенной группе производных N⁶-замещенного аденина, играющих важную роль во многих различных процессах развития, включая деление, рост и дифференциацию клеток, а также развитие цветов и фруктов. Они могут выводить семена из состояния покоя, ингибировать апикальную доминантность и стимулировать рост боковых ростков, тормозить старение клеток, повышать стрессовую устойчивость, воздействовать на проницаемость клеточной мембраны и вызывать накопление различных метаболитов в месте их применения (Letham a Palni 1983 - Ann. Rev. Plant. Physiol. 34:163-197, 1983, Mok, D.W.S., Mok, M.C.: Cytokinins: Chemistry, Activity and Function. CRC Press, Boca Raton, London, Tokyo 1994).

Их взаимодействие с ауксинами особенно важно при стимуляции деления клеток и регуляции дифференциации клеток в растительных тканевых культурах (Skoog, Miller 1957). Общее определение цитокининов как группы регуляторов роста растений также основывается на этом эффекте (Skoog, F., Armstrong, D.J.: Cytokinins. - Ann. Rev. Plant. Physiol. 21:359-384, 1970). 6-бензиламинопурин (БАП) вместе с кинетином обычно используется как активный цитокинин для растительных культур in vitro. Это соединение в течение долгого времени считалось чисто синтетическим, однако недавно было доказано его природное происхождение у растений. Обычно к цитокининам относят также соединения, имеющие ограниченную или не имеющие биологическую активность (7- и 9-глюкозиды, аминокислотные конъюгаты, некоторые гипермодифицированные цитокинины в tPHK). По этой причине соединения, структурно производные от N⁶-замещенного аденина, в таком применении также относятся к цитокининам.

Поскольку все живые организмы на Земле эволюционно развивались вместе в течение многих миллионов лет, можно допустить присутствие регуляторного взаимодействия растительных соединений, какими являются цитокинины, у животных и людей. Цитокининпроизводные соединения, вероятно, воздействуют на многие различные молекулярные механизмы в клетках животных и людей. Мы недавно обнаружили, что новые поколения противовоспалительных, противораковых, иммуноподавительных, антивирусных и других лекарственных препаратов могут быть основаны на N⁶-замещенных пуринах и их производных.

Целью настоящего изобретения является предоставление противораковых, иммуноподавительных, регулирующих рост, морфогенетически активных и противостарительных гетероциклических соединений, имеющих улучшенные показатели по селективности и эффективности, т.е. менее токсичных и при этом более эффективных, чем известные до этого аналоги.

Описание изобретения

Объектом настоящего изобретения является использование гетероциклических соединений, основанных на N⁶-замещенном аденине с общей формулой I

и его фармацевтически приемлемых солей, где

R2 является водородом, галогеном, гидрокси-, алкокси- или замещенным алкокси, амино-, гидразо-, меркапто-, метилмеркапто-, карбоксил-, циано-, нитро-, амидо-, сульфо-, сульфамидо-, ациламино-, ацилокси-, алкиламино- или замещенным алкиламино, диалкиламино-, алкилмеркапто- или замещенным алкилмеркапто, циклоалкил- и карбамоилгруппой.

R6 является R6'-X,

где Х - это -NH-;

R6' является замещенным фенилом или замещенным бензилом, где родовые группы замещения имеют значения, идентичные определениям соответствующих групп, как определено в данном обозначении, где:

«замещенный фенил» относится к фенильной группе, которая замещается от одной до пяти функциональных групп, выбираемых из группы, содержащей галоген, алкил, гидрокси, амино, ациламино, карбамоиламино, гидразо, меркапто, алкокси или замещнный алкокси, алкилмеркапто или замещенный алкилмеркапато, алкиламино или замещенный алкиламино, амидо, карбоксил, нитро или сульфо, как это определено ниже;

«замещенный бензил» относится к фенилметильной группе, где фенильная группа замещается от одной до пяти функциональных групп, выбираемых из группы, содержащей галоген, амино, ациламино, карбамоиламино, гидразо, ацилокси, алкил, алкокси или замещенный алкокси, алкилмеркапто или замещенный алкилмеркапто, алкиламино или замещенный алкиламино, амидо, карбоксил, арил, нитро, меркапто, сульфо, или гидроксигруппами, как определено ниже;

где родовые группы замещения имеют значения, идентичные определениям соответствующих групп, как определено в данном обозначении, где:

"галоген" относится к атомам фтора, брома, хлора и йода;

"гидрокси" относится к группе -ОН;

"меркапто" относится к группе -SH;

"алкил" относится к разветвленной или неразветвленной цепи C₁-С₆, которая является насыщенной и выбирается из групп, таких как метил, пропил, изопропил, третбутил, и подобным примерам этого термина;

«алкенил» означает разветвленные или неразветвленные цепи С₁-С₆, которые содержат по крайней мере одну ненасыщенную двойную связь, которая выбирается из таких групп как аллил, винил, гексен-2-ил и подобных им;

«алкинил» означает разветвленные или неразветвленные цепи С₁-С₆, которые содержат по крайней мере одну ненасыщенную тройную связь, которая выбирается из таких групп как этинил, пропаргил и подобных им групп;

"замещенный алкил" относится к только что описанному алкилу, включающему от одного до пяти заместителей, таких как гидроксил, меркапто, алкилмеркапто, галоген, алкокси, ацилокси, амино, ациламино, гидразино, карбамоил, амидо, карбоксил, сульфо, ацил, гуанидино и им подобные, в соответствие с чем эти группы могут присоединяться к любому атому углерода алкильной части;

"алкокси или замещенный алкокси" обозначает группу -OR, где R является алкилом, замещенным алкилом, арилалкилом, замещенным арилалкилом, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом, циклогетероалкилом или замещенным циклогетероалкилом, как определено здесь;

"алкилмеркапто или замещенный алкилмеркапто" обозначает группу -SR, где R является, как определено для группы, "алкокси или замещенным алкокси";

"сульфо" обозначает группу -SO₃R, где R является Н, алкилом или замещенным алкилом, как определено здесь;

"сульфамидо" обозначает группу SO₂NRR", где R и R" является Н, алкилом или замещенным алкилом;

"ацил" обозначает группы -C(O)R, где R является водородом, алкилом, замещенным алкилим, арилом, замещенным арилом, арилалкилом, замещенным арилалкилом, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом, как определено здесь;

"арилокси или замещенный арилокси" обозначает группы -OAr, где Ar является арилом, замещенным арилом, гетероарильной или замещенной гетероарильной группой, как определено здесь;

"алкиламино или замещенный алкиламино" обозначает группу -NRR', где R и R' могут быть независимо водородом, алкилом, замещенным алкилом, арилом, замещенным арилом, гетероарилом или замещенным гетероарилом, как определено здесь;

"амидо" обозначает группу -C(О)NRR', где R и R' могут быть независимо водородом, алкилом, замещенным алкилом, арилом, замещенным арилом, гетероарилом или замещенным гетероарилом, как определено здесь;

"карбоксил" обозначает группу -C(О)OR, где R является водородом, алкилом, замещенным алкилом, арилом, замещенным арилом, гетарилом или замещенным гетарилом, как определено здесь;

"ациламино" обозначает группу -NHCOR, где R может быть алкилом, замещенным алкилом, гетероциклом, арилом, замещенным арилом, гетероарилом и замещенным гетероарилом, как определено здесь;

"карбамоиламино" обозначает группу NHCOOR, где R является алкилом или арилом;

"арил" или "ар" относится к ароматической карбоциклической группе, имеющей не менее одного ароматического кольца, такого как фенил или бифенил, или сложные конденсированные кольца, в которых не менее одного кольца являются ароматическими, такими как 1,2,3,4-тетрагидронафтил, нафтил, антрил или фенантрил;

"замещенный арил" относится к арилу, как только что описанному, который является произвольно замещенным от одной до пяти функциональными группами, такими как галоген, алкил, гидрокси, амино, ациламино, карбамоиламино, гидразино, меркапто, алкокси, алкилмеркапто, алкиламино, амидо, карбоксил, нитро, сульфо, как определено здесь;

"гетероцикл" относится к ненасыщенной или ароматической карбоциклической группе, имеющей в кольце не менее одного гетероатома, такого как N, О или S; кольцо может быть простым, таким как пиранил, пиридил или фурил, или сложным конденсированным, таким как хиназолинил, пуринил, хинолинил или бензофуранил, которые могут быть произвольно незамещенными или замещенными галогеном, амино, гидрокси, циано, нитро, меркапто, алкокси, алкиламино, ациламино, карбамоиламино, ацилокси, диалкиламино, алкилмеркапто, карбоксил, амидо, сульфо, сульфамидо и подобными, как определено;

"гетероарил" относится к гетероциклу, в котором не менее одного гетероциклического кольца являются ароматическими;

"замещенный гетероарил" относится к гетероциклу, произвольно моно- или полизамещенному от одной до пяти функциональными группами, такими как галогеном, амино, гидрокси, циано, нитро, меркапто, алкокси, алкиламино, ациламино, карбамоиламино, ацилокси, диалкиламино, алкилмеркапто, карбоксил, амидо, сульфо, сульфамидо и подобными, как здесь определено;

"арилалкил" относится к группе -R-Ar, где Ar является арильной группой и R является алкилом или замещенной алкильной группой, где арильные группы произвольно могут быть незамещенными или замещенными группами, такими как галоген, амино, ациламино, карбамоиламино, гидразино, ацилокси, алкил, гидроксил, алкокси, алкилмеркапто, алкиламино, амидо, карбоксил, гидрокси, арил, нитро, меркапто, сульфо и подобными, как определено;

"гетероалкил" относится к группе -R-Het, где Het является гетероциклической группой и R является алкильной группой, названные гетероалкильные группы произвольно незамещенные или замещенные группами, такими как галоген, амино, гидрокси, циано, нитро, меркапто, алкокси, алкиламино, ациламино, карбамоиламино, ацилокси, диалкиламино, алкилмеркапто, карбоксил, амидо, сульфо, сульфамидо и подобными, как здесь определено ранее;

"гетероарилалкил" относится к группе -R-Het-Ar, где Het-Ar является гетероарильной группой и R является алкилом или замещенным алкилом, тогда как гетероарилалкильные группы произвольно могут быть незамещенными или замещенными группами, такими как галоген, алкил, замещенный алкил, алкокси, алкилмеркапто, нитро, сульфо и подобными, как здесь определено ранее;

"циклоалкил" относится к двухвалентной циклической или полициклической алкильной группе, содержащей от 3 до 15 атомов углерода;

"замещенный циклоалкил" относится к циклоалкильной группе, включающей в себя от одного до пяти заместителей из группы, состоящей из галогена, амино, гидрокси, циано, нитро, меркапто, алкокси, алкиламино, карбамоиламино, ацилокси, диалкиламино, алкилмеркапто, карбоксил, амидо, сульфо, сульфамидо и подобных, как здесь определено ранее;

"циклогетероалкил" относится к циклоалкильной группе, как определено, где не менее одного из колец метиленовой группы заменено группой, выбираемой из групп NH, ОН, SH;

"замещенный циклогетероалкил" относится к циклоалкильной группе, как здесь определено, которая содержит от одного до пяти заместителей, таких как галоген, амино, гидрокси, циано, нитро, меркапто, алкокси, алкиламино, ациламино, карбамоиламино, ацилокси, диалкиламино, алкилмеркапто, карбоксил, амидо, сульфо, сульфамидо и подобные, как здесь определено ранее;

"циклоалкилалкил" обозначает группу -R-циклоалкил, где циклоалкил является циклоалкильной группой и R является алкилом или замещенным алкилом, где циклоалкильные группы произвольно могут быть незамещенными или замещенными галогеном, амино, гидрокси, циано, нитро, меркапто, алкокси, алкиламино, ациламино, карбамоиламино, ацилокси, диалкиламино, алкилмеркапто, карбоксил, амидо, сульфо, сульфамидо и подобными, как здесь определено;

"циклогетероалкилалкил" обозначает группу -R-циклогетероалкил, где R является алкилом или замещенным алкилом, где циклоалкильные группы произвольно могут быть незамещенными или замещенными галогеном, амино, гидрокси, циано, нитро, меркапто, алкокси, алкиламино, ациламино, карбамоиламино, ацилокси, диалкиламино, алкилмеркапто, карбоксил, амидо, сульфо, сульфамидо и подобными, как здесь определено ранее, и рацематы, оптические изомеры и их кислые соли, при условии, что

R6' не является следующим соединением: 4-метилбензил, 4-хлорбензил, 4-метоксибензил, 4-трифторметилбензил, 4-метилсульфонилбензил, 4-метилфенил, 2-фторфенил, 4-цианилфенил, а также при условии, что R6' не является дигидроксибензилом или дигидроксифенилом, при производстве медикаментов, косметических средств и регуляторов роста.

