Композиция пептидов коллагена кожи рыбы и её применение в качестве лекарственного средства - RU2019109793A
Код документа: RU2019109793A
Формула
1. Композиция пептидов, имеющая аминограмму, согласно которой:
глицин содержится в таком мольном количестве, что отношение указанного количества к сумме мольных количеств аминокислот в композиции составляет от 20,0% до 24,5%;
гидроксипролин содержится в таком мольном количестве, что отношение указанного количества к сумме мольных количеств аминокислот в композиции составляет от 6,0% до 12,0%;
пролин содержится в таком мольном количестве, что отношение указанного количества к сумме мольных количеств аминокислот в композиции составляет от 10,6% до 14,6%;
при этом композиция пептидов, по результатам анализа путем эксклюзионной хроматографии, в процессе которой каждый из пептидов композиции пептидов элюируется со временем удерживания, которое характеризует кажущуюся молекулярную массу указанного пептида, характеризуется кривой элюирования пептидов, имеющих значение площади под кривой, соответствующее кажущейся молекулярной массе пептидов менее 1400 Да, такое что отношение указанной площади к общей площади под кривой составляет менее 40%;
при этом пептиды указанной композиции пептидов имеют среднее значение кажущейся молекулярной массы от 2500 Да до 3600 Да;
при этом указанный анализ проводят, как описано ниже:
на колонке для фильтрации с размерами 300×7,8 мм, содержащей неподвижную фазу, образованную из силикагеля с пористостью 5 мкм;
температуру колонки поддерживают на уровне 40°С;
с применением в качестве подвижной фазы раствора, образованного (А) сверхчистой водой, содержащей 0,1 об. % трифторуксусной кислоты, и (В) ацетонитрилом, где объемное отношение А/В составляет 75/25;
введение в верхнюю часть колонки для гель-фильтрации объема раствора, содержащего композицию пептидов;
скорость потока подвижной фазы в колонке составляет 0,6 мл/мин, и;
пептиды композиции детектируют по поглощению при длине волны 214 нм.
2. Композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что каждый пептид композиции имеет кажущуюся молекулярную массу от 200 Да до 12000 Да.
3. Композиция по одному из пп. 1 и 2, характеризующаяся тем, что по результатам хроматографического анализа на анионообменной колонке, в процессе которого каждый из пептидов композиции пептидов элюируется из колонки со временем удерживания, которое характеризует его заряд, он имеет:
значение площади под пиком, соответствующим анионным пептидам;
значение площади под пиком, соответствующим нейтральным пептидам, и;
значение площади под пиком, соответствующим катионным пептидам;
такие, что отношение указанного значения площади под пиком, соответствующим анионным пептидам, к сумме значений площадей под пиками, соответствующими анионным пептидам, нейтральным пептидам и катионным пептидам композиции, составляет от 27,0% до 45%;
при этом значение площади под пиком, соответствующим анионным пептидам, значение площади под пиком, соответствующим катионным пептидам, и значение площади под пиком, соответствующим нейтральным пептидам, определены путем хроматографического анализа в условиях, описанных ниже:
применение хроматографической колонки с размерами 100×7,8 мм, содержащей в качестве неподвижной фазы гидрофильную анионообменную смолу, функционализированную группами четвертичного аммония, с размером частиц 10 мкм;
применение в качестве первой подвижной фазы для элюирования катионных пептидов и нейтральных пептидов 5 мМ водного Трис-буфера (С) при рН 8,35 в течение 7 минут с момента введения композиции, подлежащей анализу, в верхнюю часть колонки, а затем применение второй подвижной фазы для элюирования анионных пептидов, в которой отношение объема буфера (D), полученного из 5 мМ Трис, 5 М NaCl при рН 8,35, к объему буфера (С) линейно увеличивается от 0 до 100% в течение 30 минут;
со скоростью потока подвижной фазы в колонке 1 мл/мин;
анализ проводят при температуре 25°С, и;
с детектированием по поглощению при длине волны 214 нм на выходе из колонки.
4. Композиция по одному из пп. 1-3, характеризующаяся тем, что пептиды, по результатам анализа гидрофобности путем обращенно-фазовой жидкостной хроматографии, имеют время удерживания от 16 мин до 36 мин;
указанный анализ гидрофобности проводят в следующих условиях:
применение хроматографической колонки с размерами 250×4,6 мм, содержащей неподвижную фазу, полученную из диоксида кремния, привитого бутильными группами, с размером частиц 5 мкм и значением пористости
применение в качестве первой подвижной фазы для элюирования гидрофильных пептидов раствора (Е) трифторуксусной кислоты в концентрации 0,1% в сверхчистой воде в течение 7 минут с момента введения композиции, подлежащей анализу, в верхнюю часть колонки, а затем применение второй подвижной фазы для элюирования гидрофобных пептидов, в которой отношение объема раствора (F) трифторуксусной кислоты в концентрации 0,1% в воде, содержащей 40% ацетонитрила, к объему раствора (Е) линейно увеличивается от 0 до 40% в течение 30 минут;
со скоростью потока подвижной фазы в колонке 0,6 мл/мин;
анализ проводят при температуре 40°С, и;
с детектированием по поглощению при длине волны 214 нм на выходе из колонки.
5. Композиция по одному из пп. 1-4, характеризующаяся тем, что она находится в жидком состоянии.
6. Композиция по одному из пп. 1-4, характеризующаяся тем, что она представляет собой твердое вещество в разделенном виде.
7. Композиция по одному из пп. 1-6, характеризующаяся тем, что она не содержит углеводов.
8. Композиция по одному из пп. 1-7, характеризующаяся тем, что она не содержит жиров.
9. Композиция по одному из пп. 1-8, характеризующаяся тем, что пептиды композиции являются водорастворимыми.
10. Композиция по одному из пп. 1-9, характеризующаяся тем, что пептиды композиции образуются в результате контролируемого ферментативного гидролиза коллагена из кожи по меньшей мере одной рыбы, выбранной из группы, состоящей из рыб семейства Pangasiidae и семейства Cichlidae.
11. Композиция по одному из пп. 1-10 для ее применения в качестве лекарственного средства.
12. Композиция по п. 11 для ее применения для лечения желудочно-кишечного заболевания.
13. Композиция по одному из пп. 10 и 11 для ее применения для лечения кандидоза кишечного тракта.
14. Композиция по одному из пп. 10 и 11 для ее применения для лечения желудочно-кишечного воспаления.
15. Композиция по одному из пп. 10 и 11 для ее применения для поддержания кишечной микробиоты.
16. Применение композиции по одному из пп. 1-10 в пищу человека.
