Способ получения концентрата гема - SU1660573A3

Описание

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской промышленности и касается способа получения концентрата тема.

Цель изобретения - повышение концентрации тема в концентрате.

Согласно данному способу производят извлечение концентрата тема из смеси тема с кровяным веществом, получаемой при расщеплении гемоглобина, при этом концентрат тема отделяют от глобина таким образом, что концентрат гема превращается в растворенную форму, в то время как остальное вещество находится в нерастворенной форме.

П р и м е р 1. Взятую из организма кровь с добавкой в нее цитрата натрия в качестве коагулянта разделяют путем центрифугирования , в результате чего получают плазму и раствор красных кровяных клеток. К жидкому раствору красных кровяных клеток добавляют хлорид натрия и этанол в таком количестве, чтобы получилось 2,2 г смеси красных кровяных клеток, содержащей 0,34 г белка, 0,16 г хлорида натрия, 0,26 г 100%- ного этанола, 1,44 г воды и растворимые вещества, присутствующие в крови. Белок, главным образом гемоглобин, определяется посредством осаждения этанолом 2.2 г смеси кровяных клеток содержат 11,1 мг геми- на, что определено методом по пиридину.

Смесь 4 мл 96%-ного (по объему) этанола и 0,8 мл 1 М HCI при температуре - 8°С вводят по каплям при одновременном перемешивании и охлаждении в 2,2 г смеси кро- вяных клеток при -5°С. После этого введения величина рН составляет 3.1 и температура составляет -5°С. В смесь вводят 3 мл ледяной воды и 1,8 мл 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле при одновременном перемешивании и охлаждении; температура смеси составляет -5°С, и величина

§ сл

XI СА)

IGJ

рН составляет 7,5. По прошествии 5 мин в смесь вводят 10 мл 96%-ного (по объему) этанола, 10 мл 70%-ного (по объему) этанола , 1 мл 1 М глицина в водном растворе и 2,2 мл 0,5 М NaOH, при одновременном пере- мешивании и охлаждении. После этого смесь содержит 67% (по объему) этанола, величина рН составляет 10,3 и температура ее -5°С. Смесь центрифугируют при 3000 g в течение 5 мин, в результате чего получают всплывший слой красного цвета и коричневато-красную пасту. Всплывший слой содержит 0,18 мг гема/мл (61,5% содержания тема от содержания его в исходном материале ),

Данную пасту в третий раз обрабатывают так, как указано выше, в результате чего достигается содержание тема 0,06 мг/мл (5,4% содержания тема от содержания в исходном материале). Общий выход концентрата тема составляет 78,6%. Данная паста имеет коричневый цвет и вес ее в сухом состоянии составляет 0,27 г (выход белка 79,5%).

П р и м е р 2. Осуществляя процесс таким же образом, как в примере 1, величину рН понижают до 3,1, после этого доводят величину рН до 7,5. Смесь экстрагируют таким же образом, как и в примере 1, но вводя одновременно 1 мл 2 М имидазола в 70%- ном (по объему) этаноле. Величину рН доводят до 8,4. Повторяют операцию еще двукратно. Всплывшие на поверхность слои содержат соответственно 79, 12 и 4% тема от содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 95%. Данная паста имеет светло-коричневый цвет и содержит 85% белка от содержания в исходном материале.

П р и р 3. Смесь 2 мл воды и 0,7 мл соляной кислоты (1 М) при температуре 1°С вводят по каплям при одновременном перемешивании и охлаждении в 2,2 г смеси кро- вяных клеток при -8°С. После этого величину рН доводят до 3,2 и температуру доводят до -5°С. Затем в эту смесь вводят 4 мл 96%-ного (по объему) этанола, 10 мл 70%-ного (по объему) этанола, 1 мл 1 М глицина в виде водного раствора, 1 мл 2 молярного имидазола в 70%-ном (по объему ) этаноле и 1,5 мл 0,5 молярного NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле, рН 8,0 при одновременном перемешивании и охлаждении; температуру смеси поддерживают - -5°С, содержание этанола составляет примерно 56 об.%. Смесь центрифугируют по прошествии 5 мин, как и в примере 1, и получают -всплывший слой, содержащий 59% тема от исходного материала, и коричневую пасту, Пасту экстрагируют двукратно

10 мм 70%-ного (по объему) этанола каждый раз при величине рН 8,0 и получают всплывшие слои, содержащие соответственно 18 и 8% тема от содержания в исходном матери- але, Общий выход концентрата тема 85%. Паста имеет коричневый цвет и содержание белка составляет 72% от содержания в исходном материале.