Особенно предпочтительным является использование следующих гетероциклических соединений, основанных на N⁶-замещенном аденине с общей формулой I и эти соединения выбираются из:

6-(2-гидрокси-3-хлороксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-3-йодбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-йодбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-йодбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-йодбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-3-бромбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-бромбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-бромбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-бромбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-3-фторбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-фторбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-фторбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-фторбензиламино)пурин, 6-(2,3-дигидрокси-3-метоксибензиламино)пурин, 6-(2, 5-дигидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2,3-дигидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,3-дигидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2, 5-дигидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-4-бромбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-4-йодбензиламино)пурин, 6-(2, 6-дигидрокси-3-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3-бромбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3-йодбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3-фторбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3, 5-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3,5-дибромбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3,5-дийодбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3,5-дифторбензиламино)пурин, 6-(2-фторбензиламино)пурин, 6-(3-фторбензиламино)пурин, 6-(4-фторбензиламино)пурин, 6-(2-бромбензиламино)пурин, 6-(3-бромбензиламино)пурин, 6-(4-бромбензиламино)пурин, 6-(2-йодбензиламино)пурин, 6-(3-йодбензиламино)пурин, 6-(4-йодбензиламино)пурин, 6-(2-хлорбензиламино)пурин, 6-(3-хлорбензиламино)пурин, 6-(4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-ацетилбензиламино)пурин, 6-(3-ацетилбензиламино)пурин, 6-(4-ацетилбензиламино)пурин, 6-(3-карбоксибензиламино)пурин, 6-(4-карбоксибензиламино)пурин, 6-(2-ацетоксибензиламино)пурин, 6-(3-ацетоксибензиламино)пурин, 6-(4-ацетоксибензиламино)пурин, 6-(2-нитробензиламино)пурин, 6-(3-нитробензиламино)пурин, 6-(4-нитробензиламино)пурин, 6-(2-сульфобензиламино)пурин, 6-(3-сульфобензиламино)пурин, 6-(4-сульфобензиламино)пурин, 6-(2-кианобензиламино)пурин, 6-(3-кианобензиламино)пурин, 6-(4-кианобензиламино)пурин, 6-(5-нитро-2-метилбензиламино)пурин, 6-(2-метилбензиламино)пурин, 6-(3-метилбензиламино)пурин, 6-(4-метиламинобензиламино)пурин, 6-(2-метоксибензиламино)пурин, 6-(3-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3-гидроксибензиламино)пурин, 6-(4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(4-гексилбензиламино)пурин, 6-(4-гексилоксибензиламино)пурин, 6-(2-формилбензиламино)пурин, 6-(3-формилбензиламино)пурин, 6-(4-формилбензиламино)пурин, 6-(2-этоксибензиламино)пурин, 6-(3-этоксибензиламино)пурин, 6-(4-этоксибензиламино)пурин, 6-(4-этилбензиламино)пурин, 6-(4-пентилбензиламино)пурин, 6-(4-пентилоксибензиламино)пурин, 6-(4-феноксибензиламино)пурин, 6-(4-фенилбензиламино)пурин, 6-(4-пропилбензиламино)пурин, 6-(4-пропилоксибензиламино)пурин, 6-(4-октилбензиламино)пурин, 6-(4-октилоксибензиламино)пурин, 6-(4-этилоксибензиламино)пурин, 6-(3,4-диацетоксибензиламино)пурин, 6-(3, 5-диацетоксибензиламино)пурин, 6-(2,5-диаминбензиламино)пурин, 6-(3,5-дибромбензиламино)пурин, 6-(3,5-дибром-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2,3-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,4-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,5-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дихлорбензиламино)пурин, 6-(3,5-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,3,4,5-тетрафторбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-3,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(5-хлор-2-фторбензиламино)пурин, 6-(2,3,4-трифторбензиламино)пурин, 6-(2,3,5-трифторбензиламино)пурин, 6-(2,4,5-трифторбензиламино)пурин, 6-(3,4,5-трифторбензиламино)пурин, 6-(2,3, 6-трифторбензиламино)пурин, 6-(3-хлир-2,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-6-фторбензиламино)пурин, 6-(2,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(2,4-дифторбензиламино)пурин, 6-(3,4-дифторбензиламино)пурин, 6-(2,5-дифторбензиламино)пурин, 6-(3,5-дифторбензиламино)пурин, 6-(5-фтор-2-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-фтор-2-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-хлор-5-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-(дифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(3-(дифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(4-(дифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(2-фтор-5-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3-фтор-4-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-фтор-4-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-(трифторметилтио)бензиламино)пурин, 6-(2-фтор-3-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-хлор-6-фтор-3-метилбензиламино)пурин, 6-(6-хлор-2-фтор-3-метилбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2-фтор-5-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2-фтор-6-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2, 3-дифтор-4-метилбензиламино)пурин, 6-(2,6-дифтор-3-метилбензиламино)пурин, 6-(2-фтор-6-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(3-(трифторметилтио)бензиламино)пурин, 6-(3-фтор-4-метилбензиламино)пурин, 6-(4-фтор-3-метилбензиламино)пурин, 6-(5-фтор-2-метилбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-3,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(4-(трифторметилтио)бензиламино)пурин, 6-(3-фтор-5-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-хлор-4-фторбензиламино)пурин, 6-(2-(трифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(2-(трифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(3-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-хлор-3-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-фтор-3-(трифторметил)бензиламино)пурни, 6-(3, 5-бис(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3-(трифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(4-(трифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(4-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-диэтиламинобензиламино)пурин, 6-(2, 3-этилендиоксибензиламино)пурин, 6-(3,4-диметоксибензиламино)пурин, 6-(3,4-диметоксибензиламино)пурин, 6-(3,5-диметоксибензиламино)пурин, 6-(2,3-диметоксибензиламино)пурин, 6-(2, 4-диметоксибензиламино)пурин, 6-(2,5-диметоксибензиламино)пурин, 6-(2,6-диметоксибензиламино)пурин, 6-(3-гидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-3-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-гидрокси-3-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-гидрокси-2-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-метоксибензиламино)пурин, 6-(3-гидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-гидрокси-3-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-метоксибензиламини)пурин, 6-(3-гидрокси-5-метоксибензиламино)пурин, 6-(4, 5-диметокси-2-нитробензиламино)пурин, 6-(3,4-диметилбензиламино)пурин, 6-(2,3-диметилбензиламино)пурин, 6-(2,4-диметилбензиламино)пурин, 6-(2,6-диметилбензиламино)пурин, 6-(2, 6-диметил-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3,5-диметил-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(2-фтор-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3-фтор-4-метилбензиламино)пурин, 6-(3,4-динитробензиламино)пурин, 6-(3, 5-динитробензиламино)пурин, 6-(2-метил-5-нитробензиламино)пурин, 6-(3-метил-4-нитробензиламино)пурин, 6-(3,4-дийод-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(2-хлор-3,4-диметоксибензиламино)пурин, 6-(4-хлор-3, 5-динитробензиламино)пурин, 6-(2-хлор-4-фторбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-4-фторбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-6-метилбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2-метилбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-4-метилбензиламино)пурин, 6-(5-хлор-2-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-хлор-4-фторбензиламино)пурин, 6-(4-хлорметилбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-5-нитробензиламино)пурин, 6-(2-хорр-6-нитробензиламино)пурин, 6-(4-хлор-3-нитробензиламино)пурин, 6-(5-хлор-2-нитробензиламино)пурин, 6-(3-бром-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3,5-дибром-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3-бром-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-бромметилбензиламино)пурин, 6-(4-бутоксибензиламино)пурин, 6-(4-бутоксибензиламино)пурин, 6-(4-/t-бутил/бензиламино)пурин, 6-(4-t-бутил-2, 6-диметилбензиламино)пурин, 6-(2-аминобензиламино)пурин, 6-(3-аминобензиламино)пурин, 6-(4-аминобензиламино)пурин, 6-(2-амино-6-хлорбензиламино)пурин, 6-(3-амино-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-амино-3-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-амино-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-амино-6-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-диамино-3-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-диамино-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(4-амино-3-хлорбензиламино)пурин, 6-(4-амино-5-дихлорбензиламино)пурин, 6-(5-амино-2-метилбензиламино)пурин, 6-(2-амино-3-нитробензиламино)пурин, 6-(4-амино-3-нитробензиламино)пурин, 6-(4-бензилоксибензиламино)пурин, 6-(3-ацетилбензиламино)пурин, 6-(2-ацетилбензиламино)пурин, 6-(2,3,4-триметоксибензиламино)пурин, 6-(2,4,5-триметоксибензиламино)пурин, 6-(2,4, 6-триметоксибензиламино)пурин, 6-(3,4,5-триметоксибензиламино)пурин, 6-(2,4,6-триметоксибензиламино)пурин, 6-(2,3,4-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(2,4,6-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(2,3, 4-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(3,4,5-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(2,4,6-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(2,4,5-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,4,5-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,4, 6-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,3,4-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,3,5-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,3,6-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,5,6-трихлорбензиламино)пурин, 6-анилинопурин, 6-(2, 4-бис(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,5-бис(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,4-бис(трифторметил)анилино)пурин, 6-(3,5-бис(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2-броманилино)пурин, 6-(3-броманилино)пурин, 6-(4-броманилино)пурин, 6-(4-бром-2-хлоранилино)пурин, 6-(4-бром-3-хлоранилино)пурин, 6-(2-бром-6-хлор-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(4-бром-5,6-дифторанилино)пурин, 6-(2-бром-4, 6-дифторанилино)пурин, 6-(4-бром-2,6-дифторанилино)пурин, 6-(4-бром-2-фторанилино)пурин, 6-(2-бром-4-фторанилино)пурин, 6-(2-бром-4-метиланилино)пурин, 6-(3-бром-2-метиланилино)пурин, 6-(4-бром-3-метиланилино)пурин, 6-(2-бром-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(3-бром-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(4-бром-2-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-бром-4,5,6-трифторанилино)пурин, 6-(2,4-диброманилино)пурин, 6-(2,5-диброманилино)пурин, 6-(2,4-дибром-3,6-дихлоранилино)пурин, 6-(2,6-дибром-4-фторанилино)пурин, 6-(2,6-дибром-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2, 4-дибром-6-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,6-дибром-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,3-дихлоранилино)пурин, 6-(2,4-дихлоранилино)пурин, 6-(2,5-дихлоранилино)пурин, 6-(2,6-дихлоранилино)пурин, 6-(3,4-дихлоранилино)пурин, 6-(3,5-дихлоранилино)пурин, 6-(2,6-дихлор-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2,4-дихлор-6-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,6-дихлор-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2, 3-дифторанилино)пурин, 6-(2,4-дифторанилино)пурин, 6-(2,5-дифторанилино)пурин, 6-(2,6-дифторанилино)пурин, 6-(3,4-дифторанилино)пурин, 6-(3,5-дифторанилино)пурин, 6-(2-дифторметоксианилино)пурин, 6-(2-дифторметокси-5-нитроанилино)пурин, 6-(2,3-дифтор-6-нитроанилино)пурин, 6-(2,4-дифтор-6-нитроанилино)пурин, 6-(2,4-дийоданилино)пурин, 6-(2,3-диметиланилино)пурин, 6-(2,4-диметиланилино)пурин, 6-(2,3-диметил-6-нитроанилино)пурин, 6-(2,4-диметоксианилино)пурин, 6-(2,3-диметоксианилино)пурин, 6-(2,3-динитро-6-метиланилино)пурин, 6-(4-гидрокси-2-метиланилино)пурин, 6-(2-хлоранилино)пурин, 6-(3-хлоранилино)пурин, 6-(4-хлоранилино)пурин, (3-хлор-2,6-дибром-4-фторанилино)пурин, 6-(2-хлор-4-фторанилино)пурин, 6-(2-хлор-5-фторанилино)пурин, 6-(2-хлор-6-фторанилино)пурин, 6-(3-хлор-2-фторанилино)пурин, 6-(3-хлор-4-фторанилино)пурин, 6-(4-хлор-2-фторанилино)пурин, 6-(5-хлор-2-фторанилино)пурин, 6-(2-хлор-4-фтор-5-метиланилино)пурин, 6-(5-хлор-4-фтор-2-нитроанилино)пурин, 6-(5-хлор-2-гидроксианилино)пурин, 6-(4-хлор-2-йоданилино)пурин, 6-(2-хлор-4-йоданилино)пурин, 6-(2-хлор-6-метиланилино)пурин, 6-(3-хлор-2-метиланилино)пурин, 6-(3-хлор-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(4-хлор-2-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-фторанилино)пурин, 6-(3-фторанилино)пурин, 6-(4-фторанилино)пурин, 6-(2-фтор-4-йоданилино)пурин, 6-(2-фтор-5-нитроанилино)пурин, 6-(2-фтор-4-метиланилино)пурин, 6-(3-фтор-2-метиланилино)пурин, 6-(3-фтор-4-метиланилино)пурин, 6-(4-фтор-2-метиланилино)пурин, 6-(3-фтор-4-метиланилино)пурин, 6-(5-фтор-2-метиланилино)пурин, 6-(4-фтор-2-нитроанилино)пурин, 6-(4-фтор-3-нитроанилино)пурин, 6-(2-йоданилино)пурин, 6-(2-фтор-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(4-йод-2-метиланилино)пурин, 6-(2-метоксианилино)пурин, 6-(3-метоксианилино)пурин, 6-(4-метоксианилино)пурин, 6-(2-метокси-5-метиланилино)пурин, 6-(2-метокси-6-метиланилино)пурин, 6-(4-метокси-2-метиланилино)пурин, 6-(5-метокси-2-метиланилино)пурин, 6-(4-метокси-3-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2-метиланилино)пурин, 6-(4-метиланилино)пурин, 6-(3-метиланилино)пурин, 6-(2-метил-3-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-метил-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-(метилтио)анилино)пурин, 6-(4-(метилтио)анилино)пурин, 6-(2-нитроанилино)пурин, 6-(3-нитроанилино)пурин, 6-(4-нитроанилино)пурин, 6-(2-нитро-4,5, 6-трифторанилино)пурин, 6-(2-нитро-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-нитротетрафторанилино)пурин, 6-(2,3,4,5,6-пентаброманилино)пурин, 6-(2,3,4,5,6-пентафторанилино)пурин, 6-(2,3,4, 5-тетрахлоранилино)пурин, 6-(2,3,5,6-тетрахлоранилино)пурин, 6-(4-(1,1,2,2-тетрафторэтокси)анилино)пурин, 6-(2,3,4,5-тетрафторанилино)пурин, 6-(2,3,4,6-тетрафторанилино)пурин, 6-(2,3,5, 6-тетрафторанилино)пурин, 6-(2,3,5,6-тетрафтор-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,4,6-триброманилино)пурин, 6-(2,4,6-трибром-3,5-дийоданилино)пурин, 6-(2,3,4-трихлоранилино)пурин, 6-(2,4, 5-трихлоранилино)пурин, 6-(2,4,6-трихлоранилино)пурин, 6-(2,4,5-трифторанилино)пурин, 6-(2,3,5-трифторанилино)пурин, 6-(2,3,6-трифторанилино)пурин, 6-(2,3,4-трифторанилино)пурин, 6-(2-трифторметоксианилино)пурин, 6-(3-трифторметоксианилино)пурин, 6-(4-трифторметоксианилино)пурин, 6-(2,3,4-трифтор-6-нитроанилино)пурин, 6-(2,4,5-триметиланилино)пурин, 6-(2,4, 6-триметиланилино)пурин, 6-(3-хлор-5-аминоанилино)пурин, 6-(3-хлор-4-карбокси)пурин, 6-(3-амино-4-хлоранилино)пурин, 6-(3-хлор-4-аминоанилино)пурин, 6-(3-карбокси-4-гидроксианилино)пурин, при производстве медикаментов, косметических средств или регуляторов роста.