П р и м е р 4. Смесь 3 мл 96%-ного (по 0 объему) этанола и 0,35 мл 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле при -10°С вводят по каплям при одновременном перемешивании и охлаждении в 2,2 г смеси кровяных клеток при -10°С. После этого ве- 5 личина рН составляет 10,2 и температура, составляет -10°С. К данному раствору добавляют смесь 2 мл ледяной воды, 3 мл 50%-ного (по объему) этанола и 0,15 мл 1 М HCI при -10°С. Величина рН смеси состав- 0 ляет 7,5 и температура -10°С. К этому раствору добавляют смесь 5 мл 96%-ного (по объему) этанола, 5 мл 70%-ного (по объему) этанола и 2 мл 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле при -10°С. Величина рН 5 полученной смеси составляет 10,3, температура -10°С,содержание этанола примерно 64% (по объему). По прошествии 5 мин смесь центрифугируют, как и в примере 1, и получают всплывший слой с содержанием 0 тема 46% от содержания в исходном материале и темно-коричневую пасту. Пасту два раза экстрагируют 10-ю мл 65%-ного (по объему ) этанола, каждый раз при величине рН 10,3 и при -10°С, и получаются всплывшие 5 слои, содержащие соответственно 14 и 7% тема от содержания его в исходном материале . Общий выход концентрата тема составляет 67%. Получаемая паста коричневого цвета и имеет содержание белка 71% от 0 содержания в исходном материале.

П р и м е р 5. Осуществляя процесс таким же образом, как и в примере 4, величину рН смеси кровяных клеток повышают до 10,2 и температуру поддерживают 0°С. В 5 этот раствор вводят смесь 3 мл 50%-ного (по объему) этанола и 0,2 мл 1 М HCI при 0°С. Величина рН смеси составляет 8,2 и температура составляет 0°С. Затем в этот раствор вводят смесь 5 мл 96%-ного (по объему) эта- 0 нола и 10 мл 70%-ного (по объему) этанола при 0°С. Величина рН получаемой смеси составляет 8,2, температура составляет 0°С и содержание этанола составляет 66% (по объему). По прошествии 5 мин смесь цент- 5 рифугируют, как и в примере 1. Получают всплывший слой с содержанием 52% тема от его содержания в исходном материале и темно-коричневую пасту. Пасту два раза экстрагируют 10-ю мл 65%-ного (по объему) этанола и 0,2 мл имидазола в 70%-ном (по

объему) этаноле, каждый раз при величине рН 8,2 и при 0°С, и получаются всплывшие слои с содержанием тема соответственно 28 и 12% от его содержания в исходном материале . Общий выход концентрата тема со- ставляет 92%. Получаемая паста имеет коричневый цвет и содержит 85% белка от исходного материала.

П р и м е р 6. Смесь ,1 мл воды и 0,8 мл 0,5 М NaOH при 10°С вводят по каплям при одновременном перемешивании в 2,2 г смеси кровяных клеток при температуре 10°С. После этого величина рН составляет 11,0 и температура 10°С. В получаемый раствор вводят 4 мл 96%-ного (по объему) этанола, 1 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле, 1 мл 30%-ного цитрата натрия в виде водного раствора и 0,5 мл 1 М HCI. Величина рН полученной смеси составляет 7,5 и температура 10°С. После этог.о вводят в смесь 3 мл 96%-ного (по объему) этанола и 10 мл 70%-ного (по объему) этанола. Величина рН смеси составляет 7,5, температура составляет 10°С, и содержание этанола составляет примерно 64% (по объему). По про- шествии 5 мин смесь центрифугируют, как и в примере 1, и получают всплывший слой с содержанием 53% тема от содержания его в исходном материале и темно-коричневую пасту. Пасту экстрагируют два раза 10 мл 65%-ного (по объему) этанола и 0,1 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле, каждый раз при величине рН 7,5 и при 10°С, и получаются всплывшие слои, содержащие соответственно 26 и 13% тема от содержа- ния его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 92%. Паста имеет коричневый цвет и содержит 74% белка от содержания его в исходном материале.

Пример. Смесь 5,5 мл 96%-ного (по объему) этанола и 1,0 мл 1-молярной HCI при температуре -18°С вводят по каплям при одновременном перемешивании и охлаждении в смесь 2,2 г смеси кровяных кле- ток, 0,1 мл 1 М глицина в виде водного- раствора, 0,1 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле и 2 мл 50%-ного (по объему) этанола при -18°С. После этого ве- /гёшина рН составляет 3,0 и температура - -18°С. В полученный раствор вводят 3 мл 40%-ного сульфата аммония в виде водного раствора при одновременном перемешивании и охлаждении. По прошествии 5 мин в раствор вводят смесь 10 мл 96%-ного (по объему) этанола, 20 мл (по объему) этанола и 4 мл 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле при -18°С, при одновременном перемешивании и охлаждении. После этого величина рН составляет 7,5 и температура -18°С, содержание этанола примерно 69% (по объему). Смесь центрифугируют так, как в примере 1. Полученную пасту экстрагируют два раза 20 мл 70%-ного (по объему ) этанола, 0,1 мл 1 М глицина в виде водного раствора и 0,1 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле каждый раз при величине рН 7,5 и при -18°С. Содержание тема во всплывшем слое составляет соответственно 69,14 и 5% от содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 88%. Получаемая паста имеет светло-коричневый цвет и имеет содержание белка 81% от содержания его в исходном материале.

ПримерЗ. Смесь 8 мл 96%-ного (по объему) этанола и 0,8 мл 1 М HCI при -5°С вводят по каплям при одновременном перемешивании и охлаждении в 2,2 г смеси кро- вяных клеток при -5°С. После этого величина рН составляет 3,1 и температура -5°С. В данную смесь вводят 0,8 мл 0,2 М NaOH в 50%-ном (по объему)этаноле и 10мл 50%-ного (по объему) этанола, после чего величина рН смеси составляет 3,5 и температура -5°С. Смесь центрифугируют при 9000 g в течение 5 мин, после чего получаются желтый всплывший слой и черная паста . Из всплывшего слоя после ввода в него 8 мл воды пои величине рН 7.5 осаждается серый белок, содержащий 0,21 г сухого вещества . Гемовую пасту черного цвета перемешивают со смесью 30 мл 70%-ного (по объему) этанола, 0,5 мл 1 М глицина в виде водного раствора, 0,5 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле и 2,5 мл 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле. Величина рН смеси составляет 8,6, температура -5°С и содержание этанола примерно 70% (по объему). Смесь центрифугируют при 3000 g в течение 5 мин и получают всплывший слой с содержанием гема 72% от его содержания в исходном материале и коричневую пасту. Пасту экстрагируют два раза 30 мл 70%-ного (по объему) этанола и 0,1 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле , каждый раз при велишне рН 8,6 и при -5°С и получают всплывшие слои с содержанием гема соответственно 19 и 8% от-содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата гема составляет 99%. Получаемая паста имеет зеленовато-коричневый цвет и содержит 0.1 г сухой массы. Общий выход белка 91 %.

П р и м е р 9. а. Осуществляя процесс так, как в примере 8, происходит отделение черной гемовой пасты при использовании в качестве исходного материала 2.2 г смеси кровяных клеток. Пасту смешивают с 30 мл 50%-ного (по объему) этанола и величину рН

доводят до 8,5 посредством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле при -1°С. Содержание этанола составляет примерно 50% (по объему). Смесь центрифугируют так, как в примере 8 и получают всплывший слой, в котором содержание тема составляет 33% от содержания его в исходном материале , и темно-коричневую пасту. Эту пасту экстрагируют три раза 30 мл 50%-ного (по объему) этанола, каждый раз при величине рН 9,0 и при -1°С и получают всплывшие слои с содержанием тема соответственно 24, 13 и 9% от содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 79%. Данная паста имеет коричневый цвет и содержание в ней сухой массы составляет 0,1 г. Общий выход белка 91%.

б. Осуществляя процесс так, как в примере 8, пррисходит отделение черной гемо- вой пасты при использовании в качестве исходного материала 2,2 г смеси кровяных клеток. Пасту смешивают с 30 мл 40%-ного (по объему) этанола и величину рН доводят до 10,7 посредством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле. Температура составляет -4°С и содержание этанола примерно 40% (по объему). Смесь центрифугируют так, как в примере 8, и получают всплывший слой с содержанием тема 71% от содержания его в исходном материале и коричневую пасту. Эту пасту экстрагируют два раза 30 мл 40%-ного (по объему) этанола, каждый раз при величине рН 10,7 и при -4°С, и получают всплывшие слои с содержанием тема соответственно 7,2 и 4,8% от содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 83%. Получаемая паста имеет светло-коричневый цвет и содержит 0,08 г сухой массы. Общий выход белка 85%.