Настоящее изобретение также относится к использованию гетероциклических соединений на основе N⁶ -замещенного аденина общей формулы I в соответствии с ранее указанными и их фармацевтически приемлемых солей при производстве медикаментов, имеющих противораковые, митотические и иммуноподавляющие свойства, влияющие на клетки растений, животных и человека.

Далее настоящее изобретение относится к использованию гетероциклических соединений на основе N⁶-замещенного аденина общей формулы (I) вышеуказанных и их фармацевтически приемлемых солей при производстве регуляторов роста растений, млекопитающих животных, микроорганизмов, клеток дрожжей и грибков.

Настоящее изобретение также относится к использованию вышеуказанных гетероциклических соединений на основе N⁶-замещенного аденина общей формулы I и их фармацевтически приемлемых солей при производстве косметических средств, имеющих свойства, замедляющие старение клеток растений, животных и человека.

Изобретение относится также и к фармацевтическим и косметическим композициям или регуляторам роста, которые содержат вышеуказанные гетероциклические соединения на основе N⁶-замещенного аденина общей формулы I и их фармацевтически приемлемые соли, имеющие противораковые, митотические, иммуноподавляющие и замедляющие старение свойства, влияющие на клетки растений, животных и человека.

Настоящее изобретение касается также использования вышеуказанных гетероциклических соединений на основе N⁶-замещенного аденина общей формулы I и их фармацевтически приемлемых солей при производстве регуляторов роста для использования в сельском хозяйстве, особенно для увеличения урожая и качества сельскохозяйственных культур.

Настоящее изобретение касается также и использования вышеуказанных гетероциклических соединений на основе N⁶-замещенного аденина общей формулы (I) и их фармацевтически приемлемых солей при производстве косметических средств, замедляющих старение и подавляющих чувствительность эпидермических клеток млекопитающих, таких как кератиноциты и фибробласты.

Изобретение относится также и к использованию вышеуказанных гетероциклических соединений на основе N⁶-замещенного аденина общей формулы I и их фармацевтически приемлемых солей при производстве регуляторов роста для применения их в клеточных культурах для стимуляции их размножения и морфогенеза.

Данное изобретение относится к тому же и к использованию вышеуказанных гетероциклических соединений на основе N⁶-замещенного аденина обшей формулы I и их фармацевтически приемлемых солей при производстве препаратов, предназначенных для подавления иммуностимуляции.

Настоящее изобретение относится также и к гетероциклическим соединениям на базе N⁶-замещенного аденина общей формулы I, где соединения выбираются из групп:

6-(2-гидрокси-3-хлороксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-3-йодбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-йодбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-йодбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-йодбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-3-бромбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-бромбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-бромбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-бромбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-3-фторбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-фторбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-фторбензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-фторбензиламино)пурин, 6-(2, 3-дигидрокси-3-метоксибензиламино)пурин, 6-(2,5-дигидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2,3-дигидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2, 3-дигидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,5-дигидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-4-бромбензиламино)пурин, 6-(2, 6-дигидрокси-4-йодбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3-бромбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3-йодбензиламино)пурин, 6-(2, 6-дигидрокси-3-фторбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3,5-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3,5-дибромбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3,5-дийодбензиламино)пурин, 6-(2,6-дигидрокси-3, 5-дифторбензиламино)пурин, 6-(2-фторбензиламино)пурин, 6-(3-фторбензиламино)пурин, 6-(4-фторбензиламино)пурин, 6-(2-бромбензиламино)пурин, 6-(3-бромбензиламино)пурин, 6-(4-бромбензиламино)пурин, 6-(2-йодбензиламино)пурин, 6-(3-йодбензиламино)пурин, 6-(4-йодбензиламино)пурин, 6-(2-хлорбензиламино)пурин, 6-(3-хлорбензиламино)пурин, 6-(4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-ацетилбензиламино)пурин, 6-(3-ацетилбензиламино)пурин, 6-(4-ацетилбензиламино)пурин, 6-(3-карбоксибензиламино)пурин, 6-(4-карбоксибензиламино)пурин, 6-(2-ацетоксибензиламино)пурин, 6-(3-ацетоксибензиламино)пурин, 6-(4-ацетоксибензиламино)пурин, 6-(2-нитробензиламино)пурин, 6-(3-нитробензиламино)пурин, 6-(4-нитробензиламино)пурин, 6-(2-сульфобензиламино)пурин, 6-(3-сульфобензиламино)пурин, 6-(4-сульфобензиламино)пурин, 6-(2-кианобензиламино)пурин, 6-(3-кианобензиламино)пурин, 6-(4-кианобензиламино)пурин, 6-(5-нитро-2-метилбензиламино)пурин, 6-(2-метилбензиламино)пурин, 6-(3-метилбензиламино)пурин, 6-(4-метилбензиламино)пурин, 6-(4-метиламинобензиламино)пурин, 6-(2-метоксибензиламино)пурин, 6-(3-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3-гидроксибензиламино)пурин, 6-(4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(4-гексилбензиламино)пурин, 6-(4-гексилоксибензиламино)пурин, 6-(2-формилбензиламино)пурин, 6-(3-формилбензиламино)пурин, 6-(4-формилбензиламино)пурин, 6-(2-этоксибензиламино)пурин, 6-(3-этоксибензиламино)пурин, 6-(4-этоксибензиламино)пурин, 6-(4-этилбензиламино)пурин, 6-(4-пентилбензиламино)пурин, 6-(4-пентилоксибензиламино)пурин, 6-(4-феноксибензиламино)пурин, 6-(4-фенилбензиламино)пурин, 6-(4-пропилбензиламино)пурин, 6-(4-пропилоксибензиламино)пурин, 6-(4-октилбензиламино)пурин, 6-(4-октилоксибензиламино)пурин, 6-(4-этилоксибензиламино)пурин, 6-(3,4-диацетоксибензиламино)пурин, 6-(3,5-диацетоксибензиламино)пурин, 6-(2,5-диаминбензиламино)пурин, 6-(3,5-дибромбензиламино)пурин, 6-(3,5-дибром-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2,3-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,4-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,5-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-дихлорбензиламино)пурин, 6-(3,5-дихлорбензиламино)пурин, 6-(2,3,4,5-тетрафторбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-3,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(5-хлор-2-фторбензиламино)пурин, 6-(2,3,4-трифторбензиламино)пурин, 6-(2,3, 5-трифторбензиламино)пурин, 6-(2,4,5-трифторбензиламино)пурин, 6-(3,4,5-трифторбензиламино)пурин, 6-(2,3,6-трифторбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-6-фторбензиламино)пурин, 6-(2,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(2,4-дифторбензиламино)пурин, 6-(3,4-дифторбензиламино)пурин, 6-(2,5-дифторбензиламино)пурин, 6-(3,5-дифторбензиламино)пурин, 6-(5-фтор-2-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-фтор-2-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-хлор-5-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-(дифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(3-(дифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(4-(дифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(2-фтор-5-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3-фтор-4-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-фтор-4-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-(трифторметилтио)бензиламино)пурин, 6-(2-фтор-3-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-хлор-6-фтор-3-метилбензиламино)пурин, 6-(6-хлор-2-фтор-3-метилбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2-фтор-5-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2-фтор-6-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2,3-дифтор-4-метилбензиламино)пурин, 6-(2, 6-дифтор-3-метилбензиламино)пурин, 6-(2-фтор-6-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(3-(трифторметилтио)бензиламино)пурин, 6-(3-фтор-4-метилбензиламино)пурин, 6-(4-фтор-3-метилбензиламино)пурин, 6-(5-фтор-2-метилбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-3,6-дифторбензиламино)пурин, 6-(4-(трифторметилтио)бензиламино)пурин, 6-(3-фтор-5-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-хлор-4-фторбензиламино)пурин, 6-(2-(трифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(2-(трифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(3-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(2-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-хлор-3-(трифторметил) бензиламино)пурин, 6-(4-фтор-3-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3,5-бис(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(3-(трифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(4-(трифторметокси)бензиламино)пурин, 6-(4-(трифторметил)бензиламино)пурин, 6-(4-диэтиламино)пурин, 6-(3,4-дигидроксибензиламино)пурин, 6-(3, 5-дигидроксибензиламино)пурин, 6-(3,4-дигидроксибензиламино)пурин, 6-(2,3-этилендиоксибензиламино)пурин, 6-(2,4-дигидроксибензиламино)пурин, 6-(2,5-дигидроксибензиламино)пурин, 6-(2, 6-дигидроксибензиламино)пурин, 6-(3,4-диметоксибензиламино)пурин, 6-(3,4-диметоксибензиламино)пурин, 6-(3,5-диметоксибензиламино)пурин, 6-(2,3-диметоксибензиламино)пурин, 6-(2, 4-диметоксибензиламино)пурин, 6-(2,5-диметоксибензиламино)пурин, 6-(2,6-диметоксибензиламино)пурин, 6-(3-гидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-3-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-гидрокси-3-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-гидрокси-2-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-5-метоксибензиламино)пурин, 6-(3-гидрокси-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-гидрокси-3-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-гидрокси-6-метоксибензиламино)пурин, 6-(3-гидрокси-5-метоксибензиламино)пурин, 6-(4, 5-диметокси-2-нитробензиламино)пурин, 6-(3,4-диметилбензиламино)пурин, 6-(2,3-диметилбензиламино)пурин, 6-(2,4-диметилбензиламино)пурин, 6-(2,6-диметилбензиламино)пурин, 6-(2, 6-диметил-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3,5-диметил-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(2-фтор-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3-фтор-4-метилбензиламино)пурин, 6-(3,4-динитробензиламино)пурин, 6-(3, 5-динитробензиламино)пурин, 6-(2-метил-5-нитробензиламино)пурин, 6-(3-метил-4-нитробензиламино)пурин, 6-(3,4-дийод-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(2-хлор-3,4-диметоксибензиламино)пурин, 6-(4-хлор-3, 5-динитробензиламино)пурин, 6-(2-хлор-4-фторбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-4-фторбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-6-метилбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-2-метилбензиламино)пурин, 6-(3-хлор-4-метилбензиламино)пурин, 6-(5-хлор-2-метоксибензиламино)пурин, 6-(2-хлор-4-фторбензиламино)пурин, 6-(4-хлорметилбензиламино)пурин, 6-(2-хлор-5-нитробензиламино)пурин, 6-(2-хлор-6-нитробензиламино)пурин, 6-(4-хлор-3-нитробензиламино)пурин, 6-(5-хлор-2-нитробензиламино)пурин, 6-(3-бром-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3,5-дибром-4-гидроксибензиламино)пурин, 6-(3-бром-4-метоксибензиламино)пурин, 6-(4-бромметилбензиламино)пурин, 6-(4-бутоксибензиламино)пурин, 6-(4-бутоксибензиламино)пурин, 6-(4-/t-бутил/бензиламино)пурин, 6-(4-t-бутил-2, 6-диметилбензиламино)пурин, 6-(2-аминобензиламино)пурин, 6-(3-аминобензиламино)пурин, 6-(4-аминобензиламино)пурин, 6-(2-амино-6-хлорбензиламино)пурин, 6-(3-амино-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-амино-3-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-амино-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(2-амино-6-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-диамино-3-хлорбензиламино)пурин, 6-(2,6-диамино-4-хлорбензиламино)пурин, 6-(4-амино-3-хлорбензиламино)пурин, 6-(4-амино-5-дихлорбензиламино)пурин, 6-(5-амино-2-метилбензиламино)пурин, 6-(2-амино-3-нитробензиламино)пурин, 6-(4-амино-3-нитробензиламино)пурин, 6-(4-бензилоксибензиламино)пурин, 6-(3-ацетилбензиламино)пурин, 6-(2-ацетилбензиламино)пурин, 6-(2,3,4-триметоксибензиламино)пурин, 6-(2,4,5-триметоксибензиламино)пурин, 6-(2,4, 6-триметоксибензиламино)пурин, 6-(3,4,5-триметоксибензиламино)пурин, 6-(2,4,6-триметоксибензиламино)пурин, 6-(2,3,4-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(2,4,6-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(2,3, 4-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(3,4,5-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(2,4,6-тригидроксибензиламино)пурин, 6-(2,4,5-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,4,5-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,4, 6-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,3,4-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,3,5-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,3,6-трихлорбензиламино)пурин, 6-(2,5,6-трихлорбензиламино)пурин, 6-анилинопурин, 6-(2, 4-бис(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,5-бис(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,4-бис(трифторметил)анилино)пурин, 6-(3,5-бис(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2-броманилино)пурин, 6-(3-броманилино)пурин, 6-(4-броманилино)пурин, 6-(4-бром-2-хлоранилино)пурин, 6-(4-бром-3-хлоранилино)пурин, 6-(2-бром-6-хлор-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(4-бром-5,6-дифторанилино)пурин, 6-(2-бром-4, 6-дифторанилино)пурин, 6-(4-бром-2,6-дифторанилино)пурин, 6-(4-бром-2-фторанилино)пурин, 6-(2-бром-4-фторанилино)пурин, 6-(2-бром-4-метиланилино)пурин, 6-(3-бром-2-метиланилино)пурин, 6-(4-бром-3-метиланилино)пурин, 6-(2-бром-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(3-бром-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(4-бром-2-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-бром-4,5,6-трифторанилино)пурин, 6-(2,4-диброманилино)пурин, 6-(2,5-диброманилино)пурин, 6-(2,4-дибром-3,6-дихлоранилино)пурин, 6-(2,6-дибром-4-фторанилино)пурин, 6-(2,6-дибром-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2, 4-дибром-6-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,6-дибром-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,3-дихлоранилино)пурин, 6-(2,4-дихлоранилино)пурин, 6-(2,5-дихлоранилино)пурин, 6-(2,6-дихлоранилино)пурин, 6-(3,4-дихлоранилино)пурин, 6-(3,5-дихлоранилино)пурин, 6-(2,6-дихлор-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2,4-дихлор-6-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,6-дихлор-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2, 3-дифторанилино)пурин, 6-(2,4-дифторанилино)пурин, 6-(2,5-дифторанилино)пурин, 6-(2,6-дифторанилино)пурин, 6-(3,4-дифторанилино)пурин, 6-(3,5-дифторанилино)пурин, 6-(2-дифторметоксианилино)пурин, 6-(2-дифторметокси-5-нитроанилино)пурин, 6-(2,3-дифтор-6-нитроанилино)пурин, 6-(2,4-дифтор-6-нитроанилино)пурин, 6-(2,4-дийоданилино)пурин, 6-(2,3-диметиланилино)пурин, 6-(2,4-диметиланилино)пурин, 6-(2,3-диметил-6-нитроанилино)пурин, 6-(2,4-диметоксианилино)пурин, 6-(2,3-диметоксианилино)пурин, 6-(2,3-динитро-6-метиланилино)пурин, 6-(4-гидрокси-2-метиланилино)пурин, 6-(2-хлоранилино)пурин, 6-(3-хлоранилино)пурин, 6-(4-хлоранилино)пурин, (3-хлор-2,6-дибром-4-фторанилино)пурин, 6-(2-хлор-4-фторанилино)пурин, 6-(2-хлор-5-фторанилино)пурин, 6-(2-хлор-6-фторанилино)пурин, 6-(3-хлор-2-фторанилино)пурин, 6-(3-хлор-4-фторанилино)пурин, 6-(4-хлор-2-фторанилино)пурин, 6-(5-хлор-2-фторанилино)пурин, 6-(2-хлор-4-фтор-5-метиланилино)пурин, 6-(5-хлор-4-фтор-2-нитроанилино)пурин, 6-(5-хлор-2-гидроксианилино)пурин, 6-(4-хлор-2-йоданилино)пурин, 6-(2-хлор-4-йоданилино)пурин, 6-(2-хлор-6-метиланилино)пурин, 6-(3-хлор-2-метиланилино)пурин, 6-(3-хлор-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(4-хлор-2-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-фторанилино)пурин, 6-(3-фторанилино)пурин, 6-(4-фторанилино)пурин, 6-(2-фтор-4-йоданилино)пурин, 6-(2-фтор-5-нитроанилино)пурин, 6-(2-фтор-4-метиланилино)пурин, 6-(3-фтор-2-метиланилино)пурин, 6-(3-фтор-4-метиланилино)пурин, 6-(4-фтор-2-метиланилино)пурин, 6-(3-фтор-4-метиланилино)пурин, 6-(5-фтор-2-метиланилино)пурин, 6-(4-фтор-2-нитроанилино)пурин, 6-(4-фтор-3-нитроанилино)пурин, 6-(2-йоданилино)пурин, 6-(2-фтор-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(4-йод-2-метиланилино)пурин, 6-(2-метоксианилино)пурин, 6-(3-метоксианилино)пурин, 6-(4-метоксианилино)пурин, 6-(2-метокси-5-метиланилино)пурин, 6-(2-метокси-6-метиланилино)пурин, 6-(4-метокси-2-метиланилино)пурин, 6-(5-метокси-2-метиланилино)пурин, 6-(4-метокси-3-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2-метиланилино)пурин, 6-(4-метиланилино)пурин, 6-(3-метиланилино)пурин, 6-(2-метил-3-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-метил-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-(метилтио)анилино)пурин, 6-(4-(метилтио)анилино)пурин, 6-(2-нитроанилино) пурин, 6-(3-нитроанилино)пурин, 6-(4-нитроанилино)пурин, 6-(2-нитро-4,5, 6-трифторанилино)пурин, 6-(2-нитро-4-(трифторметокси)анилино)пурин, 6-(2-нитротетрафторанилино)пурин, 6-(2,3,4,5,6-пентаброманилино)пурин, 6-(2,3,4,5,6-пентафторанилино)пурин, 6-(2,3,4, 5-тетрахлоранилино)пурин, 6-(2,3,5,6-тетрахлоранилино)пурин, 6-(4-(1,1,2,2-тетрафторэтокси)анилино)пурин, 6-(2,3,4,5-тетрафторанилино)пурин, 6-(2,3,4,6-тетрафторанилино)пурин, 6-(2,3,5, 6-тетрафторанилино)пурин, 6-(2,3,5,6-тетрафтор-4-(трифторметил)анилино)пурин, 6-(2,4,6-триброманилино)пурин, 6-(2,4,6-трибром-3,5-дийоданилино)пурин, 6-(2,3,4-трихлоранилино)пурин, 6-(2,4, 5-трихлоранилино)пурин, 6-(2,4,6-трихлоранилино)пурин, 6-(2,4,5-трифторанилино)пурин, 6-(2,3,5-трифторанилино)пурин, 6-(2,3,6-трифторанилино)пурин, 6-(2,3,4-трифторанилино)пурин, 6-(2-трифторметоксианилино)пурин, 6-(3-трифторметоксианилино)пурин, 6-(4-трифторметоксианилино)пурин, 6-(2,3,4-трифтор-6-нитроанилино)пурин, 6-(2,4,5-триметиланилино)пурин, 6-(2,4, 6-триметиланилино)пурин, 6-(3-хлор-5-аминоанилино)пурин, 6-(3-хлор-4-карбокси)пурин, 6-(3-амино-4-хлоранилино)пурин, 6-(3-хлор-4-аминоанилино)пурин, 6-(3-карбокси-4-гидроксианилино)пурин.