ПримерЮ. Осуществляя процесс так, как в примере 8, выделяют черную гемовую пасту, используя в качестве исходного материала 2,2 г смеси кровяных клеток. Эту пасту перемешиваютсо смесью 20 мл 60%-ного (по объему) этанола, 0,2 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле и 1 мл 40%-ного (по весу) сульфата аммония в виде водного раствора. Величину рН доводят до 6.8 посредством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле. Температура составляет 25°С, и содержание этанола примерно 60% (по объему). Смесь центрифугируют так, как в примере 8, и получают всплывший слой с содержанием тема 63% от содержания его в исходном материале, и коричневато-красную пасту. Пасту два раза экстрагируют 60%-ным (по объему) этанолом, имидазолом и сульфатом аммония в указанных количествах , каждый раз при величине рН равной 6,8

и при температуре 25°С и получаются всплывшие слои с содержанием тема соответственно 14 и 8% от содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 85%. Получаемая паста имеет коричневый цвет и содержание в ней сухой массы составляет 0,07 г. Общий выход белка 83%.

П р и м е р 11. Осуществляя процесс так,

0 как описано в примере 8, выделяют черную гемовую пасту, используя в качестве исходного материала 2,2 г смеси кровяных клеток. Эту пасту перемешивают со смесью 30 мл 96%-ного (по объему) этанола и 0,2 мл 1 М

5 глицина в виде водного раствора. Величину рН доводят до 10,4 посредством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле. Температура составляет -20°С. содержание этанола примерно 90% (по объему). Смесь центрифу0 гируют так, как в примере 8, и получают всплывший слой с содержанием тема 61% от содержания его в исходном материале, и темно-коричневую пасту. Пасту экстрагируют два раза 90%-ным (по объему) этанолом

5 и глицином в указанных количествах, каждый раз при величине рН 10,4 и при -20°С и получают всплывшие слои с содержанием тема соответственно 20 и 9% от содержания его в исходном материале. Общий выход

0 концентрата тема составляет 90%. Получаемая паста имеет светло-коричневый цвет и содержание в ней сухой массы составляет 0,1 г. Общий выход белка 91 %.

Пример12. Осуществляя процесс так,

5 как в примере 8, выделяют черную гемовую пасту, используя в качестве исходного материала 2,2 г смеси кровяных клеток. Эту пасту перемешивают со смесью 30 мл 40%-ного (по объему) этанола и 0,2 мл 2 М имидазола

0 в70%-ном(пообъему)этаноле. ВеличинурН доводят до 7,0 посредством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле. Температура составляет -5°С и содержание этанола в смеси примерно 42% (по объему). Данную

5 смесь центрифугируют, как в примере 8, и получают всплывший слой с содержанием тема 58% от содержания его в исходном материале, и темно-красную пасту. Эту пасту экстрагируют два раза 70%-ным (по объ0 ему) этанолом и имидазолом в указанных количествах, каждый раз при величине рН 7 и при -5°С и получают всплывшие слои, содержащие соответственно 26 и 5% тема от содержания его в исходном материале. 065 щий выход концентрата тема составляет 89%. Получаемая паста имеет светло-коричневый цвет и содержание в ней сухой массы составляет 0,1 г. Общий выход белка 91 %.

П р и м е р 13. Осуществляя процесс так, как в примере 8, выделяют черную гемовую

пасту, используя в качестве исходного материала 2,2 г смеси кровяных клеток. Эту пасту перемешивают со смесью 20 мл 70%-ного (по объему) метанола и 0,2 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле. Величину рН доводят до 8,5 посредством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле. Температура составляет -5°С, содержание метанола примерно 60% (по объему). Смесь центрифугируют так, как в примере 8, и получают всплывший слой, содержащий 67% тема от содержания его в исходном материале, и коричневато-красную пасту. Пасту экстрагируют два раза 70 % -ным (по объему) этанолом и имидазолом в указанных количествах каждый раз при величине рН 8,5 и при температуре -5°С и получают всплывшие слои с содержанием тема соответственно18 и 7% от содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 92%. Получаемая паста имеет светло-коричневый цвет и содержит 0,1 г сухой массы. Общий выход белка 91 %.