Исходным материалом для приготовления соединений общей формулы I является 6-хлорпурин, синтезируемый из гипоксантина с использованием POCl₃ в соответствии с литературным источником (Davoll and Blowy, J. Am. Chem. Soc. 73:2936 (1957)) или имеющийся в продаже (Sigma, Aldrich, Fluka).

Другим исходным материалом для приготовления соединений общей формулы I является 6-бромпурин, синтезируемый из гипоксантина с использованием н-пентилнитрита в трибромметане или имеющийся в продаже.

В соответствии с настоящим изобретением новые гетероциклические производные на основе N⁶-замещенного аденина, имеющие формулу I, где R2 и R6 представляют собой как описано здесь ранее, могут быть приготовлены из гетероциклического производного, имеющего формулу I, где R6 представляет группу бром, хлор или метилмеркапто и R2 представляет собой как описано здесь ранее, с помощью нуклеофильного замещения для перевода группы бром, хлор или метилмеркапто в положении R6 в любое другое значение заместителя R6, как описано здесь ранее, для получения соединения, имеющего формулу I.

Другим способом в соответствии с настоящим изобретением является приготовление соединений формулы I, характеризующихся тем, что гетероциклическое производное, имеющее формулу I, где R2 является водородом и R6 представляет аминогруппу, является замещенным в положении R6 с помощью реакции с альдегидом, имеющим формулу R6'-CHO, где R6' является описанным здесь ранее, для перевода аминогруппы в положении R6 в любое другое значение заместителя R6, как описано здесь ранее, для получения соединения, имеющего формулу I.

Терапевтическое применение

Подходящие пути применения включают оральный, ректальный, местный (включая кожный, глазной, буккальный и подъязычный), вагинальный и парентеральный (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный, интрадермальный, интратекальный и эпидуральный). Предпочтительный путь применения среди прочих известных врачам-клиницистам соображений будет зависеть от состояния пациента, токсичности вещества и места инфекции.

Терапевтический состав включает от примерно 1% до примерно 95% активного ингредиента, формы одноразовых доз назначения предпочтительно включают от примерно 20% до примерно 90% активного ингредиента, и дозы назначения, которые не являются одноразовыми, предпочтительно включают от примерно 5% до примерно 20% активного ингредиента. Формами единичных доз являются, например, таблетки с покрытием, таблетки, ампулы, флаконы, суппозитории или капсулы. Другими формами применения являются, например, мази, крема, пасты, пены, тинктуры, губные помады, капли, аэрозоли, дисперсии и им подобные. Примерами являются капсулы, содержащие от примерно 0,05 г до примерно 1,0 г активного ингредиента.

Фармацевтические составы по настоящему изобретению приготавливаются с помощью известных по существу способов, например с помощью обычных процессов смешения, гранулирования, покрытия, растворения или лиофилизации.

Предпочтительно, используемые растворы активных ингредиентов, а также суспензии или дисперсии, особенно изотонические водные растворы, дисперсии или суспензии, для них возможна подготовка перед использованием, например в случае лиофилизированных составов, которые включают активное вещество как таковое или вместе с носителем, например маннитол. Фармацевтические составы могут быть стерилизованными и/или включать наполнители, например консерванты, стабилизаторы, смачивающие агенты и/или эмульгаторы, растворяющие агенты, соли для регулирования осмотического давления и/или буферные растворы, и они приготавливаются с помощью известных по существу способов, например с помощью обычных процессов растворения или лиофилизации. Названные растворы или суспензии могут содержать повышающие вязкость вещества, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, декстран, поливинилпирролидон или желатин.

Суспензии в масле включают, в качестве масляного компонента, растительные, синтетические или полусинтетические масла, употребляемые для инъекционных целей. Маслами, которые могут быть названы, являются, в частности, жидкие эфиры жирных кислот, которые содержат, в качестве кислотного компонента, жирную кислоту с длинной цепью, имеющую 8-22, в частности 12-22, атомов углерода, например лауриновая кислота, тридециловая кислота, миристиновая кислота, пентадециловая кислота, пальмитиновая кислота, маргариновая кислота, стеариновая кислота, арахидоновая кислота, бегеновая кислота, или соответствующие ненасыщенные кислоты, например олеиновая кислота, элаидиновая кислота, эйритовая кислота, брасидовая кислота или линолевая кислота, и если целесообразно, с добавкой антиоксидантов, например витамин Е, бета-каротин или 3,5-дитретбутил-4-гидрокситолуол. Спиртовая компонента этих эфиров жирных кислот имеет не более 6 атомов углерода и является моно- или полиосновной, например моно-, ди- или трехосновный спирт, например метанол, этанол, пропанол, бутанол или пентанол, или их изомеры, но в частности гликоль и глицерин. Поэтому эфирами жирных кислот являются, например, этилолеат, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, "Labrafil M 2375" (полиоксиэтиленглицеринтриолеат от Gattefoseé, Париж), "Labrafil M 1944 CS" (ненасыщенные полигликолиевые глицериды, приготавливаемые алкоголизом косточкового абрикосового масла и превращаемые в эфиры глицеридов и полиэтиленгликоля; от Gattefoseé, Париж), "Labrasol" (насыщенные полигликолиевые глицериды, приготавливаемые алкоголизом ТСМ и превращаемые в эфиры глицеридов и полиэтиленгликоля; от Gattefoseé, Париж) и/или "Miglyol 812" (триглицерид насыщенных жирных кислот с длиной цепи от С₈ до С₁₂ от Hüls AG, Германия) и, в частности, растительные масла, такие как хлопковое масло, миндальное масло, оливковое масло, касторовое масло, кунжутное масло, соевое масло и, в частности, арахисовое масло.

Приготовление составов для инъекций выполняется обычным способом в стерильных условиях, какими являются розлив, например, в ампулы или пузырьки и запечатывание контейнеров.

Например, фармацевтические составы для орального применения могут быть получены сочетанием активного ингредиента с одним или более твердыми пистолями, если целесообразно, гранулированием полученной смеси и, если нужно, превращением смеси или гранул в таблетки или таблетки с покрытием, если целесообразно, с добавлением дополнительных наполнителей.

Подходящими носителями являются, в частности, наполнители, такие как сахара, например лактоза, сахароза, маннитол или сорбитол, целлюлозные препараты и/или фосфаты кальция, например трикальций дифосфат или кислый фосфат кальция, и, кроме тою, связующие вещества, такие как крахмалы, например кукурузный, пшеничный, рисовый или картофельный крахмал, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия и/или поливинилпирролидин, и/или, если нужно, дезинтеграторы, такие как вышеназванные крахмалы и, кроме того, карбоксилметиловый крахмал, поливинилпирролидин с сетчатой структурой, альгиновая кислота или ее соли, такие как альгинат натрия. Дополнительными наполнителями являются, в частности, регуляторы текучести и скользящие вещества, например салициловая кислота, тальк, стеариновая кислота и ее соли, такие как стеарат магния или стеарат кальция, и/или полиэтиленгликоль или его производные.

Таблетки с покрытием могут быть обеспечены подходящими покрытиями, которые, если целесообразно, устойчивы к желудочному соку, используемыми покрытиями являются, в числе прочего, концентрированные сахарные растворы, которые, если целесообразно, включают гуммиарабик, тальк, поливинилпирролидин, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, покрывающие растворы в подходящих органических растворителях или смесях растворителей, или для приготовления покрытий, которые устойчивы к желудочному соку, растворы подходящих целлюлозных препаратов, таких как фталат ацетилцеллюлозы или фталат гидроксипропилметилцеллюлозы. К таблеткам или покрытиям таблеток с покрытиями могут быть добавлены красители или пигменты, например, для идентификации или характеризации различных доз активного ингредиента.

Фармацевтическими составами, которые могут применяться орально, являются также твердые капсулы из желатина и мягкие, закрытые капсулы из желатина и пластификатора, такого как глицерин или сорбитол. Твердые капсулы могут содержать активный ингредиент в виде гранул, смешенных, например, с наполнителями, такими как кукурузный крахмал, связующими веществами и/или скользящими веществами, такими как тальк или стеарат магния, и стабилизаторами, если целесообразно. В мягких капсулах активный ингредиент предпочтительно растворен или суспензирован в подходящих жидких наполнителях, таких как жирные масла, парафиновое масло или жидкий полиэтиленгликоль или эфиры жирных кислот и этиленгликоля или пропиленгликоля, и также возможно добавление стабилизаторов и детергентов, например, типа эфира полиэтиленсорбитана и жирной кислоты.

Другими формами орального применения являются, например, сиропы, приготавливаемые обычным способом, которые включают активный ингредиент, например, во взвешенном виде и при концентрации от примерно 5% до 20%, предпочтительно примерно 10%, или при схожей концентрации, которая выражается в подходящей индивидуальной дозе, например, когда дозируется 5 или 10 мл. Другими формами являются также, например, порошкообразные или жидкие концентраты для приготовления болтушек, например, в молоке. Такие концентраты также могут быть расфасованы в разовых дозах.

Фармацевтическими составами, которые могут применяться ректально, являются, например, свечи, которые включают в себя сочетание активного ингредиента с основой свечи. Подходящими основами свечи являются, например, триглицериды природного или синтетического происхождения, парафиновые углеводороды, полиэтиленгликоли или высшие алканолы.

Составами, которые пригодны для парентерального применения, являются водные растворы активного ингредиента в водорастворимой форме, например в виде водорастворимой соли, или водные суспензии для инъекции, которые включают повышающие вязкость вещества, например карбоксиметилцеллюлозу натрия, сорбитол и/или декстран, и стабилизаторы, если целесообразно. Активный ингредиент может здесь также присутствовать в форме лиофилизата, если целесообразно, вместе с наполнителями и может быть растворен перед парентеральным применением путем добавления подходящих растворителей. Предпочтительными консервантами являются, например, антиокислители, такие как аскорбиновая кислота, или бактерицидные средства, такие как сорбиновая или бензойная кислота.

Мазями являются эмульсии масло-в-воде, которые включают не более 70%, предпочтительно 20-50%, воды или водной фазы. Жирная фаза содержит, в частности, углеводороды, например вазелин, парафиновое масло или твердые парафины, которые предпочтительно включают в себя подходящие оксисоединения, такие как жирные спирты или их эфиры, например цетиловый спирт или спирты шерстяного воска, такие как шерстяной воск, для улучшения способности связывания с водой. Эмульгаторами являются соответствующие лиофильные вещества, такие как эфиры сорбита и жирной кислоты (Spans), например сорбит олеат и/или сорбит изостеарат. Добавками к водной фазе являются, например, увлажнители, такие как полиспирты, например глицерин, пропиленгликоль, сорбитол и/или полиэтиленгликоль, или консерванты и душистые вещества.

Жирные мази являются безводными и содержат, в качестве основы, в частности, углеводороды, например парафин, вазелин или парафиновое масло, и, кроме того, природные или полусинтетические жиры, например гидрогенизированные триглицериды кокосовой и жирной кислот или предпочтительно гидрогенизированные масла, например гидрогенизированное арахисовое или касторовое масло, и, кроме того, частичные эфиры жирных кислот и глицерина, например глицерин моно- и/или дистеарат, и, например, жирные спирты. Они также содержат эмульгаторы и/или добавки, названные в связи с мазями, которые повышают усвоение воды.

Крема являются эмульсиями масло-в-воде, которые включают в себя более 50% воды. Используемой масляной основой являются, в частности, жирный спирты, например лауриловый, цетиловый или стеариловый спирт, жирные кислоты, например пальмитиновая или стеариновая кислота, жидкость для отверждения восков, например изопропилмиристат, шерстяной воск или пчелиный воск, и/или углеводороды, например вазелин (вазелиновое масло) или парафиновое масло. Эмульгаторами являются поверхностно-активные вещества с преобладающими гидрофильными свойствами, такие как соответствующие неионные эмульгаторы, например эфиры жирных кислот и полиспиртов или их этиленоксидные продукты присоединения, такие как эфиры полиглицериновой кислоты и жирной кислоты или эфиры полиэтиленсорбита и жирной кислоты (Tweens), и, кроме того, эфиры полиоксиэтилена и жирного спирта или эфиры полиоксиэтилена и жирной кислоты, или соответствующие ионные эмульгаторы, такие как соли щелочных металлов сульфата жирного спирта, например лаурилсульфат натрия, цетилсульфат натрия или стеарилсульфат натрия, которые обычно используются в присутствии жирных спиртов, например цетилстеариловый спирт или стеариловый спирт. Добавками к водной фазе являются, среди прочего, агенты, которые предотвращают крем от высыхания, например полиспирты, такие как глицерин, сорбит, пропиленгликоль и/или полиэтиленгликоли, и, кроме того, консерванты и ароматизирующие вещества.

Пастами являются крема и мази, имеющие порошковую составляющую, сорбирующую секреции, такую как оксиды металлов, например оксид титана или оксид цинка, и, кроме того, тальк и/или силикат алюминия, назначение которых состоит в связывании присутствующих влаги или секреций.

Пены применяются из баллонов под давлением, и они являются жидкими эмульсиями масло-в-воде, находящимися в аэрозольной пене. В качестве аэрозольных газов-вытеснителей используются галогенизированные углеводороды, такие как полигалогенизированные алканы, например дихлорфторметан и дихлортетрафторэтан, или, предпочтительно, негалогенизированные газообразные углеводороды, воздух, N₂O или диоксид углерода. Используемыми масляными фазами являются, среди прочего, те, которые названы для мазей и кремов, и точно также используются названные добавки.

Тинктуры и растворы обычно включают в себя водно-этанольную основу, к которой примешиваются увлажнители для уменьшения испарения, такие как полиспирты, например глицерин, гликоли и/или полиэтиленгликоль, и смазывающие вещества, такие как эфиры жирных кислот с более низкими полиэтиленгликолями, например липофильные вещества, растворимые в водной смеси для замещения жирных веществ, удаляемых из кожи этанолом, и, если необходимо, другие наполнители и добавки.

Кроме того, настоящее изобретение предоставляет ветеринарные составы, включающие в себя не менее одного активного ингредиента, как определено выше, вместе с их ветеринарным носителем. Ветеринарные носители являются материалами для применения состава и могут быть твердыми, жидкими или газообразными веществами, которые являются инертными или приемлемыми в ветеринарии и являются совместимыми с активным ингредиентом. Эти ветеринарные составы могут применяться орально, парентерально или любым другим требуемым путем.

Это изобретение относится также к процессу или способу для лечения названных выше болезненных состояний. Эти вещества могут применяться профилактически или терапевтически, как таковые или в виде фармацевтических составов, предпочтительно в количестве, которое является эффективным для названных заболеваний. Эти вещества используются для теплокровных животных, например, для людей, для которых требуется такое лечение, в частности, в форме фармацевтического состава. Ежедневная доза примерно от 0,1 до примерно 5 г, предпочтительно от 0,5 г до примерно 2 г, вещества по настоящему изобретению назначается здесь для веса тела примерно 70 кг.

Чертежи

На фиг.1 показано подавление роста опухолевых клеток линий К562 (А) и СЕМ (В) с помощью испытываемых веществ. Цитотоксичность была определена в присутствии Calcein AM. Активность представлена как процент от максимальной активности (в отсутствии ингибиторов). iP: изопентениладенин; 2F ВАР: 6-(2-фторбензиламино)пурин; 2Cl ВАР: 6-(2-хлорбензиламино)пурин; 2ОН-3ОСН₃ ВАР: 6-(2-гидрокси-3-метоксибензиламино)пурин.

На фиг.2 показаны стареющие клетки в культуре человеческих фибробластов (В) (другие клетки (А)), окрашиваемые голубым красителем в ответ на действие β-галактосидазы на субстрате X-gal (5-бром-4-хлор-3-индотил-β-D-галактопиранозид) (1 мг/мл).

На фиг.3 показан наведенный апоптоз в опухолевых клетках клеточной линии MCF-7 после применения цитокинина 6-(2-гидрокси-3-метоксибензиламино)пурин. А - MCF-7, апоптозные клетки: 6 ч., 12, 20 мкМ, В - MCF-7, клетки вторичного некроза (т.е. некроз следует после апоптоза), С - MCF-7, омертвелые клетки, 24 ч., 12, 40 мкМ. Окрашивание анексином FITC V (Mol. Probes) и пропидиум йодид (PI): анексин - зеленый, PI - красный.

На фиг.4 показано определение апоптозных клеток с использованием анексина (зеленая флуоресценция) и Hoechstem 33285 (голубая флуоресценция). Анализ с использованием "Olympus image analysis" после обработки опухолевых клеток MCF-7 с помощью 6-(2-гадрокси-3-метоксибензиламино)пурин. А,В - контрольные клетки без обработки; C,D - апоптозные клетки (конденсация хроматина); А,С - флуоресцентная микроскопия; B,D - анализ флуоресцентного изображения.

На фиг.5 показано воздействие испытываемых веществ на удерживание хлорофилла в срезанных кончиках пшеничного листа. Величины выражены как проценты от исходного содержания хлорофилла в свежих листьях перед инкубацией. Величины ошибок показывают стандартные отклонения от среднего для пяти дублируемых определений. Штриховая линия показывает контрольную инкубацию без цитокинина, которая составила 31,7±0,9.

На фиг.6 показано воздействие испытываемых веществ на выход по весу для табачной культуры каллус. Величины ошибок показывают стандартные отклонения от среднего для пяти дублируемых определений. Штриховая линия показывает значение для контрольной обработки без цитокинина, 2,2±0,4 г.

На фиг.7 показано воздействие испытываемых веществ на темный синтез бетацианина в эксплантатах семядоля/гипокотиль Amaranthus caudatus. Величины ошибок показывают стандартные отклонения от среднего для пяти дублируемых определений. Штриховая линия показывает значение для контрольной обработки без добавления цитокинина, 0,043±0,009. Значения представляют разность в единицах оптической плотности (O.D.) между поглощением при 537 и 620 нм.

На фиг.8 показано относительное количество эксплантатов с не менее одним коричневым листом как функция от времени культивирования (■: ВА, •: mT, ▲: mMeOBAP).

На фиг.9 показано относительное количество мертвых эксплантатов в зависимости от времени культивирования (■: ВА, •: mT, ▲: mMeOBAP).

На фиг.10 показано слева: мертвый эксплантат Rosa hybrida на среде, содержащей ВА; справа: сильное растение Rosa hybrida через 121 день культивирования на среде, содержащей mMeOBAP.

Следующие примеры служат для иллюстрации этого изобретения без ограничения пределов объема изобретения.

Примеры

Пример 1

6-(3-хлорбензиламино) пурин

3 ммоля 6-хлорпурина были растворены в 15 мл бутанола. Затем 4 ммоля 3-хлорбензиламина и 5 ммолей триэтиламина были добавлены и смесь нагревалась при 90°С в течение 4 часов. После охлаждения осажденный продукт был отфильтрован, промыт холодной водой и н-бутанолом и выкристаллизован из этанола или диметилформамида. Температура плавления =252°С, тонкослойная хроматография (CHCl₃:МеОН:конц. NH₄OH (8:2:0.2, об./об./об.)): единичное пятно; высокоэффективная жидкостная хроматография: чистота >98%. Выход 95%.

Пример 2

Смесь из 10 ммолей аденина, 12 молей 2-метоксибензальдегида и 5 мл 98-100% муравьиной кислоты нагревали с обратным холодильником в течение 3 дней. После испарения уксусной кислоты получившееся вещество охладили и затем промыли 40 мл диэтилового эфира. Твердый остаток кипятили с 60 мл воды, фильтровали и сырой продукт выкристаллизовывали из этанола. Выход 45%.

Пример 3

Цитотоксическая активность новых соединений in vitro

Одним из параметров, используемых в качестве основного при цитотоксических анализах, является метаболическая активность жизнеспособных клеток. Например, анализ микротитра, который использует Calcein AM, в настоящее время широко используется для количественного определения пролиферации и цитотоксичности клетки. Например, этот анализ используется в лекарственных отборочных программах и в испытаниях на чувствительность к химическому воздействию. Поскольку только метаболически активные клетки расщепляют Calcein AM, эти анализы определяют исключительно жизнеспособные клетки. Количество восстановленного Calcein AM соответствует числу жизнеспособных клеток в данной культуре.

Для рутинного отбора соединений были использованы человеческая Т-лимфобластная лейкозная линия клеток СЕМ; промиелоцитная HL-60 и моноцитная U937 лейкозные клетки; линии клеток рака молочной железы MCF-7, BT549, MDA-MB-231; клетки глиобластомы U87MG; клетки рака шейки матки HELA; раковые клетки U2ОS и Saos2; гепатоцеллюлярный рак HepG2; мышиные фибробласты NIH3T3; макрофаги мышиного костного мозга В2.4 и В10А.4; лейкозные клетки P388D1 and L1210; меланомы В16 and B16F10. Клетки содержались в пластиковых колбах с тканевой культурой Nunc/Corning 80 см² и культивировались в среде клеточной культуры (DMEM с 5 г/л глюкозы, 2 мМ глютамина, 100 Е/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 10% эмбриональная телячья сыворотка и бикарбонат натрия).

Клеточные суспензии, которые готовились и разбавлялись в соответствии с конкретным типом клеток и ожидаемой конечной клеточной плотностью (2.500-30.000 клеток на лунку на основании характеристик клеточного роста), добавляли с помощью пипетки (80 мкл) в титрационный микропланшет на 96 лунок. Инокуляты выдерживали преинкубационный период 24 часа при 37°С и 5% СО₂ для стабилизации. В ячейки титрационного микропланшета в нулевое время добавляли четырехкратные разбавления предназначенной испытательной концентрации в аликвотах 20 мкл. Обычно испытываемое соединение оценивали при шести четырехкратных разбавлениях. В рутинных испытаниях самая высокая концентрация в лунке составляла 226,7 мкМ, но она могла и изменяться в зависимости от агента. Все концентрации лекарственных препаратов проверялись с дублированием. Инкубация клеток с испытываемыми соединениями продолжалась 72 часа при 37°С в атмосфере 5% СО₂ и влажности 100%. В конце инкубационного периода клетки оценивались с использованием Calcein AM. Десять микролитров исходного раствора переносили пипеткой в каждую лунку и далее инкубировали в течение одного часа. Флуоресценцию (FD) измеряли с помощью прибора Labsystem FIA Reader Ftorscan Ascent (Англия). Выживаемость опухолевых клеток (GI₅₀) рассчитывали, используя следующее уравнение: TCS=(FD_{лунки с лекарственными препаратами}/среднее FD_{контрольные лунки})×100% (TCS=tumour cell survival - выживаемость опухолевых клеток). Значение GI₅₀, летальная концентрация лекарственного препарата для 50% опухолевых клеток, рассчитывали из полученных кривых зависимости от дозы (фиг.1).