П р и м е р 14. Осуществляя процесс так, как в примере 8, выделяют черную гемовую пасту, используя в качестве исходного материала 2,2 г смеси кровяных клеток/Эту пасту перемешивают со смесью 20 мл 70%-ного (по объему) пропанола и 0,2 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле. Величину рН доводят до 8,0 посредством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле. Температура составляет -5°С, содержание пропанола примерно 60% (по объему). Смесь центрифугируют, как описано в примере 8, и получают всплывший слой с содержанием 66% тема от содержания его в исходном материале и коричневато-красную пасту. Пасту экстрагируют два раза 70%-ным (по объему) пропанолом и имидазолом в указанных количествах каждый раз при величине рН 8,0 и при температуре -5°С, получают всплывшие слои с содержанием тема соответственно 16 и 9% от содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 91 %. Получаемая паста имеет светло-коричневый цвет и содержание в ней сухой массы составляет 0,1 г. Общий выход белка 91 %.

П р и м е р 15. Осуществляя процесс так, как описано в примере 8, выделяют черную гемовую пасту, используя в качестве исходного материала 2,2 г смеси кровяных клеток. Эту пасту перемешивают со смесью 20 мл 70%-ного (по объему) изопропанола, 0,2 мл 1 М глицина и 0,2 мл 2 М имидазола в 70%- ном (по объему) этаноле. Величину рН смеси доводят до 7,5 посредством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по объему) этаноле. Температура составляет -10°С, содержание изопропанола составляет примерно 60% (по объему). Смесь центрифугируют так, как в примере 8, и получают всплывший слой с содержанием тема 69% от содержания его в исходном 5 материале и коричневато-красную пасту. Пасту экстрагируют два раза 70%-ным (по объему) изопропанолом глицином и имидазолом в указанных количествах каждый раз при величине рН 7,5 и при температуре 0 -10°С и получают всплывшие слои с содержанием тема соответственно 17 и 9% от содержания его в исходном материале. Общий выход концентрата тема составляет 95%. Получаемая паста имеет светло-корич5 невый цвет и содержание в ней сухой массы составляет 0,1 г. Общий выход белка 91%.

Пример1б. Смесь 6 мл 96%-ного (по объему) этанола и 1 мл 1 М HCI при -8°С вводят по каплям при одновременном пере0 мешивании и охлаждении в 2,7 г крови при 0,5°С. После этого величина рН составляет 3,0 и температура -5°С. Затем в эту смесь вводят 2 мл 40%-ного сульфата аммония в виде водного раствора и смесь 20 мл 70%5 ного (по объему) этанола, 0,2 мл 1 М глицина в виде водного раствора и 0,2 мл 2 М имидазола в 70%-ном (по объему) этаноле при -8°С при одновременном перемешивании и охлаждении . Величину рН доводят до 8,0 по0 средством 0,5 М NaOH в 70%-ном (по

объему) этаноле. Температура составляет

-8°С и содержание этанола примерно 65%

(по объему). Смесь центрифугируют так, как

в примере 8, и получают всплывший слой,

5 содержащий 66% тема от содержания его в исходном материале и коричневато-красную пасту. Эту пасту экстрагируют два раза 70%-ным (по объему) этанолом, сульфатом аммония и имидазолом в указанных количе0 ствах, каждый раз при величине рН 8,0 и при -8°С и получают всплывшие слои с содержанием тема соответственно 16 и 7% от содержания его в исходном материале Общий выход концентрата тема составляет 89%.

5 Данная паста после промывки ее 50%-ным (по объему) этанолом имеет серовато-коричневый цвет и общий выход белка 85%.

П р и м е р 17. Используя в качестве исходного материала 22 г смеси кровяных

0 клеток, выделяют гемовую пасту, в результате экстракции которой при величине рН 4 10,4, при -5иС и с использованием 70%-ного (по объему) этанола получают первый экстракционный раствор в количестве 199 мл с

5 концентрацией гема 0,38 мг/мл, что соответствует содержанию тема 68 1 % от содержания его в исходном материале, второй экстракционный раствор в количестве 121 мл с концентрацией гема 0 17 мг/мл, что соответствует содержанию 18,6% от