Цитотоксичность новых соединений была испытана на ряде линий клеток различного гистогенетического и видового происхождений (таблица 3). Здесь мы показываем, что для всех испытанных линий опухолевых клеток была обнаружена одинаковая активность, однако, доброкачественные клетки, например фибробласты NIH3T3 и нормальные человеческие лимфоциты, были стойкими к синтетическим ингибиторам, вызывающим цитотоксичность. Как показано в таблице 3, GI₅₀ для фибробластов NIH3T3 и нормальных человеческих лимфоцитов всегда была выше 250 мкМ. Эффективные новые производные убивают опухолевые клетки при концентрациях, близких к 10-50 мкМ.

Пример 4

Новые соединения вызывают апоптоз в опухолевых клетках

Для анализа механизма наводимой новыми соединениями цитотоксичности важно отличать апоптоз от другой формы смерти клетки, некроза. Во-первых, на уровне ткани, апоптоз образует мало или вовсе не образует воспаления, поскольку соседние клетки, особенно макрофаги, скорее не выделяют сморщенные части клеток во внеклеточную жидкость, а поглощают их. И наоборот, при некрозе, клеточное содержимое выделяется во внеклеточную жидкость, создавая раздражающий эффект для близлежащих клеток и вызывая воспаления. Во-вторых, на клеточном уровне, апоптозные клетки проявляют усыхание цитоплазмы, сохранение структуры клеточных органелл включает митохондрию, конденсацию и изоляцию хроматина, фрагментацию ядер и образование апоптозных тел, хотя не все они проявляются во всех типах клеток. В-третьих, на молекулярном уровне, ряд биохимических процессов играет важную роль в индуцировании апоптоза. Однако большинство из них еще не до конца понятны, и они выражаются в активации протеазы и нуклеазы, которые окончательно разрушают ключевые биологические макромолекулы - протеины и ДНК.

Для определения апоптозного и некротического видов клеточной смерти использовали два независимых метода: морфологическая оценка с помощью электронного микроскопа и анализ фрагментов ДНК с помощью проточной цитометрии.

Линия клеток HL-60 культивировалась в 6-луночных пластинках с культурой с или без новыми производными при концентрации 70 мкМ при температуре 37°С и 5% CO₂ в течение 3-24 часов. После инкубации клетки дражжировали, промывали в буферном солевом растворе Ханка и обрабатывали, как описано ниже.

Клетки суспендировали в 2% глютаральдегид/ PBS, фиксировали в течение ночи при 4°С, дражжировали и вводили в 1% агар (Agar Noble, Difco). Агаровые блоки, содержащие фиксированные клетки, эпоксидно полимеризовались, секционировались ультратином, постфиксировались тетраоксидом осмия, контрастировались уранилацетатом и проверялись под электронным микроскопом.

Начальная фаза микроскопной проверки контраста показала, что обработанная линия HL-60 проявляет типичные морфологические признаки апоптозных клеток, и это позже было подтверждено с помощью электронной микроскопии (фиг.2 и 3). Типичные морфологические критерии апоптоза были определены в клетках, обработанных всеми испытываемыми новыми производными: конденсация хроматина, фрагментация ядер, цитоплазменная пузырчатость и образование апоптозных тел.

Пример 5

Иммуноподавительная активность

Одним из наиболее важных параметров видового клеточного иммунитета является пролиферативная реакция лимфоцитов на антигены или поликлональные митогены. Большинство нормальных периферийных лимфоцитов млекопитающих включают покоящиеся клетки. Антигены или невидовые поликлональные митогены обладают способностью к активации лимфоидных клеток, и это сопровождается резкими изменениями внутриклеточного метаболизма (митохондриальная активность, протеиновый синтез, синтез нуклеиновых кислот, образование бластических клеток и клеточная пролиферация). Соединения со способностью к селективному ингибированию лимфоцитной пролиферации являются потенциальными иммунодепрессантами. Для измерения пролиферативной реакции лимфоцитов было проведено множество анализов in vitro. Наиболее используемым является метод введения³Н-тимидина.

Во время клеточной пролиферации ДНК должна воспроизводиться перед тем, как клетка делится на две дочерние клетки. Такая близкая ассоциация между дублированием клеток и синтезом ДНК очень привлекательна для оценки клеточной пролиферации. Если меченые предшественники ДНК добавляются к клеточной культуре, то клетки, готовые к делению, включают меченые нуклеотиды в свои ДНК. Традиционно, их анализ обычно включает применение радиомеченых нуклеотидов, в частности тритированного тимидина ([³H]-TdR). Количество [³H]-TdR, введенного в клеточный ДНК, определяется количественно с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика.

Человеческая гепаранизированная периферийная кровь была получена от здоровых добровольцев пункцией локтевой вены. Кровь была разбавлена в PBS (1:3) и моноядерные клетки были выделены с помощью центрифугирования в приборе Ficoll-Hypaque по градиенту плотности (Pharmacia, 1.077 г/мл) при 2200 об/мин в течение 30 минут. После центрифугирования лимфоциты промывались в PBS и повторно суспендировались в среде клеточной культуры (RMPI 1640, 2 мМ глютамина, 100 Е/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 10% эмбриональная телячья сыворотка и бикарбонат натрия).

Эти клетки разбавлялись до заданной плотности 1.100.000 клеток/мл и добавлялись с помощью пипетки (180 мкл) в титрационный микропланшет на 96 лунок. В ячейки титрационного микропланшета в нулевое время добавляли четырехкратные разбавления предназначенной испытательной концентрации в аликвотах 20 мкл. Обычно испытываемое соединение оценивали при шести четырехкратных разбавлениях. В рутинных испытаниях самая высокая концентрация в лунке составляла 226,7 мкМ. Все концентрации лекарственных препаратов проверялись с дублированием. Все лунки за исключением не стимулированных контрольных активировали с помощью 50 мкл конканавалина А (25 мкг/мл). Инкубация клеток с испытываемыми соединениями продолжалась 72 часа при 37°С в атмосфере 5% СО₂ и влажности 100%. В конце инкубационного периода клетки оценивались с использованием [³H]-TdR.

Клеточные культуры инкубировали с 0,5 мкКи (20 мкл исходного раствора 500 мкКи/мл) на лунку в течение 6 часов при 37°С и 5% CO₂. Автоматический харвестер клеток использовался для растворения клеток в воде и сорбции ДНК на стекловолоконных фильтрах в формате титрационного микропланшета. [³H]-TdR с внедренным ДНК задерживался на фильтре, тогда как вещество без внедрения проходило через него. Фильтры высушивались при комнатной температуре в течение ночи, запаковывались в мешок для проб с 10-12 мл сцинтиллятора. Количество [³H]-TdR, присутствующего на каждом фильтре (в счет/мин), определяли сцинтилляционным счетом в жидкостном сцинтилляционном счетчике. Эффективная доза иммунодепрессанта (ED) рассчитывалась с использованием следующего уравнения: ED=(ССРМ_{лунки с лекарственными препаратами}/mean ССРМ_{контрольные лунки})×100%. Значение ED₅₀, концентрация лекарственного препарата, ингибирующая пролиферацию 50% лимфоцитов, рассчитывали по полученным кривым зависимости от дозы.

Для оценки иммуноподавительной активности замещенных аденинов анализировалась их способность к ингибированию пролиферации нормальных человеческих лимфоцитов, индуцируемой полигональными митогенами (таблица 4). Наши данные демонстрируют, что эти соединения обладают только маргинальной активностью по внедрению³Н-тимидина, однако, они эффективно ингибируют пролиферацию активированных лимфоцитов. Эффективная иммуноподавительная доза новых производных в условиях in vitro была близка к 1-20 мкМ.

Пример 6

Ингибирование старения новыми соединениями

В данном примере человеческие диплоидные фибробласты (клетки HCA с различными уровнями пассажа: пассаж 25 - обозначено НСА25; пассаж 45 - обозначено НСА45; пассаж 80 - обозначено НСА80) окрашивались для β -галактосидазной активности. Среда, используемая для культивирования клеток, удалялась, клетки дважды промывались в PNS и фиксировались в 2-3 мл фиксирующего раствора, включающего в себя 2% формальдегида и 0,2% глютаральдегида в PBS. Клетки инкубировали при комнатной температуре в течение 5 минут, затем дважды промывали в PBS. Затем клетки инкубировали при 37°С (без СО₂ ) в течение от 1 до 16 часов в 2-3 мл раствора, включающего в себя феррицианид калия (5 мМ), ферроцианид калия (5 мМ), MgCl₂ (2 мМ), X-gal (5-бром-4-хлор-3-индолил-β -D-галактопиранозид) (1 мг/мл), в лимонно/фосфатном буферном растворе (рН 6.0). После такого инкубационного периода пробы клеток рассматривали на предмет обнаружения присутствия синих клеток, указывающих на расщепление X-gal (положительно стареющие клетки). В этом эксперименте стареющие клетки, но не другие клетки, окрашивались синим красителем по воздействию β-галактосидазы на субстрате (фиг.4).

Как показано в таблице 5, с увеличением количества пассажей окрашивание становится темнее. Для более старых клеток были только синие клетки в интервале от светло-синего до почти темного цвета. Производные N⁶-замещенного аденина были очень эффективными в удерживании гораздо более низкого уровня стареющих клеток после 80 пассажей. В случае долго поддерживаемого культивирования обработанные клетки были способны выживать более длительный период на 30% больше, чем контрольные клетки.

Пример 7

Ингибирование старения новыми соединениями, испытанными на сегментах листьев озимой пшеницы

Семена озимой пшеницы, Triticum aestivum cv. Hereward, промывали в проточной воде в течение 24 часов, а затем высеивали на вермикулит, смоченный раствором Кнопа. Они были помещены в камеру выращивания при 25°С со световым периодом 16/8 при 50 мкмоль м^-2с^-1. Через 7 дней был полностью развитый первый лист и начинал расти второй лист. Верхняя часть первого листа, длиной приблизительно 35 мм, была удалена у пяти ростков и слегка подрезана до общего веса 100 мг. Нижние концы кончиков пяти листьев были помещены в лунки полистирольного титрационного микропланшета, содержащего 150 мкл цитокинина в каждой. Весь микропланшет был помещен в пластиковую коробку, выложенную бумажной тканью, смоченной дистиллированной водой для предотвращения разрезов листьев от высыхания. После 96-часовой инкубации в темноте при 25°С листья были удалены, и хлорофилл экстрагировали путем нагревания при 80°С в течение 10 минут в 5 мл 80% этанола. Объем пробы затем был восстановлен до 5 мл путем добавления 80% этанола. Поглотительная способность экстракта отмечалась при 665 нм. Кроме того, замерялись экстракты хлорофилла из свежих листьев и кончиков листьев, инкубированных в деионизированной воде. Из полученных данных для каждого проверенного соединения была выбрана концентрация с наивысшей активностью. Была рассчитана относительная активность соединения для этой концентрации (таблица 6). Активность, полученная для 10^-4 М 6-бензиламинопурина (ВАР) была принята за 100%. Показанные значения являются средними из пяти реплик, и весь эксперимент был повторен дважды. Испытываемые цитокинины растворяли в диметилсульфоксиде (DMSO) и раствор доводили до 10^-3 М дистиллированной водой. Этот исходный раствор затем разбавляли в дистиллированной воде до концентраций в интервале от 10^-8 М до 10^-4 M. Конечная концентрация DMSO не превышала 0.2% и поэтому не проявляла биологической активности в применяемой системе анализа.

Пример 8

Стимулирующий эффект новых соединений на деление растительных клеток

Цитокининзависимый табачный каллус Nicotiana tabacum L. cv. Wisconsin 38 выдерживали при 25°С в темноте на модифицированной среде Murashige-Skoog, содержащей на 1 литр: 4 мкмоля никотиновой кислоты, 2.4 мкмоля пиридоксингидрохлорила, 1.2 мкмоля тиамина, 26.6 мкмоля глицина, 1.37 мкмоля глютамина, 1.8 мкмоля миоинозитола, 30 г сахарозы, 8 г агара, 5.37 мкмоля α-нафталиновой кислоты (NAA) и 0.5 мкмоля бензиламинопурина (ВАР). Субкультивирование выполнялось каждые три недели. За четырнадцать дней до биопробы ткань каллуса переносили в среду без 6-бензиламинопурина (ВАР). Биологическую активность определяли по увеличению веса свежего каллуса после четырех недель культивирования. Для каждой концентрации цитокинина готовилось по пять реплик и все испытание повторялось дважды. Из полученных данных для каждого проверяемого соединения была выбрана концентрация с наивысшей активностью. Была рассчитана относительная активность соединения для этой концентрации (таблица 6). Активность, полученная для 10^-4 М 6-бензиламинопурина (ВАР), была принята за 100%. Испытываемые цитокинины растворяли в диметилсульфоксиде (DMSO) и раствор доводили до 10^-3M дистиллированной водой. Этот исходный раствор затем разбавляли в соответствующей среде, используемой для биоиспытаний, до концентраций в интервале от 10^-8М до 10^-4M. Конечная концентрация DMSO не превышала 0.2% и поэтому не проявляла биологической активности в применяемой системе анализа.

Пример 9

Испытания новых соединений в биоанализе амаранта

Стандартный биоанализ Amaranthus выполняли с некоторыми модификациями. Семена Amaranthus caudatus var. atropurpurea поверхностно стерилизовали в 10% N-хлорбензолсульфонамиде (вес/об.) в течение 10 минут и промывали пять раз в деионизированной воде. Их помещали в чашки Петри 14 см, содержащие бумажную ткань, насыщенную деионизированной водой. После 72 часов культивирования в темноте при 25°С отрезали корни семян. Культивированные ткани, содержащие по две семядоли и гипокотили, помещали в чашки Петри 5 см на два слоя фильтровальной бумаги, смоченной в 1 мл инкубационной среды, содержащей 10 мкмоль

Испытываемые цитокинины растворяли в диметилсульфоксиде (DMSO) и раствор доводили до 10^-3М дистиллированной водой. Этот исходный раствор затем разбавляли в соответствующей среде, используемой для биоиспытаний, до концентраций в интервале от 10^-8М до 10^-4М. Конечная концентрация DMSO не превышала 0.2% и поэтому не проявляла биологической активности в применяемой системе анализа.

Пример 10

Влияние новых производных на in vitro и post vitro мультипликацию и корнеобразование розы (Rosa multiflora)

Целью настоящего эксперимента была проверка, имеют ли новые соединения практическое применение в разведении тканевых культур. Изучали скорость мультипликации и проверяли post vitro эффекты. Rosa hybrida (культурный сорт розы в горшках) культивировалась в емкости 350 мл с нарезкой на поликарбонатной крышке. Каждая емкость с культурой содержала 100 мл автоклавированной среды (120°С, 20 мин). Культуры содержались при 23±2°С при фотопериоде 16 часов на 40 мкМ м^-2 с^-1 PAR. Питательная основная среда (BMR) содержала макроэлементы, микроэлементы и витамины Murashige and Skoog (1962), 95 мкМ NaFeEDTA, 555 мкМ миоиноситола, 111 мМ сахарозы, 1.332 мМ глицина, 684 мкМ L-глютамина и 7 г/л агара. В эту среду добавили 10 мкМ ВА, mT, оМеОВАР или mMeOBAP (соединение №14 и 15, соответственно). Контрольная среда не содержала цитокинин. После периода культивирования 8 недель определяли количество образовавшихся ростков на эксплант, а также количество корней на эксплант и общую длину корня на эксплант. Корни удаляли и экспланты (группы ростков) пересаживали в неудобренный торф. После четырехнедельной акклиматизации определяли количество корней и длину корней.

Как ожидалось, в среде без цитокинина почти не образовывалось новых ростков. Исходный отростковый эксплант вырастал в виде единичного ростка хорошего качества с хорошим корнеобразованием. ВАР давал высокую скорость мультипликации ростков, но ростки плохо образовывали корни. Испытанные новые производные ВАР индуцировали образование новых ростков и корневое развитие значительно лучше в сравнении с самим ВАР (таблица 9).

Пример 11

Ингибирование раннего старения корней культивируемых тканевых роз (Rosa hybrida)

Культивируемые тканевые розы страдают от симптомов старение. Листья начинают коричневеть и через несколько недель все растения в сосуде умирают. Симптомы начинаются раньше, если в сосуде затруднена аэрация, например, с помощью пластиковой фольги. Это предполагает, что здесь замешаны этилен или другие газообразные компоненты. Цитокинины, которые применяются в такой среде, индуцируют этилен, поэтому представляется заслуживающим испытать новые соединения цитокинина в этой системе.

Rosa hybrida 'Pailin' (срезанная роза) культивировалась в сосуде 350 мл с закрученной поликарбонатной крышкой. Каждый сосуд с культурой содержал 100 мл автоклавированной среды (120°С, 20 мин).

Культуры содержались при 23±2°С при фотопериоде 16 часов на 40 мкМ м^-2 с^-1 PAR. Питательная основная среда (BMR) содержала макроэлементы, микроэлементы и втамины Murashige and Skoog (1962), 36.7 мг/л NaFeEDTA, 50 мг/л NaFeEDDHA, 100 мг/л миоиноситола, 30 г/л сахарозы, 100 мг/л глицина, 50 мг/л пантотената кальция, 100 мг/л L-глютамина и 7 г/л агар-агара. В эту среду добавили 10 мкМ ВА, mT, оМеОВАР. Последние 2 цитокинина были стерилизованы на фильтре и добавлены в сосуды после автоклавной обработки среды. Контрольная среда не содержала цитокинин. После периода культивирования 6 недель начинали отсчет симптомов старения. Для каждого растения отмечали день, когда появлялся первый коричневый лист (фиг.8), а также день полного умирания всего растения (фиг.9, 10).

В среде с ВА (бензиламино) относительное количество мертвых растений выглядит как сигмоидальная кривая, предполагая автокаталитический эффект старения, вызываемый, возможно, этиленом. Представляло бы интерес замерить концентрацию этилена в свободном пространстве над средой. На mT и mMeOBAP ситуация улучшалась. mMeOBAP был явно лучшим соединением. Даже через 121 день почти все растения были еще живые. Хотя некоторого количества коричневых листьев нельзя было избежать на среде с mMeOBAP, эти растения можно было легко использовать для следующей субкультуры. Использование mMeOBAP является значительным усовершенствованием в микроразмножении роз (Rosa hybrida).

Пример 12

Сухие капсулы

5000 капсул, каждая из которых содержала 0.25 г одного из соединений формулы I, II и III, названных в предыдущих или последующих примерах в качестве активного ингредиента, приготовлены следующим образом:

Состав

Методика приготовления: названные порошкообразные вещества прессовались через сито с шириной ячейки 0.6 мм. Доли 0.33 г переносились в желатиновые капсулы с помощью машины для заполнения капсул.

Пример 13

Мягкие капсулы

5000 мягких желатиновых капсул, каждая из которых содержала 0.05 г одного из соединений формулы I, II и III, названных в предыдущих или последующих примерах в качестве активного ингредиента, приготовлены следующим образом:

Состав

Методика приготовления: порошкообразный активный ингредиент суспендировали в Лаурогликоле^® (лаурат пропиленгликоля, Gattefossé S.A., Saint Priest, Франция) и измельчали во влажном распылителе до размера частиц примерно от 1 до 3 мкм. Затем доли 0.419 г смеси для каждого случая переносили в мягкие желатиновые капсулы с помощью машины для заполнения капсул.

Пример 14

Мягкие капсулы

5000 мягких желатиновых капсул, каждая из которых содержала 0.05 г одного из соединений формулы I, II и III, названных в предыдущих или последующих примерах в качестве активного ингредиента, приготовлены следующим образом:

Состав

Методика приготовления: порошкообразный активный ингредиент суспендировали в PEG 400 (полиэтиленгликоль молекулярной массы между 380 и примерно 420, Sigma, Fluka, Aldrich, США) и Tween^® 80 (монолаурат полиоксиэтиленсорбита, Atlas Chem. Inc., США, поставляемый Sigma, Fluka, Aldrich, США) и измельчали во влажном распылителе до размера частиц примерно от 1 до 3 мкм. Затем доли 0.43 г смеси для каждого случая переносили в мягкие желатиновые капсулы с помощью машины для заполнения капсул.

Промышленная применимость

Новые гетероциклические соединения на основе N⁶-замещенного аденина в соответствии с настоящим изобретением полезны при диагностических и терапевтических методах, особенно в фармацевтической промышленности, в косметике, в биотехнологии и в сельском хозяйстве.

Реферат

Предложены новые гетероциклические производные на основе N⁶-замещенного аденина с общей формулой I

где значения радикалов указаны в описании, и его фармацевтически приемлемые соли, обладающие противораковыми, митотическими, иммуноподавительными и противостареющими свойствами для растительных, животных и человеческих клеток, и способы их приготовления. Включены также фармацевтические составы, косметические препараты и регуляторы роста, которые содержат эти производные как активное соединение, и применение этих производных для приготовления лекарственных препаратов, косметических препаратов, в косметике и в сельском хозяйстве. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 9 табл., 10 ил.

Формула

1. Применение гетероциклических соединений, основанных на N⁶-замещенном аденине с общей формулой I

и их фармацевтически приемлемых солей, где

R2 является водородом, галогеном, аминогруппой, неразветвленной C₁ -С₆ алкилмеркаптогруппой,

R6 является R6^'-X,

где, в свою очередь, Х является -NH-,

а R6^' является замещенным фенилом или замещенным бензилом, где родовые группы замещения имеют значения, идентичные определениям соответствующих групп, которые приведены ниже в настоящем документе:

"замещенный фенил" относится к фенильной группе, которая замещается от одной до пяти функциональными группами, выбираемыми из группы, содержащей галоген, алкил, гидрокси, амино, алкокси, карбоксил, нитро, как определено ниже в настоящем документе;

"замещенный бензил" относится к фенилметильной группе, где фенильная группа замещается от одной до пяти функциональными группами, выбираемыми из группы, содержащей галоген, алкил, гидрокси, амино, алкокси, карбоксил, нитро, как определено ниже в настоящем документе;

тогда как родовые группы замещения имеют значения, идентичные с определениями соответствующих групп, которые приведены в настоящем документе:

"галоген" относится к атомам фтора, брома, хлора и йода;

"гидрокси" относится к группе -ОН;

"алкил" относится к разветвленной или неразветвленной цепи C₁-С₆, которая является насыщенной или ненасыщенной и выбирается из групп, таких, как метил, пропил, изопропил, третбутил и подобным примерам этого термина;

"алкокси" обозначает группу -OR, где R является алкилом, определение которому было дано выше в данном пункте;

"алкилмеркапто" обозначает группу -SR, где R - алкоксигруппа, определение которой дано выше в данном пункте;

"карбоксил" обозначает группу -С(O)ОН;

а также рацематы, оптические изомеры и соли кислот на их основе,

при условии, что R6^' не является дигидроксибензилом или дигидроксифенилом, а также при условии, что R6' не является следующим соединением: 4-метилбензил, 4-хлорбензил, 4-трифторметилбензил, 4-метилсульфонилбензил, 4-метилфенил, 2-фторфенил, 4-цианофенил,

при производстве медикаментов, косметических средств и регуляторов роста.