содержания его в исходном материале, и третий экстракционный раствор в количестве 118 мл с концентрацией тема 0,08 мг/мл, что соответствует содержанию тема 8,5% от содержания его в исходном материале. Экстракционные растворы соединяют и подкисляют до величины рН 5,1, используя 87 мл 0,1 М HCI, при -5°С. Образующийся в результате этого черный хлопьевидный осадок отделяется путем центрифугирования при 3000 д, весовое количество этого осадка составляет 4,5 г. Эту пасту промывают три раза в 15 мл ледяной воды (в каждой промывке), суспензируют в 15 мл ледяной воды, доводят величину рН до 8,2 посредством 3 мл 0,2 М NaOH, замораживают и высушивают при температуре ниже 0°С. В результате получается 265 мг черного порошка с содержанием тема 36%. Общий выход концентрата тема составляет 86%.

Результаты анализа продукта,%. С 46,17; Н 5,30; CI 10,53; Р 2,8; Fe 3,57; N 9,6; К 3,5 и Na 4,1.

Пример18. В результате экстракции гемовой пасты, выделенной из 50 г смеси кровяных клеток, при величине рН 8,2, при температуре +1°С и с использованием 60%- ного (по объему) этанола и 4 мл 2 М имида- зола в 70%-ном (по объему) этаноле получают первый экстракционный раствор в количестве 494 мл с концентрацией тема 0,32 мг/мл, что соответствует содержанию тема 62,8% от его содержания в исходном материале, второй экстракционный раствор в количестве 467 мл с концентрацией тема 0,11 мг/мл, что соответствует содержанию тема 20,4% от его содержания в исходном материале, и третий экстракционный раствор в количестве 479 мл е концентрацией тема 0,06 мг/мл, что соответствует содержа нию тема 11,4% от его содержания в исходном материале. Экстракционные растворы соединяют и подкисляют до величины рН 4,0, используя 240 мл 0,1 М HCI, при температуре 1°С. Образуемый осадок отделяют, как указано выше, количество этого осадка

-

составляет 8,5 г. Пасту промывают три раза в ледяной воде, каждый раз по 25 мл, суспензируют в 25 мл ледяной воды, величину рН доводят до 8,5 и суспензию заморажива5 ют и высушивают при температуре ниже 0°С. В результате получается 510 мг черного порошкообразного продукта с содержанием тема 42%. Общий выход концентрата тема составляет 85%.

10 При мер 19. Осуществляя процесс так, как в примере 18, получают один-экстракционный раствор. Последний отдельно подкисляют до величины рН 4,0 и полученный черный осадок отделяют, промывают и вы15 сушивают при температуре ниже 0°С так, как описано в примере 18. Полученный таким образом концентрат тема содержит 55% тема.

Согласно предложенному способу, по20 лучают концентрат гема, содержащий гем в количестве не менее 40 вес.%. Этот концентрат гема предназначен для использования в качестве фармацевтического средства против анемии, а также в качестве обога25 щенного железом средства в пищевых продуктах . Продукт, полученный по известному способу, содержит примерно 10 вес.% гема. Формула изобретения Способ получения концентрата гема пу30 тем расщепления гемоглобина эритроцитов в присутствии дегидратирующего агента и разделения гема и глобина, о т л и ч а ю - щ и и с я тем. что, с целью повышения концентрации гема в целевом продукте, до35 полнительно используют геминовую пасту, содержащую глобин, при этом после расщепления рН сначала доводят до 7,5-8,0, а затем целевой продукт экстрагируют этанолом или метанолом, или пропанолом, или 40 смесью пропанола и изопропанола в равных соотношениях в концентрации 40-90 об.% при рН 8,0-10,7 или с добавлением имидазола при рН 6,5-8.5 при температуре {0)-(-20)°С и в присутствии солей хлорида,

45 цитрата или сульфата натрия или аммония .

Реферат

Изобретение относится к медицине и касается способа получения концентрата тема. Целью изобретения является повышение концентрации тема в концентрате. Способ осуществляется расщеплением гемоглобина или геминовой пасты, содержащей глобин, дегидратирующим агентом, доведением рН до 7,5-8,0, экстракцией целевого продукта этанолом или метанолом, или пропанолом или смесью пропанола и изопропанола в равных соотношениях в концентрации 40-70% по объему при рН 8,0- 10,7 или с добавлением имидазолз при рН 6,5-8,5 при температуре от 0 до-20°С в присутствии солей хлорида, нитрата или сульфита натрия или аммония.

Формула